Bionova: 2ª mostra convegno Biotecnologie e Bioingegneria-organizzato da PadovaFiere, Università di Padova, Azienda Ospedaliera Padova (presso il Padovafiere, 28 - 29 - 30 novembre - 1 dicembre 2001)

Uri le parole di senso compiuto e questi programmi non fanno altro che questo cercare di identificare di da questa apparente massa di sequenza assurda delle sequenze codificanti in effetti utilizzando più programmi questi sono programmi basati su algoritmi diversi di cui ovviamente non ci interessa entrare in dettaglio
Vanno a vedere se appunto questi programmi cercano di evidenziare la presenza di e sono in questa sequenza e vedete che quando più programmi
Per dicono lo stesso elemento nella stessa regione quindi molto probabilmente questa sequenza corrisponde a un gene queste moto uno dei modi per identificare Gene all'interno di sequenza genomica è quello di utilizzare più programmi diversi tra loro
A questo punto quindi da dato una una breve introduzione alla bioinformatica in generale vediamo un po'di entra nel dettaglio su cosa l'abbia informatica può fare nell'ambito della medicina molecolare quali sono gli aspetti che hanno interessano di più
Allora abbiamo detto all'identificazione di geni però in questo caso per quanto valga la medicina molecolare a me non interessa semplice ampi cento identificare i geni interessa identificare geni che abbiano un significato particolare Giani che ci possano interessare in modo particolare
Quindi geni ad alto valore biologico possibilmente Giani che siano anche coinvolti in patologia umana
E secondo luogo studiare appunto la funzione di quel delle proteine che questi geni codificano ancora una volta si è in condizioni fisiologiche che patologiche
Per quanto riguarda il primo punto
Identificare geni soprattutto all'altro col valore biologico possiamo ti ho riportato qui due esempi di strategie che si possono fare e si possono usare e praticamente parliamo della quello che ci può aiutare molto nell'identificare geni indi interessa è quello di trovare del dei geni che somigliano a qualcosa che è già stato studiato in precedenza
E questo può avvenire sia tra sia trovando geni che somigliano a geni che sono presenti in specie lontane dall'uomo geni cosiddetti conservati nel corso dell'evoluzione
O anche studiare a identificare dei geni che somigli no aggio ad altri geni umani che siano di cui il ruolo biologico sia in qualche modo già stato studiato quindi Jennifer facenti capo a famiglie Jennifer comunque vediamo uno alla volta questi due punti
Quindi cominciamo col discorso della conservazione Jennifer
è un fenomeno abbastanza che è stato osservato già la balorda molto tempo quello che sequenze di geni con ruoli biologici importanti
Tendono ad essere simili tra loro anche tra ove in organismi molto distanti tra loro dal punto di vista evolutivo quindi la distanza evolutiva tra due organismi non impedisce che lei geni più importanti tre presenti queste due specie si somigliano tra loro e questo ci permette appunto di identificare in modo più in modo abbastanza semplice diciamo semplice
Questa tabella riporta lesti da alcuni dati sui genomi di alcuni organismi modello quindi come diceva organismi modello sono degli organismi perché possono che sono state che vengono utilizzati
Perché su di loro sono stati fatti degli di sì si conoscono dei dati molto sui comasco molti dati dal punto di vista biologico sono stati caratterizzati molto in modo molto dettagliato dal punto di vista biologi si va addirittura da batteri come Escherichia coli
Lievito nematodi come si Elegance Drosophila
E qui un paragone con l'uomo quindi come vedete le dimensioni dei genomi sono molto diversi tra loro
I numeri dei geni sono anch'essi molto diversi
Però nonostante ciò
Ci possono essere delle delle similitudini dico di sequenza che ci possono essere utili
E questo praticamente un esempio di un progetto che ne abbiamo portato avanti in laboratorio ne alcun alcuni anni fa in cui abbiamo praticamente utilizzato come organismo modello la Drosophila che il moscerino della frutta come vedete non si può non sembra esserci niente di più diverso
Di di una grossa o fila rispetto all'uomo però nonostante ciò la la la Drosophila può esserci utile per identificare dei geni che ci vi interessa neanche nel genoma umano
Per esempio questo è un esempio di allineamento tra una sequenza di un gene di Drosophila e la sequenza di un gene umano purtroppo non è allineata bene comunque Credem credetemi sulla parola queste due sequenze sono molto ben mal conservate
E in effetti la cosa più quindi questi due geni sono conservati nel corso dell'evoluzione ma la cosa più interessante e che questi due geni
Il cui chimiche in il gene in Drosophila si chiama Aires cioè senza occhi praticamente mutazioni in questo genere la Drosophila causano l'assenza degli occhi
Mutazioni in Drosophila è nel corrispettivo umano portano danno luogo a un fenotipo simile addirittura quindi non solo in soli due giorni sono conservati dal punto di vista di sequenza ma anche la loro funzione conservata
Tanto è vero che mutazioni nello stesso genere specie diversi da non fenotipo simile
Infatti nel mutazioni di questo gene nell'uomo
Dando luogo a una malattia che si è che in quando una copia del gene è mutata dà luogo a cosiddetta mi ridia cioè l'assenza dell'iride
Ma quando entrambe le copie sono mutate danno luogo fenotipo molto più grave e che appunto fenotipo molto simile a quello osservato Indro Sophie
Per cui questa diapositive solo per sé sintetizzare il concetto quindi geni simili in sequenza tra come Drosophila possono addirittura essere coinvolto in patologie simili quindi che dimostra che la la loro conservazione anche funzionale nel corso dell'evoluzione qui c'è un altro esempio di un altro genere
Conservato tra le due specie che provoca quando mutato un fenotipo simile
Alla praticamente abbiamo utilizzato questo questa osservazione questa evidenza di conservazione anche funzionale tra geni di organismi diversi per cercare di identificare nell'ambito delle banche dati generate dal Progetto genoma dei geni che ci potessero interessare quindi che cosa abbiamo fatto abbiamo presso tutte le proteine di Drosophila
Che erano presenti al momento nella banca dati proteine l'abbiamo confrontata con la banca dati di frammenti di geni umani quella fra me e quei frammenti di R. neanche di cui vi ho parlato prima in modo lenti ficcare dei geni umani che fossero simili a sequenza di Drosophila
E per quindi è stato un lavoro effettuato chiaramente sull'analisi di sequenze sul Blast né tramite vie d'informatica e da questo lavoro son venuti pure una serie di di sequenze conservate tra come Drosophila che ne abbiamo con raggruppato in un a seconda del fenotipo che le questi geni del secondo diciamo della patologia che questi geni potevano causare indossò per il vantaggio di usare la Drosophila che su questi geni c'erano già delle informazioni
C'erano già molte informazioni quindi si sapeva che alcuni di questi erano correlati a tumori altri allo sviluppo la funzione dell'occhio la fertilità ecco e così via per cui ne potevamo immaginare una funzione per i corrispettivi già domani basandosi su quello che si sapeva in Drosophila e qui ce ne ho riportato un esempio di un gene umano identificato dalla banca dati
Di di sui frammenti genici umani che era molto simile abbastanza significativamente simile a una sequenza di Drosophila paventa la sequenza di un gene che si chiama retina dei Generation vini
Questo gene in Drosophila un gene altamente espresse retina
Ed è praticamente quando mutate coinvolte non nella degenerazione della retina
Il fatto che questo gene fosse conservato come sequenza ovviamente non ci diceva che fosse complice conservato anche dal punto di vista evolutivo per cui per dimostrare la Pasqua con la conservazione anche di funzione
Abbiamo effettuato degli studi di espressione queste praticamente l'occhio di di un è stato fatto su un occhio di troppo ultima sulle di espressione utilizzando il il gene di topo molto simile a quello umano ovviamente il segnale di espressione quindi ore che vedete qui in Rossanda rosso
Indica che questo gene altamente espresso nella retina quindi questo osservazione indica che probabilmente questo gene
Non solo a una sequenza conservata rispetto al già al corrispettivo di Drosophila ma probabilmente con ne conserva anche la funzione quindi la sullo studio di organismi sequenze tra di organismi diversi può anche aiutarci a trovare dei geni che ci possano interessare veramente quanto Pinciano e conservato nel corso dell'evoluzione tanto più significa che questo gene importante
E non è non tollera appunto variazioni significative
Alcuni di questi geni che ne abbiamo identificato poi sono stati posti in Colin relazione a malattie questi non sono stati ovviamente trovati tutti da da da noi alcuni danno e Altman la maggior parte da altri gruppi comunque da dimostrare che questi geni sono dei geni importanti dal punto di vista biologico e sono anche coinvolto in patologia
Allora invece per qua una volta abbiamo visto il discorso della conservazione tra geni tra specie diverse non è che possiamo utilizzare anche la conservazione all'interno di un tra geniali interno della stessa specie per trovare milioni di interesse
E qui ho riportato un esempio con quindi il discorso è che i geni che nello stesso organismo presentano delle analogie in sequenza possono svolgere funzioni simili e quindi fare parte di una cosiddetta famiglia genica
Come sempre riportato quello dei geni coinvolti in un forme di distrofia muscolare ed evitare che sono chiamate distrofia muscolare dei cingoli
Era risaputo che egli o il geniale Sabetta che era già stato riscontrato che Genet al fa Beppe gamma quindi il fatto che se fossero Alfa Bettega Masako dicano indicava che sono tutti e tre abbastanza simili tra loro
Almeno in certe regioni del la loro sequenza
E se era noto che questi geni erano responsabili della di alcune malattie muscolare
Un'analisi che della banca dati ancora di frammenti genici tramite ancora programma di comparazioni sequenze Blas evidenziato in questa banca dati c'era un quarto Gene era molto simile a questi tre che è stato chiamato Delta Sarko biplano effetti vedete qui l'allineamento tra le tre sequenze
E quindi questo gene diventava un candidato per essere membro della stessa famiglia possibilmente un altro candidato per malattie per distrofia muscolare
E in effetti il gruppo del professor Nigro ha dimostrato che questo gene era in effetti mutato in un'altra forma di distrofia muscolare
Quindi l'analisi delle banche dati per cercare membri simili a questa famiglia ha portato alla alla scoperta di un nuovo gene coinvolto in questa marcia e questo può essere uno degli esempi possono essere i fatti ancora tanti altri
A questo punto quindi passiamo al secondo punto secondo obiettivo attutire l'abbia informatica può aiutarci a raggiungere quello dello studio la funzione delle proteine codificate da geni ad alto valore biologico
E anche qui riporto un esempio ma Sanza schema abbastanza semplice di quello che ci può semplicemente dire un'analisi ben formati che rispetto a un gene d'interesse
Nel mille novecentonovantotto è stato identificato un Gene responsabile per una forma di malattia neurologica ereditaria cosiddetta per la denominata paraplegia spastica ereditare una malattia e caratterizzato da spot spasticità progressiva agli arti inferiori comporta difficoltà della della deambulazione
E qui per dimostrare che questo che questa famiglia i soggetti affetti che sono indicati quei cerchietti pieni non hanno praticamente hanno hanno l'assenza di questo gene come evidenziato dall'assenza di queste di queste bande
La cosa interessante comunque che quando è stata fatta un'analisi Blast con la sequenza di questo gene per capire quale fosse per capire a chi fosse questo gene fosse simili simile è venuto fuori che questo gene ancora una volta che si simile molto simile a un gene Jai identificato nel lievito
Una un praticamente una una era finita una proteina mitocondriale che faceva parte della catena respiratoria
Allora che cos'è l'omologia ballerà molto simile che cos'è il mito contro queste praticamente l'allineamento tra Rotella il gene identificato responsabile per questa malattia e queste proteine mitocondriale della catena respiratoria che come vedete si estende lungo quasi tutta la la sequenza
I mitocondri patente se questo è lo schema di una cellula è praticamente quello indicato quindi che corrisponde appunto a questa struttura
è praticamente la centrale energetica della cellula Morganella cellula contiene degli organelli al suo interno
è uno di questi è il mitocondrio che appunto presiede presiede alla formazione di negli substrati energetici per l'attività della cellula ora i neuroni sono tra le cellule più lunga Tanzi sono sicuramente questo il tipo IGP il tipo di neuroni a fare affetto nella paraplegia spastica evitare il tipo di Nerone il neurone più lungo che esiste
All'interno del corpo umano per cui i processi energetici sono fondamentali per il funzionamento di questo neurone per cui alterazioni a carico del mito contro possono spiegare la degenerazione selettiva di questi neuroni per cui l'analisi Blas l'analisi in via informatica ci spinge e ci porta immediatamente a ad effettuare degli studi in una certa direzione per per studiare significato di questa il la funzione di questa proteina
In effetti poi i dati predetti dall'analisi d'informatica vanno in ogni modo confermate infatti l'analisi tra per tramite hanno un anticorpo diretto contro la proteina paraplegica che responsabile per la malattia
Ha dato per andare a vedere dove questa proteina si localizza all'interno della cellula
Ha dato dei risultati simili a quelli quando che sono ottenuti quando si effettua un'analisi simile con una proteina specifica per il mito contro quindi la proteina mitocondriale la Pro e la parola e la la proteina per la benzina si localizzano negli stessi posti quindi dimostrando che la localizzazione mitocondriale predetta dalla dall'analisi dei formati e confermato anche dal punto di vista sperimentale
Qui abbiamo visto in modo molto schematico quello che l'abbia informatica ci può aiutare a realizzare vediamo adesso quali possono invece quali devono essere quali saranno le prospettive future dell'analisi d'informatica abbiamo fino adesso ho parlato semplicemente dico allineamento tra sequenze quindi comparazione tra sequenze
Però non dobbiamo dimenticare che la proteina non dobbiamo irreversibili immaginarla come semplicemente una catenella di amino acidi che ma praticamente come una struttura che si ripiega su se se se lo assume una struttura tridimensionale
E quindi la Corte non analisi sequenza nel futuro ne dovremmo anche considerare l'analisi di struttura delle proteine
Praticamente queste se queste lana è una proteina è la sequenza amminoacidica di una proteina la dobbiamo immaginare che questa sequenza
All'interno della cellula poi dà luogo a una cosa di questo tipo è una proteina che si che diciamo agisce che crea una struttura una sua struttura tridimensionale nello spazio
Ed è proprio questa struttura diciamo tridimensionale che conferisce la proteina la sua funzione
E infatti questo è un esempio semplicemente deve dimostrare che le proteine assume una struttura particolare questo è il complesso della distrofia che è un complesso che alle la cui mutazioni in le cui in cui mutazioni portano a varie forme di distrofia muscolare quindi la struttura della proteina ente consentì consente a queste proteine di interagire con altre proteine
E quindi la struttura di una proteina ne determina alla fine la funzione le interazioni molecolari con altre proteine per cui è pensabile che anche sequenze che non si somigliano tra loro dal punto di vista appunto almeno a civico possono però assomigliarsi dal punto di vista di struttura e quindi svolge funzioni simili per cui in futuro
La comparazione tra sequenze non si baserà solamente sull'analisi se quei non faremo sola solamente un Blas provvederà a chi somiglia la mia sequenza ma faremo anche un'analisi utilizzando all'altri tipi di programmi tra la struttura della mia proteine l'assoluto è una banca dati di struttura di proteine per andare a vedere a quale struttura somiglia la mia poteri ovviamente questo ancora oggi non è molto facile da fare perché non sono disponibili le strutture tridimensionali di molte proteine ma in futuro ovviamente prevedibile che con l'aumentare dei dati sarà possibile fare un'analisi di questo tipo che porterà dei risultati più diciamo importanti per quanto riguarda lo studio della funzione di queste proteine
E ovviamente la struttura di una proteina de come abbiamo detto prima determina anche la la possibilità di questa proteina di interagire con altre proteine e piumino Banti decida di conclusione ho quasi finito
Questo punto quindi come ricopriva ogni proteina non rappresenta un'entità a sé stante ma per esserci esercitare la sua funzione interagisce con molte altre proteine
E quindi lo studio della rete di interazione tra le varie proteine umane rappresenta un pezzo non ovviamente una tappa necessaria ai fini della comprensione delle loro funzioni
E qui riportato un esempio di una complessa rete di interazioni che queste e tratto da un il lavoro che è stato fatto sul lievito lievito contiene aver come vede il suo numero molto inferiore di proteine rispetto all'uomo per cui già potete ma di questo è semplicemente un frammento della rete di interazioni tra le varie proteine
Di lievito potete immaginare quale sia la complessità di studiare una cosa simile nell'uomo con almeno trenta quaranta mila proteine diverse e sarà appunto compito della bioinformatica quello di catalogare tutte le i dati che derivano dallo studio delle interazioni da proteine effettivo travet fare delle relazioni appunto artefare diciamo dare un senso a questi dati
Per cui in conclusione diciamo che è ovviamente l'abbiamo fermati che ha svolto un ruolo fondamentale nel corso del Progetto genoma
E soprattutto il suo ruolo diventerà ancora più importante nella fase di analisi dei risultati generati con la creazione di nuove banche dati tra cui banche dati di struttura banche dati di interazione è ancora molte altre banche dati che saranno tutte in relazione tra loro grazie per l'attenzione
Io ringrazio il dottor bancario questa brillante esposizione rimane tempo forse attorno a rapida domandasse cioè
La ringrazio ancora vorrei chiamare adesso al podio il professor Gian Antonio Danieli del Dipartimento di Biologia dovevo vista di Padova che ci parlava sull'analisi computazionale di dati di espressione genica
Grazie
Prima di tutto
Volevo far notare che come avete sentito dalla relazione precedente il settore dell'informatica è un settore che spazia in una campo vastissimo di applicazione di mi limiterò a segnalarmi soltanto una possibile applicazione la quale ci siamo occupati
Nel fare questo nel segnalarvi i nomi delle persone che hanno lavorato questo parte volevo anche danno un'idea del tipologia della preparazione tre persone
Dalle si è una prova mista sistemista bisogni neolaureato in medicina Romualdi è una dottorato a in statistica e Stefanel Bortoluzzi
E lo tratta in genetica
Alleva gran parte del merito di questo lavoro che iniziato anche durante la sua tesi dottorato questo per dare l'idea che e la la la molte competenze integrate possono dare dei risultati apprezzabili
Allora cominciamo da un problema che non è stato qui toccato ma che certamente importante
Problema che le case farmaceutiche hanno di fronte una situazione veramente disastrosa per quanto riguarda i loro investimenti
Se seguissero il tipo di diciamo strategia che un tempo era quello comunemente adottato è inutile che indica appunto reputo questo ma insomma sono dati che fanno accapponare la pelle
Quindi
La Biotecnologia e i dati dell'impiego dei dati delle circa genomica sono apparsi a queste case farmaceutiche come una assicura
Strategia alternativa a quella tradizionale
Problema è questa corsa
Tipo biotecnologico a cui si partecipa con le conoscenze con le metodologie eccetera
è una corsa tipo corsa a cento metri una maratona realtà puramente le due le due cose sono tutte guerriere
La maratona diciamo la la la capacità di mantenere la pista c'è una volta individuata e di portare a produzione un farmaco una volta individuato
Che quel famoso potrebbero essere potenzialmente utile eccetera eccetera quindi certamente la piccola biotech non è in grado di fare un farmaco d'altra parte però la individuazione del target cioè della della molecola importante e sicuramente un discorso di sprint chi arriva primo evidentemente ha un vantaggio enorme
Allora
In sostanza
Il punto chiave tutto questo discorso
La possibilità di dedurre
Possibili prodotti biotecnologici dall'analisi della genoma e soprattutto alla sua espressione cioè dal capire
Quali siano i geni differentemente espressi facevano normale e il patologico e quindi quali possono essere possibili bersagli di una terapia o di una diagnostica eccetera
E di cosa avete già sentito parlare di ieri chi era questa sala sento parlare di mattina esattamente questo
Allora la così intensi Recoba gli orologi e cioè la biologia fatta al calcolatore è una scorciatoia molti economica perché i computer costano poco anche ho compiuto di potenza notevolissima ha un costo limitato e l'unica cosa che costa per fortuna
è praticabile l'intelligenza umana c'è ci sono persone esperte fa una bella differenza tra per la persona brillante capace tra della persona che non è in grado di fare le cose con la stessa capacità
Allora arriviamo al punto
Il dottor Bargigli appena detto dalla quantità enorme di dati che sono riversati questi dati sono stati nel tempo organizzati in banche in un database qui è soltanto una piccolissima parte della Rete di database diversi alcuni sono abbastanza stabili ATI sono molto mobili cioè cambiano anche di tempo in tempo
E già il navigare adeguatamente in questi è una capacità che è importante non non è la capacità che palmeti fare tutto ma certamente una buona base di partenza
Io mi fermerò a parlargli di una piccola parte di questo che parte da Imagine
E che deriva da questo data base da questo base di dati di esteri cui avete sito appena parlare dal dottor Banfi celeste sono express si questa ex pezzettini di sequenza espresse che a partire dal mille centonovantuno quando Craig Venter si inventò questo sistema per andare direttamente sui geni senza dover aspettare di sequenziamento tua genoma
Per ragioni brevettuali mi diceva ognuno ogni ci viene a che troviamo a ci vediamo l'etichetta roba nostra
Questi dati sono stati riversati
Come prodotto sequenziamento i numerosi e librerie di tessuti umani e anche non umani normali e patologici
Il regime è praticamente la banca dati che attraverso un processo che si chiama il clusterizzazione cioè di analisi chiude questa norma in base ai dati raggruppamento di questi in modo tale che ciascuna sequenza che vada sopra che si sovrapponga almeno in parte un'altra diventa parte di una serie chi si chiama cluster che corrisponde a un trascritto e quindi
Angela
Attraverso
Spero di mi darai può queste grazie
Allora dicevo che
Queste Imagine altro non è che un sistema per mettere insieme tutte Lester che appartengono steso trascritto o presumibilmente così della schietta e quindi che corrispondono a un determinato gene Espresso allora detto questo
S'siccome in origine ci sono anche le indicazioni di provenienza di ciascuna delle destre che sono state catalogate quindi a quale libreria appartiene e come è stata fatta quella libreria questa è una miniera interessantissima ad esplorare risalta esattamente quello che non l'abbiamo fatto
Si vede per esempio che questo è il totale delle sequenze che sono rubati in cluster Imagine che come vedete è una cifra molto rilevante e che corrisponde a circa novantasei mila trascritti
Novanta sì mi ha detto che non vuol dire novanta si mila geni del ritorno ieri molto inferiore e questo vuol dire anzi che la la collezione di trascritti di origine alla collezione buona perché poeti e contiene anche trascritti diversi dello stesso gene
Allora quello che abbiamo fatto noi
Di andare a esplorare questa realtà cercando di tirare fuori dei significati biologici
E
A partire da una selezione a monte di libreria che erano state selezionate da noi perché era librerie
Non normalizzate non sottratte e quindi presentava campioni statistici di geni di trascritti
Determinate cellule di Bernardi tessuti
Avendo
Prodotto
Dei dei software specifici per organizzare questi dati realtà si è arrivati a costruire dei profili di espressione di singoli tessuti di cui
Potete immaginare che si tratta di cataloghi molto lunghi molto complessi ma a cui la cui costruzione basata su un principio estremamente banale cioè immaginiamoci per esempio che ci sia
Un gene in genere per la desmina per esempio e chi aveva trovato in una libreria di muscolo scheletrico centocinquantanove
Estere di un muscolo scheletrico semina questo mio desmina sul totale delle orchestre trovate per tutti i geni trovati in quella libreria di muscolo scheletrico ventiquattro mila ottocentodue
Allora chiede cinquantanove sul totale fa zero seicentoquarantuno per cento quindi vuol dire che ne possiamo stimare
Con questa cifra stima è una stima grossolana ma comunque sembra stima possiamo stimare che
Il trascrittore ad eliminare rappresenta sul totale di trascritti colazione lo zero sei centoquattro per cento allo zero sei per cento
Allora facendo questo si può quindi
Avere un catalogo in cui sono ordinati
In ordine di
Percentuale di espressione i geni dal più spesso via via nell'Espresso a migliaia
E questo
Una una mafie una pagina in cui si vede per esempio so questa moda muscolo scheletrico in cui il generi più Espresso nel muscolo scheletrico adulto edizione Praga decreti inchinarsi e poi viene mioglobina e poi pronti nervosa Malino troppo biodinamica Gina Beck comune stata Patrizio spetta qui mi fa vedere anche una cartina con l'interessante quali sono gli altri tessuti in cui troviamo espresso questo gene seppure in maniera diversa
Aveva già da qua vedete che igieniche sono il precetto suo sono espressi anche da qualche altra parte quindi e Jenson abbastanza espressi in tutti i tessuti salvo che quello che differenzia un genere un tessuto all'altro è il livello di espressione ciascuno di questi geni
Allora noi abbiamo
Finora prodotto
I profili di espressione di questi quindici
Tessuti Diversi umani adulti e questi sono i numeri di Est su cui si somma si basano queste queste cose e il numero di geni a cui corrispondere trascritti di cui abbiamo detto
Tra queste reperibile in Rete sono e questo annuncio è semplicemente una risorsa quindi questo è stato un modo di fare una risorsa
Questa risorsa però ci dice delle cose interessanti
Invece dice che se noi diamo vedere un tessuto
La percentuale
Di trascritto totale cioè di trascrizione totale quindi la la particolari trascritti e che ci sono dentro
In relazione al numero di geni
La prima cosa Presidente che il numero di geni
Che fa la maggior parte da trascrizione prevede questo per l'ottanta per cento trascritto corrisponde a circa mille geni
Negli ultimi cinquecento geni quindi il numero di geni espressi in un tessuto
è relativamente piccolo e quindi sono pochi geni molto espressi
Però potrebbe dire beh questo perché il muscolo scheletrico si sa che eccetera in realtà invece se voi vedete e questi sono cervello colore Tina utero e polmone
E sono le librerie più ricche quelli su cui ci si può fidare di più perché i dati sono maggiori il maggior numero vedete che assolutamente le cose si sono sovrapponibili
Notizia ma questa questo tipo di cose sono sono degli errori dovuti non so al fatto che questa ideologia in silicone biologia invece in vitro
E questa comparazione tra dati missili come ai dati derivati visitasse Ige quindi al sequenziamento di frammenti
Ottenuti indirettamente su un campione
Comparabile costruirli IMI di di seggi su muscolo scheletrico Conto Sui si ricompattano il muscolo scheletrico perché in pratica c'è una ottima rispondenza
Allora cosa si può fare con questi dati beh prima cosa interessa uno che si interessa di lei
Ideologia eh capire qualcosa al
Espressione differenziale come mai un muscolo scheletri dove scheletri conosco cardio che Cardia con muscoli cilicio
Allora se voi fate una cosa di questo genere ritrovate che per molti geni Sisto effettivamente oggettivi e dimostrazioni evidenza diciamo minuziosa scusate evidenze di una ditta espressione differenziale
Ma a parte questo
La cosa che è il più sorprendente invece e questo è una cosa abbiamo trovato che è stata anche pubblicata
E che credo sia aprendo le le proteine che codificano per cioè gli scura di geni che codificano due proteine riposo mali
E che si trovano semplici ma i cataloghi di tutti quanti i tessuti io mi aspetto che bene o male son poteri boh somali e quindi siano egualmente espresse in tutti quanti i tessuti invece qui si vede come
Confrontando tessuti riversi confrontando proteina riposo mali cioè vieni per potere Bordonali diverse ci sia una differenza
Va bene questo non dice che i ribosomi del cuore siano diversi da quelli del fegato
Dice però una cosa importante perché le proteine libro somali veloci Miccoli che noi conosciamo come poter riposare verosimilmente hanno delle funzioni extra riposo mali e questa cosa molto importante
Perché perché per esempio quando si va a vedere un tessuto tumorale si vede molto spesso che le proteine Ribot somali del tessuto tumorale sono diverse cioè molto più espresse certe piuttosto che certe altre
E quindi per esempio questo potrebbe essere già un'indicazione di un possibile targhe terapeutico per esempio cioè un taglio di di un di un trattamento
Quindi questo tipo di di dati sono dati che riguarda la biologia ma ho appena detto che ad esempio
Un problema interessante e quello di tumori perché evidentemente essendo i tumori purtroppo una patologia molto frequente
è molto importante
Cercare di arrivare a una comprensione ai quali si Eugenie differenziamento espressi i tumori sia per fare una diagnostica fine che quella di cui ha parlato con sua Lanfranchi
Ieri
Ma siamo anche per vedere se ci sia una prospettiva d'identificazione di geni difettosi media specie quindi possibili ritardi Tosi un target non solo come target di molecole farmacologicamente attive in senso terapeutico ma anche per esempio di
Molecole che sopra espresse nel tumore e riversati in circolo a causa della loro sono espressione perché per esempio possono se sapete diventino dei marcatori tumorali e quindi diagnostica diagnostica precoce eccetera eccetera
Quando abbiamo avuto finora due esperienze
Di cui questa su un lavoro fatto con questo sistema su tumori renali che è stato proprio in uno studio pilota anche questo dati che abbiamo pubblicato di recente e un lavoro invece in cui si sta dedicando attualmente la dottoressa
Bortoluzzi che è un'analisi molto accurata molto profonda della Raboni sua come è umano
La scelgo questo tumore perché un tumore abbastanza raro ma nello stesso tempo tumore di cui si sa molto della parte normale cioè del fatto il muscolo e quindi il fatto di avere una buona conoscenza
Della espressioni profilo trascrizionale minuscolo
Sia dal punto di vista si ricopre di oggi sia dal punto di vista
Mesi di quella sperimentale va in visita ieri dal polso Lanfranchi il suo gruppo quello collaboriamo si sta occupando della lavoro con gli arredi del muscolo scheletrico
Quindi che impegni adesso in quei suoi posso già anticipare che anche qui ci sono un po'alcuni geni selettivamente espresse dal professor coma e non espresse nel muscolo normale e viceversa
Allora
Qual è loro il potenziale sviluppo di questo tipo di
Di questo tipo di di lavoro da cui avete
Mi pare di aver assunto quali sono le tappe allora
Io posso farmi questi profili
Di espressione di tessuti umani
Devo vivere un sistema per comparare questi profili espressione
E per rilevare quali di questi eventuali variazioni siano statisticamente significative su questo
Voglio punto spendere minuto perché è una cosa importantissima è vero che anche a livello diciamo i programmi che vengono forniti insieme con le le macchine di lettura degli array insomma ci sono dei programmi di statistica
Però un lavoro che ha fatto la dottoressa Romualdi insieme col muso Bortolussi e con altri
è stato di comparare
E la efficacia di questo tipo di
Programmi
Attraverso un processo di simulazione Montecarlo e poi di estrazione di dati appunto dare tipo cioè simulando di avere a che fare con delle librerie in cui da cui si strano trascritti eccetera eccetera
E è risultato che in effetti non tutti i programmi statistica Sonata e idealmente efficienti per segnalare delle evidenze Cygni di significativa differenza
Questo anche questo è stato pubblicato e in Rete non solo sono anche in Rete e si può scaricare da questo sito nostro tutti i programmi statistica è uno se li può poi gestire a casa sua sul suo computer
Ma questo è un punto fondamentale
Allora una volta di una larga scelto quali sono i geni differenziamento espressi
E qui c'è scritto Spresim retina perché questo è il programma a cui stiamo lavorando in questo momento
Cioè io prendo un tessuto vado a vedere quali sono i geni selettivamente espressi altamente espressi in quel tessuto
E poi che cosa faccio ottengono in pratica avete visto solo pochi geni molto espressi quindi età posso da tutta la massa dei geni mettiamo di quaranta mila aziende di trentacinque mila quanti siano scegliere
Quella migliaio o addirittura qualche centinaia di geni
Sul quale lavorare selettivamente
Perché lavora selettivamente perché i geni che sono molto espressi in un tessuto
Sono verosimilmente con o espressi nel senso che sono anche quello regolati e quindi se io selezione un gruppo di geni molte specie nel tessuto posso sperare che
Attraverso l'analisi
Della parte di regolazione che sta a monte del genere
Possiamo trovare delle cose importanti sulla loro regolazione trovare qualcosa loro colazione vuol dire trovare qualcosa per spegnerli o qualcosa per accenderli
E quindi per esempio progetto che abbiamo adesso in corso abbia iniziato e quello di avere
Il prende in considerazione la retina prendere il gruppo di geni retina specifici
Prelevare le regioni a monte prelevare vuol dire privare delle banche dati genomiche veglione Monte
Del gene
E esaminare queste due a monte con dei progetti dei programmi di sostegno di Somma in parte predizioni il promotore ma anche invece programmi rischiamo un soffio di Patta Discovery che sanno cioè identificare se ci siano delle sequenze che non sono casuali di sostanza
Allora questo praticamente dovrebbe portare alla scoperta di elementi di regolazione aretina specifici
E d'altra parte il fatto di avere
Diciamo delle delle analisi lo stesso delle regioni promotori Ali e diciamo delle sequenze che stanno nella parte regolativa dovrebbe farci trovare dei nuovi fatto ritrascrizione aretina specifici
Cioè
In questo modo come vedete si passa da avere delle banche dati che sono tutte accessibili in cui ognuno può metterci le mani
A livello di concentrazione dell'informazione di valutazione dell'importanza di uno di questi formazione della proposta di qualcosa da fare
Che
Come vedete
Passando attraverso che specifico Parioli ritorna laboratorio
Ora questo è un modo di lavorare secondo me che estremamente produttivo
E ovviamente
è qualcosa che sta cambiando anche la via regia sulla biologia per anni ha continuato a fare esperimenti del tipo o delle cellule in vitro di dopo qualcosa vedo cosa succede ma tra l'input l'auto di questa cosa
Ci sta in mezzo una macchina che noi non conoscevamo
Allora è come avere una scatola nera pub chiusa era buia
Far così non sono picchiare e sentire un rumore e dedurre da rumore che si sente come organizzato all'interno da scatola cosa veramente molto complicata
Invece in questo modo ci si avvicina dal pulpito mitologico a quello che l'approccio tra fisica e la chimica
Sì ha già un'idea del modello
Sì prova a fare un esperimento invaso modello e poi l'esperimento fatto di laboratorio e ci dice se il modello che ho in mente
E che era basato comunque sui dati già esistenti e abbastanza consolidati è quello che ci aspettiamo
Tra queste integrazione tra via informatica
Informatico intendono soltanto la biologia computazionale ma anche in metodi dissolsero eccetera disponibili e la il lavoro di laboratorio secondo me e quello che non solo insomma arricchisce non biologi conoscenza importante ma sicuramente e quello che può dare a quelle aziende farmaceutiche o che si mettono in questo biotech timido in questa in questa corsa
Quello sprint di cui hanno oggettivamente visioni e devo dire anche a basso prezzo
E per questo ringrazio
Non c'è arma sarà felice che ho finito prima
Non so Danieli Bindo felice stupirmi a finito con circa sei minuti di anticipo quindi lo ringrazio moltissimo abbiamo tutto il tempo necessario per una ampia discussione di questa molto interessante relazione vi sono domande
Prego
Niente me ne ha mai semplici Zanchini è non conosce questi unità di chi diviene informatica così potrebbe eventualmente in un safari dico sì tranne in qualche posto cercare di indagini
Famiglia come gestirsi contrasti tra tre anni
Se queste la domanda importante perché in effetti questo tipo di professionalità
è molto importante anche per chi lavora i lavoratori di ricerca insomma anche se su questo non c'è dubbio
Allora ci sono per esempio dei dei corsi di laurea che adesso in queste nuove Laurens da che cominciano a timidamente introdurre queste cose nel loro pacchetto informazioni però non c'è dubbio che la velocità con cui si muovono
Le banche dati eccetera richiede una esercizio abbastanza costante
Bush sul settore cioè voglio dire non è possibile che uno che abbia imparato a fare che ne so Blast e basta tre anni fa adesso si mette a fare delle cose e e riesce ad avere delle delle cose importanti in mano cioè è vero che non si può pretendere che tutti quanti si mettono a fare un gruppetto di persone che si occupa di questa questione i professionisti diciamo
Però credo che delle persone che hanno una banale conoscenza diciamo così abbastanza elementare di navigazione in internet abbiano conoscenza ideologia un pochino diciamo di dimestichezza col computer
Riescono a a imparare rapidamente
Naturalmente il numero di banche dati e e tale tanto
Che non si può pensare di fare tutto cioè via selezionare certe banche dati e fermarsi su quelle apre invece non sa usabile sui Scotto sullo stato usa bene in un ginnasio non so se usato bene che ne so locus mente che alcuni punti fondamentali credo che lei abbia un vantaggio enorme insomma e questo può impararlo rapidamente
Noi abbiamo anziano che usa noi non la duce bordo Luzi Duilio a questo sito
Un programma
Va be'
Prego allora dicevo che ha tenuto adesso di recente un mini corso avversari Ferrara e ha preparato Belice studenti una serie di mi
Illustrazioni dediti questa disciplina di questo piccolo pacchetto e quindi sollevata sul sul sito se lo trovassero legge provo a fare gli esercizi e credo che molto vantaggiosamente riuscirà utilizzando insomma
Altre domande ha detto Lucio Camilli
Forse dopo sorridono cosa io Antonio questa allusione
Che tu a che tu hai fatto alla restano a possibili fatalmente nuova e direi secondo me molto importante dire uscire
Apre vedere funzioni diverse per profferite notte però sarebbe tu hai detto che il fatto che si esprimono in modo così differenziale dei tessuti le proteine che Bolton viali indica direi che non c'è altra conclusione ruoli non riposo mi ha detto che potendo riposo Minali e questa ma è una prospettiva secondo me di di di notevolissima portata potrà dire qualcosa di più per esempio tu dici
Altri ruoli cosa ha in mente quando pensi a ruoli non ribosomiale troppo tenera riposo viali
Dunque quello che si sa troppo poco in mente perché questo aprirebbe la strada di sperimentazione di lavoratori importantissima insomma no noi abbiamo pubblicato e speriamo che qualcuno ci va dietro a questa cosa
Però non c'è dubbio che in in ci sono alcuni dati già pubblica di letteratura
In cui si dimostra che c'è una variazione
Della trascrizione di alcune di alcuni geni protervo somali in alcuni tessuti tumorali questo è sicuro
Quindi si e anche sembra durante lo sviluppo
Quindi sembrerebbe che
Siccome questi due fattori queste due situazioni c'è sviluppo e tumore sono differenziamento bene bene o male sono sono qualcosa tale a che fare col cambiamento di funzioni
è possibile che questi agiscono in questo contesto non so in che modo
So che modo potrebbero essere qualcosa di che che scatena qualche tipo di risposta non ho non so dire perché questo tutto al lavoro da fare a livello di il bancone non a livello di computer però questa è la mia idea è che via bisogna
Mi auguro genomica e farmaco genetica
Devi arrivare al microfono premendo ecco bravo
Nel Macbeth perfetto
Possiamo allora
Innanzitutto ringrazio gli amici e colleghi di Padova per l'invito ma soprattutto
Per a vero organizzato questo convegno in cui quelli di voi che sono stati qui da ieri come meta ieri mattina hanno veramente visto dipanarsi
Grazie appunto all'abilità degli organizzatori proprio lo stato dell'arte della biologia molecolare della biotecnologia della genomica della proteomica e soprattutto come dalla scienza si passi alle applicazioni ed è appunto di una di queste applicazioni
Che voglio parlargli
Soprattutto riguardo al fatto che come avete sentito oggi siamo da parroco da pochissimo entrati nell'era però sto genomica
E mi sono stati illustrati tutti i progressi nella caratterizzazione
Delle alterazioni a livello molecolare nel nostro genoma
Di queste variazioni di sequenza di cui parleremo molto nella sequenza del DNA e quindi nelle proteine adesso codificate
E soprattutto di questa complessità di cui abbiamo sentito parlare sia ieri che stamattina di integrazioni fra
Il genoma e i prodotti genici dai suo codificati
C'è però un ulteriore livello di complessità
Ed è proprio uno degli elementi portanti del corso di medicina molecolare che io tengo all'Università di Milano alla Seconda Università di Milano cosiddetta Milano Bicocca
E dove l'interazione sarà il nostro genoma e l'ambiente
Perché dovete ricordare e tenere sempre presente che
Noi siamo tutti diversi e questo ovviamente
Basta poco per rendersene conto ma noi non siamo soltanto tutti diversi seppure siamo molto simili nella nostra costituzione genomica ma siamo anche tutti i diversi perché la nostra storia dal momento in cui noi veniamo concepiti
Da quel momento comincia un'integrazione
Fra il nostro patrimonio genetico che abbiamo ereditato in parti uguali dal nostro padre dalla nostra madre e a loro volta questo patrimonio genetico è stato trasmesso di generazione in generazione
Ma
Dal momento del concepimento comincia una storia nuova e questa storia nuova il risultato di un'interazione estremamente complessa fra il nostro patrimonio genetico
L'ambiente e gli insulti l'intera azioni di carattere ambientale con cui noi ci confrontiamo e ci confronteremo per tutta la nostra vita
Sulla terra e questa è una legge a cui non si sottrae nessuno degli esseri viventi tutta questa introduzione mi serve per entrare poi direttamente in argomento perché perché la farmaco genomica non è che un esempio di questa interazione fra il nostro genoma e l'ambiente
Nel senso che l'ambiente vuol dire l'aria che respiriamo
Le sostanze inquinanti presenti nell'aria ma anche nell'acqua che vediamo
I cibi che mangiamo per cui l'alimentazione ha un ruolo anche fondamentale nel renderci più o meno soggetti a determinate patologie
E ovviamente oltre a ingerire cibi da quando sono state scoperte le virtù mi dà medicamentose di certi estratti di certe piante a o di altre sostanze
Noi in giriamo ci troviamo a confrontarci con farmaci con sostanze ad attività terapeutica
La farmaco genomica
Vedete nella definizione il risultato la combinazione della cosiddetta genomica funzionale e voi a questo punto dovreste avere un'idea abbastanza chiara di che cosa si intende
Per genomica funzionale con la Farmacologia soprattutto quella che studia
I a fenomeni di azione dei farmaci a livello molecolare e in questo si differenzia dalla cosiddetta farmaco genetica
Che semplicemente il precursore della farmaco genomica in quanto studiava ma studia ancora
Il fenotipo
Perché e soprattutto basata su quello che poteva essere lo stato dell'arte
Non più tardi di cinque dieci quindici vent'anni fa
E cioè
La biochimica dei processi che la farmacologia andava a studiare a livello molecolare oggi ovviamente dal fenotipo noi possiamo far passare al genotipo ed ecco entrare quindi in scena la
Farmaco genomica che
L'evoluzione della farmacocinetica ma con un qualcosa in più come è stato già anticipato
Uno degli obiettivi
Della farmaco genetica della farmaco genomica e di trovare le correlazioni fra le risposte ai farmaci e i profili genetici dei pazienti ma alla fine della mia presentazione voi vedrete come ha già anticipato il professor Daniele
Che
Non è solo questo l'obiettivo ma ci sono delle ricadute importanti soprattutto per l'industria
A non soltanto diagnostica ma anche terapeutica quindi farmaceutica per scoprire per trovare nuovi farmaci
Allora
Il nostro discorso parte da una realtà molto
Particolare che pochi conoscono e che è legata al fatto che gli effetti
Collaterali dei farmaci sono un problema con il quale i medici devono confrontarsi e quindi è il fatto che molto spesso i farmaci o non hanno effettiva addirittura hanno effetti dannosi in una percentuale non piccola della popolazione
Quelli che non prendono i farmaci sono un caso a parte in cui ovviamente non abbiamo tempo di dilungarci
Monterosso dardi troppi dettagli ma questa immagine rende conto del fatto che per esempio se noi somministriamo un farmaco antipertensivo spesso e volentieri non osserviamo la riduzione della pressione sanguigna che vorremmo
Addirittura certe volte vedete come questo dato è sconvolgente abbiamo addirittura l'effetto contrario un farmaco che dovrebbe abbassare la pressione la fa addirittura aumentare e questo non è un problema legato solo a questa categoria di farmaci ma c'è una lunga lista di farmaci in cui vedete addirittura quando poi andiamo a parlare di chemioterapia antitumorale è un problema accettato dagli oncologi sia pure molto a malincuore
La maggior parte dei pazienti non rispondono o rispondono in misura molto parziale
Questo è un altro dato veramente molto preoccupante e cioè che queste reazioni avverse avverse ai farmaci causano dei problemi gravissimi addirittura di
Morte terrà
Reazioni avverse questi sono dati un po'vecchie risalenti agli Stati Uniti ma purtroppo confermati di anno in anno addirittura nel mille novecentonovantotto si è stimato che un un quinto di queste morti per reazioni avverse sono dovute a farmaci di impiego
Estremamente comune come i cosiddetti antinfiammatori non steroidei che si prendono per esempio per far passare il mal di testa i dolori reumatici quindi problema
E il fatto che
La farmacologia e la farmacocinetica lo studio a livello molecolare comincia a farci vedere come questi problemi sono legati
A una
Costituzione biochimica che cominciamo a conoscere molto bene molto in dettaglio legata appunto al fatto che noi siamo costruiti in modo tale da cercare di interagire al meglio con l'ambiente che ci circonda quindi il nostro patrimonio genetico Fassi che per esempio noi abbiamo tutto un corredo
Di enzimi che sono stati catalogati classificati cosiddetti enzimi di fase uno e di fase due
Questo vuol dire semplicemente la possibilità di razionalizzare due tappe in cui sia una prima privatizzazione biochimica di certe sostanze che molto spesso sono difficilmente solubili
E che l'organismo vuole eliminare delle quale l'organismo vuole sbarazzarsi
E allora una prima deriva attizza azione viene fatta con tutta una categoria di enzimi che vedremo più in dettaglio
In seguito e una volta avvenuta questa derivati Zazie Oneta parte degli enzimi di fase uno può avvenire
Una seconda fase che consiste spesso nella coniugazione di questi sostanze indissolubili che ha seguito a queste modificazioni chimiche diventano più solubili e quindi possono essere eliminate per esempio con le urine
Bene
Allora se ci soffermiamo a questa fase uno voi vedete
Che
Il nostro organismo ha messo in atto una Zalayeta i addirittura una ridondanza estrema di sistemi per attuare queste veniva attizza azioni queste modificazioni delle sostanze
Legate soprattutto a questa categoria
Di enzimi che va sotto il nome di cito come motti quattrocentocinquanta che è una famiglia multi genica che dà origine quindi ha un'enorme varietà di proteine
Quelli di voi che hanno seguito la presentazione del professor Righetti ieri hanno visto come il Proteo ma ha una complessità enormemente superiore a quella già incredibile della genoma
E questo nella è che un esempio di questa complessità e della ridondanza di questi prodotti genici
Oggi noi cominciamo a caratterizzare
I geni che codificano per questi citocromi per esempio
E sappiamo appunto dalla farmacologia molecolare che molti farmaci di impiego clinico
Per esempio questi che sono delineati in questa figura sui quali sulla quale non posso soffermarmi troppo ma che sono farmaci di impiego vastissimo in clinica uno di questi è stato già illustrato ieri da parte della professor Gasparini
E a questo effetto anticoagulante ma
Anche gli enzimi di questa fase due non si sottraggono a questa legge per esempio importantissimo questo gene che codifica per latina purina metiltransferasi che a un impiego nella cura delle leucemie soprattutto in ambito pediatrico e in cui la variazione
Di sequenza quindi la possibilità che ci siano dei cosiddetti polimorfismi
Genetici e che quindi risultano in modifiche del prodotto genico quindi di questo enzima codificato dal gene tipi enti
E estremamente importante per per vedere possibili effetti tossici motivati all'uso di questi farmaci di questi chemioterapici in nella chemioterapia delle leucemie infantili per esempio in questo caso
Ma la lista del dei geni e dei rispettivi prodotti genici che intervengono a modificare l'azione di certi farmaci non si ferma a questi enzimi ma coinvolge anche per esempio degli importanti sistemi di trasporto perché noi i farmaci ovviamente gli assorbiamo le assorbiamo a livello della parete intestinale a livello del torrente circolatorio quindi abbiamo problemi di distribuzione di questi farmaci di accesso
Agli agli organi e tessuti bersaglio e quindi ci sono dei sistemi che cominciamo a conoscere cominciamo a caratterizzare
L'asta but not least
I sistemi recettoriali quindi veri e propri bersagli cellulari o intracellulari sui quali agiscono questi farmaci anche a questo livello
C'è una varietà notevole di risposte che possono
Essere conseguenza
Della fatto che anche a livello dei geni che codificano per questi recettori ci possono essere variazioni nella sequenza polimorfismi
E quindi variazioni nel prodotto genico risultante e quindi differenze di azione quest'ultima che voi vedete qui protrombina genio per la protrombina o anche per un altro importante fattore della coagulazione che il fattore quinto la cosiddetta mutazione di Leiden
Questo è un esempio sul quale mi voglio soffermare perché il risultato del lavoro di un gruppo italiano il professor Mannucci a Milano
Ed è molto indicativo del discorso che io voglio farvi perché noi sino adesso abbiamo parlato di farmacocinetica e farmacodinamica e voi immediatamente pensate a una situazione a un contesto di persone malate
Ma in realtà questo discorso non si applica soltanto ai problemi dei pazienti ai problemi dei ricoveri in ospedale ma anche a popolazioni assolutamente sane perché
Perché per esempio la
Farmaco genetica e speriamo anche la farmaco genomica della pillola anticoncezionale dei contraccettivi riguardano don in età fertile che non hanno nessun problema
Apparentemente
Di salute e che assumono però questi che sono farmaci
No potente bene ci sono dei polimorfismi nel fattore quinto nulla protrombina che espongono queste donne al rischia di sviluppare trombosi venose quindi voi vedete come importante per il clinico
Effettuare delle analisi che permettano di stabilire lo status quindi la assenza o la presenza di questi polimorfismi perché potrebbe
Può risultare questa combinazione fra il patrimonio genetico il genoma di queste donne l'esposizione
A un ma farmaco come la pillola contraccettiva che potrebbe dare origine a fenomeni trombotici
In un altro
Dei problemi che qui non sono illustrati ma che sono hanno analogamente potenzialmente dannosi sono altri inquinanti ambientali di tipo voluttuario come per esempio il fumo di sigaretta
Anche quello espone il nostro organismo ha dei problemi di cui non c'è bisogno sui quali non c'è bisogno che mi soffermo
Non ho tempo per soffermarmi in dettaglio sulla
Gli aspetti tecnici che sottendono a questa figura ma quello che questa figura vuole illustrare e il fatto che una volta somministrato un certo farmaco se noi andiamo a analizzare una popolazione di soggetti una popolazione di pazienti e vedere come rispondono come si distribuisce la risposta a questo farmaco
Noi crediamo che
L'idea così necessarie per osservare un effetto terapeutico in questo caso stiamo parlando
Di farmaci antidepressivi vedete che le due così necessari per vedere per osservare questo effetto si distribuiscono in un ambito molto vasto in alcuni pazienti è necessaria una dose bassa in altri Paci e impazienti e necessaria
Alzare enormemente la dose
Questo introduce un'altra caratteristica che i farmacologiche gli indici conoscono bene e del fatto che i pazienti si possono catalogare classificare come cosiddetti norme tabulari sversa cioè scarsamente metabolizzando ti oppure
Rapid fast metà bolas cioè rapidamente metabolizzato anti e voi adesso potete capire che a seconda della no capacità che questo sistema enzimatico di derivati Zazie ore di modificazione a e che quindi varia da individuo a individuo le risposte potranno essere di tipo oppure metà Budweiser oppure quindi scarsamente lentamente metabolizzati oppure rapidamente metabolizzato
Questo che cosa vuol dire vuol dire che
C'è una situazione di potenziale pericolo perché quelli scarsamente lentamente metabolizzando dipenderanno ad accumulare
Prodotti potenzialmente tossici di un certo farmaco e quindi a potere sviluppare effetti collaterali indesiderati effetti tossici
Al contrario c'è una categoria di rapidi metabolizzato deriva addirittura in certi casi ultra rapidi metabolizza attori i quali eliminerà hanno rapidissimamente questo farmaco e quindi non risentiranno e non avranno nessun beneficio
Dalla somministrazione del farmaco bene oggi noi cominciamo a capire qual è la base molecolare di queste differenti risposte al farmaco
Ma
In questa raffigura voi cominciati a vedere anche un'altra novità di cui non vi ho parlato finora
E cioè del fatto che queste risposte di prova per metà dollari Search for rapido metà Baumeister variano
Non soltanto da individuo a individuo ma da popolazione la popolazione vedete qui caucasici asiatici neri africani
Arabia Saudita Etiopia questo cosa vuol dire
Vuol dire che ci sono studi che sono stati effettuati da epidemiologi quindi da studiosi delle popolazioni i quali sono andati a vedere la correlazione di questo fenotipo
Scarsamente metabolizzando e lentamente rapidamente e l'incidenza percentuale incerto popolazioni e poi vedete che allora noi incidenze variano in queste popolazioni
E quindi e importante non soltanto sapere che le risposte a un certo farmaco sono diverse da individuo ad individuo ma anche il medico deve sapere che quel certo farmaco va somministrato con certe precauzioni soprattutto se si trova in un'area geografica dove l'incidenza di certi Titti di metabolizzazione varia e oggi ovviamente con la globalizzazione e questo è un tema caro soprattutto a certi contestatori
De di oggi la globalizzazione farsi che questo non sia un problema da sottovalutare perché
Un farmaco e venduto lo stesso farmaco dalle multinazionali in Estremo Oriente come in Europa negli Stati Uniti in Africa eccetera eccetera ma questo ovviamente ci porterebbe a dibattere dei temi che sono estranei all'appunto che io voglio fare però non solo uno da sottovalutare e per fortuna i progressi della tecnica ci aiutano anche a affrontare queste tematiche etiche in modo più consapevole
Ed è sulla base di questa
La realizzazione di queste differenze di popolazione che io costituito insieme a colleghi dell'Università Bocconi di Milano una cosiddetta start-up Company che si chiama medi media di cui vedete il luogo cui
Medicina mediterranea perché noi riteniamo che le popolazioni mediterranee abbia non molto da insegnare e abbiamo anche diciamo una scuola genetica italiana che ha dato dei contributi eccezionali basti pensare al professore
Ma Luigi Luca Cavalli Sforza che insegna negli Stati Uniti basta pensare a quella d'oratorio naturale che la Sardegna ma anche altri cosiddetti isolati genetici
E per cui c'è questa ricchezza questa diciamo opportunità che non lui speriamo di poter utilizzare
Bene
Qualche cenno sulla base molecolare
E quindi la capacità di analizzare a livello del genoma questi tipi di risposte una delle sorprese che sono derivate dalla analisi del genoma umano
E appunto il fatto che uno di questi geni per questi citocromi non si trova anche un altro e assente
Nella sequenza del genoma depositato in banca dati e questo ovviamente non deve sorprendere perché data l'estrema ridondanza di questi sistemi evidentemente anche chi non possiede questo gene
Può la la funzione di questo gene può essere soppiantata da quella di altri geni
Ma se qualcuno magari vorrà approfondire questo argomento vedo il CERM anche comincia a sollecitarne quindi lo possiamo approfondire in seguito non c'è tempo adesso come non c'è tempo di soffermarsi sulle a agli studi avanzamenti dello stato dell'arte dal punto di vista metodologico soprattutto legati a questi cosiddetti polimorfismi di un singolo nucleotide
E alle metodiche che per esempio anche noi in laboratorio siamo oggi in grado di affrontare per quanto riguarda queste mutazioni o questi pure i polimorfismi ecco che diciamo hanno una prevalenza statistica e oggi abbiamo la possibilità di utilizzarli e di cui ci sono degli esempi abbastanza documentati
L'ultimo flash che voglio darvi e appunto il fatto che la lista di queste aziende che si occupano di farmaco genomica per fortuna non è soltanto una lista di aziende degli Stati Uniti ma ce ne sono molte anche in Europa
E addirittura cominciano a esserci di quelle che sono sia europee che negli Stati Uniti
Vi dicevo che ci sono sorprese derivanti dal fatto che non soltanto la farmaco genomica è utilizzata per Screen are
E evitare eventuali effetti collaterali ma serve anche nel cosiddetto processo di disco veri quindi nella possibilità di migliorare lo studio e la scoperta di farmaci questo perché permette alle industrie farmaceutiche di selezionare
Nelle a a popolazioni dei volontari sani per esempio che si sottopongono a i primi esperimenti con un certo farmaco e quindi già in una fase molto frequenti precoce della sperimentazione clinica evitare
Le
A i risvolti indesiderati ma addirittura in una fase ancora precoce di sviluppo preclinica o e quindi migliorare la possibilità di la selezionare i farmaci giusti che poi verranno portati a livello di a prove cliniche
E da ultimo questa figura illustra come una sintesi di tutte quelle tematiche di cui avete sentito parlare quindi la genomica
E la proteomica e soprattutto la possibilità di determinare le strutture tridimensionali avete sentito ieri
La conferenza del professor Martino Bolognesi che è uno dei più grandi esperti italiani in questo permette oggi alle aziende farmaceutiche di integrare queste conoscenze per sviluppare nuovi
Cosiddetti l'inizio cioè nuovi candidati a essere i farmaci di domani
E anche in questo caso qui c'è una lunga lista della quale non voglio tediarvi di aziende che impegnate sia nella genomica sia nella proteomica che
Nel così detto Desai molecolare quindi nell'utilizzo degli dati strutturali insieme comitati genomi Cipro tre omicidi
Tanto per darvi un esempio questo un meeting che si è tenuto in agosto negli Stati Uniti
Attorno a queste tematiche ci sono state bello quattro mila specialisti di tutte le aziende mondiali ma anche
Di gruppi accademici che si sono dati convegno per discutere per presentare le ultime novità in questo settore
E l'ultima
Via figura e quello che potrebbe essere un futuro non lontano
In cui voi ragazzi che siete qui magari andrete dal farmacista con la vostra sequenza di DNA su una piccola tessera è lui la inserirà
In un suo calcolo a Torino e questo servirà per disegnare e per somministrare il farmaco più appropriato alla vostra costituzione genomica grazie
Grazie al professor Soria per questa molto stimolante relazione io cado poiché non sia così lontano futuro dell'ultima diapositiva forse più vicino quello che pensiamo abbiamo tempo per un paio di domande
Forse tre posso fare una a nocciolo manda benissimo
Mi scusi potrebbero sembrare anche banali due osservazioni la prima è legata alla queste creazione di una carta di identità individuale no
Per ognuno di noi quindi che mette in chiaro il nostro genoma potrebbe sembrare in questi momenti di risparmio per la sanità
Una cosa così sulle prime un po'antieconomica secondo me in questi tempi in cui si parla di riservatezza dei dati personali mettere in chiaro come siamo fatti dentro
Mi sembra un po'contro senso però vorrei un chiarimento
Queste due domande che lei pone non sono affatto banale ma sono veramente il punto nodale di questioni che potremmo dibattere
Singolarmente sia la prima domanda che la seconda domanda per ore e ore perché hanno dei risvolti come dicevo prima anche di tipo etico e di tipo appunto la seconda sulla riservatezza dei dati allora su questo secondo argomento
Si può essere ottimisti e pessimisti gli ottimisti dicono noi siamo già in un'epoca in cui la privacy di fatto non esiste più
Noi possiamo essere monitorati in mille modi
Noi scienziati per dirne una siamo dei curriculum ambulanti perché basta andare in culla di queste banche dati di di biografia scientifica per vedere quello che ognuno di noi ha prodotto in tutta la sua vita professionale
D'altra parte anche lasciamo tracce continue
Io
Quindi il problema della riservatezza che lei solleva e sicuramente un problema gravissimo e diciamo la proprietà dei dati Genova amici non si sottrae a questa e quindi il possibile utilizzo malvagio maligno e per esempio
Il discorso dell'analisi delle popolazioni ci sono scenari assolutamente fantascientifici di farmaci fatti per con i veleni fatti per colpire certe popolazioni anziché altre quindi se uno vuole essere catastrofico quindi al dire Che della visione ottimista la visione pessimista o catastrofica uno può immaginare tutti
Gli scenari che vuole
La prima domanda invece anche molto interessante riguarda il fatto di dire questo aggrava i costi del sistema sanitario non è detto anzi ci sono diciamo la farmacocinetica si inserisce molto nel dibatto su battito sulla cosiddetta farmacovigilanza
Quindi o farmacosorveglianza quindi il fatto che i farmaci dopo essere stati immessi sul mercato devono essere monitorati no bisogna cercare di evitare situazioni come quelle che si sono osservate colonnelli problemi con altri farmaci che sono stati ritirati dal mercato perché su milioni di pazienti si sono osservati effetti collaterali molto gravi allora
La farmacoeconomia esiste è una branca importante della farmacologia riguarda proprio la contestualizzazione delle nuove metodiche ovviamente in un'ottica di risparmio quindi di riduzione per esempio delle giornate di degenza ospedaliere che sono quelle che costano quindi di nuovo e un una valutazione dei costi ma anche dei benefici e quindi il risultato di questa analisi andrà nella direzione che diciamo dal punto di vista sociologico si farà sul ritorno di certi investimenti
Glielo chiedeva cosa io lo faccio molta agitazione effettivamente quasi da una posizione di avvocato del diavolo
Tua incentrato giustamente tutto sul polimorfismo genico come modo Hennessy per la risposta differenziata dei pazienti
Tu sai benissimo che la stampa i discorsi nelle famiglie continua ad alludere alle influenze difficilmente quantizzabili cosiddette nervose
Vorremmo che tu forse spendesse una Paolo due su questo perché avevo molti studenti in sala l'importante è che si vada a questo punto mi sono dei farmaci di cui sappiamo tutto assolutamente tutto facciamo cento la caffeina
Sappiamo che lo fanno parlare la pena perché gli studenti molte volte deportanza egli la sera per studiare quindi bevono il caffè bene è indubitabile che la caffeina che deve per forza dare uno stato di eccitazione stimolazione molto a volte fa dormire
Allora mi domando se questa cosa strana Rochester capire
Poi sapere uscì prima per scientifico non so cosa ne dice io dico che sicuramente quello che cominciamo a capire sulla variabilità del nostro assetto genetico che non riguarda soltanto il recettore
Per la Castellina e quindi tutto quello che l'effetto farmacologico di questa droga così diffusa che tutti noi prendiamo per aumentare la nostra attenzione
Ora ma anche per esempio la capacità
Che
è variabile in tutti noi nella sue farci per esempio al fumo di sigaretta quindi agli effetti della nicotina e viale delle altre sostanze estremamente variabile perché c'è chi non può assolutamente farne a meno di sviluppa uno stato di dipendenza e quelli invece come il sottoscritto che per fortuna per mia fortuna in quel caso lì
Nono questo tipo di Palmisciano di questa quindi sicuramente
La tua domanda rientra in quella categoria di risposte variabili
Da individuo a individuo e probabilmente anche se lì se ne sa molto meno se nelle popolazioni c'è un'incidenza diversa di risposta alla caffeina
Ma sicuramente è il caso dell'antipertensivo c'è invece definibile la pressione alla fomentare cioè l'importante è che il messaggio sia che noi siamo il risultato di questa complessità di interazioni è alla base di tutto c'è il metodo con cui siamo fatti quindi la la l'insieme dei polimorfismi nel nostro patrimonio genetico e
Derivante che noi abbiamo ereditato in combinazione da nostro padre da nostra madre ti ringrazio penso che abbiamo ritardo a cui si è iniziato
E quindi io devo ringraziare i tre relatori che hanno presentato orlo azioni molto stimolanti e molto interessanti pubblico che è intervenuto e quindi penso di dover passare il microfono altro suo Nicolini che è il coordinatore da ottavo comma dico bene Marino
Grazie a tutti grazie
Grazie per essere intervenuti
Io desiderò prima di iniziare tra tavolo tondo attuale dei doverosi ringraziamenti al presidente dalla Fiera che ospita questa bellissima manifestazione dottor Ferruccio Macola prodotta
L'impegno che ha messo vorrei ringraziare anche i colleghi del comitato scientifico del di via Nova e per essi ringrazio nostro ma abile presidente professor Pagano Franco Francesco Pagano
E poi ringraziò anche l'equalizzatore del sistema congressi che hanno a cuore il bene svolte loro compito
Per quanto riguarda la tavola rotonda
Il relatore invece che tre sono quattro perché poi purtroppo il dottor Riccardo Cortese Norton impegno imprevisto
E sì che quattro superiore
Ah scusa
Scusa
Ed essi sono il dottor Gian Pietro leoni che non ha bisogno di grande presentazione
Dottore ho elevato un economia commercio onestà Bocconi ed entrato nell'ambito della della forma celtico per così dire le mille novecentottantadue in abbonda dica Amenta per percorso il suo iter
Nel mio Novecento anta sette diventando
Direttore generale finanziario del gruppo Glaxo le minacce novantatré stradina consigliere delegato della Società Italia nel novantaquattro presidente nel giugno mille centonovantanove è stato letto Presidente Farmindustria le è stato rinnovato
Nell'aprile due mila uno
Non presenta ubicazioni tutto leoni il per il peso che i suoi le sue obbligazione c'erano i bilanci che presenta l'altro relatore che il secondo Torino Raponi Della Cairo di Siena laureato in scienze biologiche questa di Siena e apre ed è stato ed è stato assunto quella Sclavo nel mille novecentosettantotto quando esisteva appunto la Sclavo come ricercatore del dipende dipartimento di biologia molecolare
A a ha fatto dei lavori interessantissimi e bellissimi per quanto riguarda i vaccini contro la difterite epatite A le partite l'epatite A è un vaccino coniugato contro Intel menziono Cocco
Disinteresse di ingegneria genetica a da oggi responsabile del ricercate la Cairo machines
Il a quattrocento pubblicazioni
E parlerà sulla RAI verso ma sino a oggi
L'altro relatore il dottor Francesco Colozza
Medico laureato a Bari
Specializzato in euro immunologia allargano regia all'ecologia entrato fa parte nel mille novecentottantadue all'ottantotto Mario Negri Istituto Mario Negri di ricerca mal di Milano diventando poi capo della ricerca preclinica della farmacia a Nerviano nel mio novecentonovantaquattro dal mio novecentonovantotto direttore di ricerca e sviluppo della Dompè biotech dell'Aquila
Queste sono le prenotazioni doverose la tavola rotonda di oggi ha per titolo biotecnologia e ricerca farmaceutica
Ha un sottotitolo l'impatto della genomica proteomica e bioinformatica nel determinare nuove strategie di ricerca farmaceutica
Qualcuno scherzando
Si premura anche di sottolineare che non si chiama che si chiami Biotecnologia e non Dio tecnologia netta
Reato
Per la verità perché crede è proprio lui il primo biotecnologie biotech tecnologo ma a parte lo scherzo
A un altro c'è un altro significato è un richiamo questa questo scherzo questo modo di dire all'uomo hanno ne tenesse un dio e di averci nasce il creato con più umiltà nel senso con senso del limite però ripetere gli errori
Che sono stati commessi nel nel cosiddetto secolo dei Lumi al tempo di Diderot e dei sensi Monti che preconizza andò l'uomo nuovo
Sostenevano che dalla tu hai al nostro servizio e quindi si può usarla a nostro piacere col massimo dei profitti
Quindi a questo senso questa scherzo della parola si potrebbero richiamare il mito di Prometeo
Il previdente che rubò il fuoco dal cielo agli dei la portò alla terra nascoste in una canna di giunco da sempre infatti l'uomo
Nutre la ambizione smisurata di imitare l'atto divino della creazione
Questa impresa in in cui si intrecciano le euforia la vertigine del Creatore ed il timore per la creatura che potrebbe rivelarsi al suo demiurgo oggi sembra su un punto di riuscire la tecnologia informatica come abbiamo appreso in questi giorni
E soprattutto le vie tecnologie offrono la possibilità di imprimere una svolta decisiva all'evoluzione della vita dell'uomo
Di fronte all'immensità di queste prospettive allettanti da una parte forse anche rischiose sono incerti fa progresso e conservazione
Il torrente della vita reale secondo orto il pensatore Ortega sette siccome spiega il diluire del vissuto può straripare e travolgere le barriere della tradizione dell'etica
D'altra parte la convinzione ideologica non deve prevalere sulla credibilità della cultura e della scienza
è stato lo storico Francis Fukuyama qualche tempo fa a parlare di questo problema come di una lotta inutile perché nessuno nella storia dell'umanità è mai riuscito a bloccare l'innovazione
E si tratta anche di una crociata contro la vittoria sul giudice Fukuyama perché spesso la guidano proprio che i movimenti che amano definirsi progressisti
A noi operatori gestore della scienza ed i suoi gli esiti si presentano per l'imminente futuro scenari dove i limiti non sono ancora ben definiti né da un codice universale Ned accordi internazionali
A questo nuovo che fare però la possiamo rispondere modestamente con Orazio
Il saggio sia detto folle
E lì e ingiusto il giusto sì aspira l'anno alla virtù oltre il dovuto
Detto questo è dette queste cose ritorniamo all'oggetto della tavola rotonda che fortunatamente almeno così mi pare non ci pone molti problemi di questo tipo
La normativa per la produzione e registrazione dei farmaci sempre perfettibile e tutto sommato ben collaudata i direi anche sicura
Altri casi in in che altri cult tre cose scade per spalto accordo sono i problemi invece che le che questa produzione di fame si questa innovazione possono possono richiedere ma per questo motivo
Sentiamo e i relatori per quanto riguarda la genomica mi è parso di capire dalle cose che sono state dette in questi giorni e che ho sentito con grande attenzione
Grande amore anche perché sono cose nuove e molto molto belle a mio a mio parere però la genomica si parla di genomica e poi anche di porti se no mica
E di proteomica però anche la visione del genoma così come amo dirla io è una cosa ancora revisione ancora statica perché le interessante sa di salati capire per il prossimo futuro
Il dinamismo del Genoa del genoma cioè il genoma vissuto visto la partecipazione ma mi pare che su questo problema su questa tematica il il dottor Rappo le
Il dottore con lotta Porto Samp potranno riferire qualche cosa io darò la parola al dottor Leonetti e ringrazio
Non solo lui ma anche gli altri due relatori parabole per aver partecipato a queste ma questa tavola rotonda grazie grazie Presidente buongiorno a tutti
In questi quindici minuti che mi sono stati assegnati cercherò di dare una visione delle opportunità
Che ci sono nell'ambito della ricerca e nella ritiene l'avvio te nella ricerca biotecnologica guardando da un da una posizione privilegiata che è quella di presidente di Farmindustria ma anche dalle esperienze dirette
Come come presidente della GlaxoSmithKline
Di Verona
La mia il mio intervento che guarda più la l'aspetto strategico e di e di scenario essendo io di estrazione finanziario come professor Nicolini ha detto prima
Ma comunque cercherò di essere in più puntuale possibile nelle nei miei commenti
Se mi dà la prima ecco la prossima
Se noi guardiamo nel prossimo futuro nel giro di una decina una quindicina di anni i target di ricerca biologici o biologici e chimici passeranno dagli attuali cinquecento a circa
Il grazie alle conoscenze e alle tecniche moderne di ricerca
Il parametro il paradigma della ricerca che fino a poco tempo fa era un ricercatore una settimana una molecola
Sta per passare ad un nuovo Paran paradigma che sarà unte di cercatore una settimana mille molecole cento molecole al giorno insomma
Tutto questo quindi la dice lunga sulle opportunità di ritrovare nuovi medicamenti medicamenti che saranno molto più personalizzati e quindi indirizzati a nuclei
Caratterizzati caratterizzati da o o o i cosiddetti J. notai
Della popolazione ammalata avrà possibilità di fare maggiore e più e più e più efficace attività di prevenzione e di medicina Previti predittiva e quindi dare grande opportunità di cura e secondo me un popolo in salute poi ha possibilità di progresso di di progresso e di sviluppo sociale ed economico la prossima
Noi di credo siamo in una situazione in un momento in cui possiamo trarre vantaggio da una serie di fattori molto molto positivi
Che sono quelli delle nuove conoscenze la genomica la la proteomica la e tutto e tutte le altre compagnie e la chimica combinatoria le e così via di seguito ma anche
La possibilità di applicazione di nuove tecnologie di comunicazione e di telematica che permettono di trattare in tempi molto veloci dati affidabili
Dati qui in quantità sufficiente per preparare i dossier registrati ivi e quindi per approfittare per de per accorciare i tempi di elaborazione di ricerca e quindi di registrazione dei prodotti tutto questo però la prossima
Determina la necessità di sempre e superiori investimenti in ricerca e sviluppo
Se voi vedete la la la la la crescita delle spese di ricerca e di sviluppo a livello mondiale
è chiaramente superiore alle vendite globali mentre dall'altro lato vediamo che il numero delle molecole registrate anno per anno tende a diminuire indice perché i target sono quelli conosciuti le malattie
Consolidate sono come ci dice adeguatamente adeguatamente
Curate e quindi ci sono un numero di Hammett Medical Nietzsche cioè i fabbisogni medici non ancora curati ma questi cerchiamo di centrali appunto con le nuove ricerche di Biotecnologia
Le i valori in in gioco sono molto forti sono molto importanti per fare un nuovo prodotto
Dal momento in cui c'è c'è la la la la come dire la l'idea l'idea dalla dalla innovativa del della molecola o della o della o dalla o della ricerca biotecnologica al momento in cui si arriva sul mercato passano di solito tra i dieci e i dodici anni
Una spesa per ogni prodotto tra i cinquecento e i seicento milioni di dollari considerando anche gli insuccessi perché sì c'è ne partono un certo numero su mille idee storicamente solo una arriva al mercato però il finanziamento delle attività di ricerca deve essere fatto sui successi e sugli insuccessi tenendo conto della massa degli investimenti
E delle ed è e del numero delle molecole che arrivano a destinazione stiamo parlando appunto di mille e cento mille trecento miliardi
Dei prodotti che arrivano sul mercato
Solo tre su dieci possono essere definiti i cosiddetti Blockbuster piacciono quei prodotti che per definizione sono hanno un fatturato superiore ai due milioni di dollari o un milione di sterline un milione e sono quelli che con il loro che creano il ritorno finanziario necessario poi per chiudere il look chiudere il cerchio degli investimenti nuovi delle nuove necessità eccetera
Ecco questo la situazione
E la prossima se guardiamo il flusso di cassa se guardiamo il flusso di cassa
Chi vogliono circa diciassette anni affinché si sia il così detto pareggio tra gli importi investiti siano essi di ricerca di base di ricerca di sviluppo
E di lancio del prodotto e quindi di supporto a livello di di di di di di promozione sul mercato
E e quindi tutto questo coacervo di investimenti di solito o mediamente richiede circa diciassette anni per ritornare quindi e qui si potrebbe introdurre il concetto della copertura brevettuale
Che da per un certo numero di anni una copertura una esclusiva una esclusività di sfruttamento commerciale del ritrovato del ritrovato innovativo e brevettato
Cosa che in alcune circostanze anche in Italia con alcuni circostanze anche in Italia è stata è stato come dire
è stata commentata negativamente anche da componenti di governi precedenti il che la dice lunga poi i sulla possibilità e sulla capacità del nostro Paese di attrarre anche investimenti specialmente investimenti importanti
Anche a livello internazionale quindi questo la situazione
Quindi si potrebbe pensare qualche volta che attraverso l'innovazione tecnologica si risposò non risolvere tutti i problemi io credo che non sia proprio così se mi date la prossima io credo che per creare innovatività e per e per essere competitivi a livello internazionale non sia solo ed esce esclusivamente necessario e sufficiente
Avere a avere la preminenza o la premiership a livello di scienza e di tecnologia ma bisogna considerare anche altri fattori quali sono
I fattori di carattere socio economico nel senso di presenza di un mercato la presenza di investitori la presenza di di di di di innovatori e di imprenditori e anche una presenza di una sistema finanziario che permetta primo luogo l'assunzione dei rischi anche di alcune società
Nuove come diremo dopo ma anche di investire in modo adeguato in modo adeguato per per le attività di ricerca
Per farvi un esempio per per per per per esprimere con qualche indicazione di quantitativa le industrie farmaceutiche oggi investono mediamente circa il diciotto per cento
Dal dal loro delle loro del del dei loro ricavi nelle attività di ricerche di sviluppo dei prodotti e ci sono se noi guardiamo le prime dieci società nel nel ranch cioè nella classifica mondiale investono tra i sette e gli otto mila miliardi in un anno nelle ricerche di vario genere ora questo pretende la dice anche lunga sulla capacità competitiva del nostro sistema dove le nostre società anche le più grandi sono anche le più grande sono quelle
Sono considerate a livello mondiale delle medio-piccole la prossima quindi a questo punto il riconoscimento dell'innovazione attraverso i brevetti attraverso ricavi o prezzi che remunerativi e che e quindi che che permettono la profittabilità di andarle il reinvestimento è e il diciamo il riconoscimento dell'innovazione riconoscimento del plusvalore che l'attività di ricerca può dare in un sistema organizzato che permette quindi competitività a livello internazionale perché oramai il mercato farmaceutico va considerato un mercato globale a tutti gli effetti
E quindi la possibilità di vincere sul mercato di avere la remunerazione e quindi di continuare a investire
Tutto questo secondo noi viene fatto può essere fatto e in la prossima
Con la concorrenza e l'unione delle varie forze che possono che ci possono mettere in campo cioè a a mio avviso la concorrenza internazionale si fa a livello sistema Paese e non a livello di iniziative uniche linee iniziative singole e quindi dalle osservazioni che vi mostra loco parlando dei parchi tecnologici e dei cluster cosiddetti cluster a livello internazionale
è evidente ed è una condizione senza la quale non si vince che ci debba essere una importante collaborazione tra accademia
L'Accademia intesa nere come università ma intesa anche come centri di eccellenza di ricerca ieri sì le le le le le i centri centri anche pubblici ma anche privati
L'industria e anche le istituzioni centrali private l'accademia è chiaro che deve fare la ricerca di frontiera la ricerca della nuova conoscenza la ricerca delle nuove innovazioni
E coglie cioè la ricerca di base anche in senso di conoscenza astratta però
A nostro avviso deve assolutamente impegnarsi nella ricerca applicata
Quella ricerca che poi attraverso il trasferimento tecnologico possa dare luogo a Id e a e a prodotti sfruttabili commercialmente
Noi abbiamo esempi importanti a livello internazionale la meglio cliniche di rocce Sterne agli Stati Uniti dichiara che il trentacinque quaranta per cento del del del dei cioè i finanziamenti
Sono derivati o da Royal ti di brevetti ottenuti attraverso la ricerca e il trasferimento tecnologico ha delle industrie o dalle organizzazioni che hanno sfruttato commercialmente le loro nel loro le loro le loro l'idea dei loro i loro ritrovati
Oppure attraverso l'appalto di attività precise dalle industrie per
Contratti di know how scusate per contratti dico di cosviluppo nella quale loro mettono il know how attraverso un finanziamento per milestones cioè per per avanzamento lavori ed eventualmente poi con Royal Pisco quando quel ritrovato diventasse sfruttato l'altro giorno io ero perché devo dire che ora mai questo è un concetto secondo me anche condivido ero alla inaugurazione dell'Università di Siena e il rettore Tosi ha detto il legame tra università istituzioni territoriali e di impresa
E alla base del successo di ogni azione di sviluppo così in Toscana in Italia ed in Europa
Noi ribadiamo qui solennemente il nostro impegno ad agire in coerenza con questo principio incentivando la ricerca primaria
Ma anche quella utile al sistema della produzione agendo ancora più apertamente e massicciamente sul sostegno tecnologico all'impresa e quindi il trasferimento tecnologico c'era anche la cuori quindi mi fa da buon testimone
Ecco quindi dall'altro lato quindi poi l'industria con Licio investimenti di sviluppo i suoi e le sue applicazioni tecnologiche può rendere competitivo sul mercato quella innovazione
Ma devo dire che non è sufficiente a mio avviso ci vuole bisogna chiudere il triangolo attraverso le istituzioni centrali ma anche le istituzioni locali dalle osservazioni da noi infatti è importante
Che lo Stato sia presente disegnando e dettando un anche normative che definiscono un quadro di riferimento di carattere generale
Ma a mio avviso è molto importante che ci siano istituzioni locali a livello regionale a livello a livello anche di grande di grandi conglomerati urbani che mettono in atto alcune azioni che rendono l'ambiente amico
Friendly environment come si dice come dicono gli inglesi negli Dylan gli anglosassoni per poter attivare investimenti facilitare iniziative private o pubbliche o di o di o di o di Venture o o o di Venture Capital che possono avere uno una una prospettiva per il futuro noi abbiam fatto queste osservazioni la prossima e abbiamo visto che Laure
Ci sono i cosiddetti cluster di alta tecnologia o meglio ancora noi li chiamiamo i parchi tecnologici sia riuscito eccetera a siamo riusciti oppure quelli che lavorano in quei posti ci sono riusciti a mettere insieme una una capacità di integrazione dei tre elementi di cui parlavo prima di fare costruirti Lizzie Adelphi fertili session cioè fertilizzazione e trasferimento di informazioni anche sinergie
Gli esempi come vedete sono numerosi in Italia abbiamo qualche osservazione abbiamo abbiamo Siena abbiamo Milano
Abbiamo Trieste che storico e a Catania stanno facendo delle buone cose
In nei vari casi noi vediamo che la presenza la presenza dell'istituzione pubblica è importante in a Milano Formigoni ha deciso di fare il parco tecnologico della Bicocca ha deciso di fare il parco di Lodi e si sta attuando e sta muovendosi con normative locali che facilitino e e e rendono più più buono diciamo più facile e più e più profittevole
Iniziative
Così pure a Siena dove c'è un'università illuminata c'è la Cairo che può dare lei indicazioni che può dare diciamo le conoscenze avanzate di tecnologie di ricerca Piquet biglietti tecnologica c'è un ambiente finanziarie che il Monte dei Paschi che dà supporto finanziario ma c'è anche il il il capo il sindaco della City della città una città che è la città più cablata d Italia e mette insieme tutte queste condizioni favorevoli per creare le le opportunità di investimento e di assunzione di rischi
Noi abbiamo cercato di vedere la prossima quali sono quali sono le i fattori determinanti del successo di questi cluster
Allora in primo luogo bisogna che ci sia una università divisioni nel vestita di che che sono avanzate tecnologicamente che sappiano che ci siano istituti di centoquindici sia quel background quel quel quel sottofondo diciamo di capacità di ricerca e tecnologica
Che possono far sorgere delle idee innovative la presenza di industrie che abbiano anche loro applicazioni tecnologiche avanzate determina come ho detto questa fertilizzazione importante anche la presenta come dicevo delle università in particolare per l'accesso al capitale umano importante
Per farvi un esempio statisticamente mi dicono che le università americane certi nelle università americane circa il cinque per cento degli studenti
Si mette a fare spin-off dall'Università cioè creano iniziative industriali che vanno poi che che che che dalle quali poi qualcun altro eccesso vede il venerdì e il salto invece
Non lo hanno però il cinque per cento dagli studenti a una certa un a un a una tendenza a fare l'imprenditore che è una quantità non irrilevante
Chiaramente
Le università
Le università americane
Facilitano questo Traverso la costituzione di fondi e quindi il finanziamento di queste iniziative così come avviene in Israele e in altri posti del mondo quindi
La presenza quindi come dicevo prima delle delle tre dei degli elementi importanti l'altro Ponta importante elemento è la presenza di infrastruttura di di di carattere logistico
Che consentano velocità e come dire
E e facilitazione di scambi di idee ma anche di persone e di e di mezzi non sto parlando solo della non so parlando solo delle delle della logistica cioè del delle telecomunicazioni o delle o delle applicazioni tecnologiche di comunicazione moderne ci vuole anche la logistica tradizionale cioè le infrastrutture le le le le strade di comunicazione gli aeroporti che abbiano i collegamenti e così via di seguito
E poi come dicevo la finanza la possibilità di avere accesso al mercato di rischio con Venture Capital oppure alleanze eccetera eccetera
E anche
La presenza di una di una di una politica e quindi di organizzazioni istituzionali che siano amiche e che siano quindi vogliano
Attivare questi questi questi capitali e farne delle delle de de dei motivi di avanzamento e di sviluppo
Faccio due esempi per chiudere prima di di trarre delle conclusioni
Vi faccio l'esempio della Baviera ed è la Gran Bretagna la Baviera nel mille novecento e novantotto aveva deciso che il suo lente Land doveva diventare o almeno questo era l'obiettivo
La la la la la la zona ad a più alta intensità di industrie ad alta tecnologia dell'Europa
Cosa ha fatto ha preso tutti gli investimenti che aveva in nella nella old economy cioè nelle nelle il pietismo
Quale tradizionali che lo Stato italiano invece tende attenere molto stretti per motivi di carattere politico ha fatto seicento e trentacinque milioni di di di di di marchi
Ammesso anche insieme un paio di fondi per altri centocinquanta milioni di marchi e quindi ha messo a disposizione quasi ottocento milioni di marchi per tre anni proprio per le iniziative di piccole e medie imprese di alta tecnologia
Il risultato è che due anni dopo avevo duecento eventi
Due duecento eventi nuove società nuove iniziative di alte tecnologie comprese le biotecnologie le condizioni se noi andiamo a vedere io ho fatto uno studio anche per posizionare
La la la la la nostra società la GlaxoSmithKline dopo durante la fusione tra Glaxo e Smith Kline e siamo andati a finire a Monaco di Baviera perché è il posto più attrattivo uno dopo Silicon Valiera altri parametri di misurazione lo rendono al quarto posto
Però il problema è che ci ha messo dei soldi hanno fatto tutto quello che dovevano fare
La colla avuto tanto successo che a un certo punto il Foreign Office da dire del del della dalla dalla Gran Bretagna con gli inglesi hanno fatto uno studio perché avevano visto che c'era un flusso di capitali privati che usciva da Londra e dalla siti di ronde andava a finire a Monaco
E quindi erano erano alquanto preoccupati perché la formula al
No se e
Prego
E quindi dicevo era la loro capacità di attrarre capitale anche dall'estero è stata se è motivo di preoccupazione da parte dei dei territori concorrenti la Gran Bretagna a due importanti
Valli come li chiamano lacche balli alla fine balli la Camp e a Cambridge dove c'è il tra il fiume Camp e l'altro invece Edimburgo dove c'è il fiume fra
Lo stato lo stato inglese
Ha fatto un programma di richiamo e di per il ritorno degli investitori degli dei ricercatori che c'erano che avevano attività di ricerca nelle università americani in particolare a Boston e nella Route centoventotto che è una delle è uno dei dei parchi tecnologici più avanzati dall'est dell'Est americano
Hanno hanno capito che bisognava sto mettere dei fondi ha messo a disposizione sei milioni di sterline per le spese di trasferimento di trasloco di sistemazione dei loro ricercatori hanno ridotto le imposte per cinque anni ad un minimo indispensabile e hanno ridotto quasi a zero quasi a zero le imposte sulle stock option
Perché come sapete nelle iniziative in queste iniziative le stock option sono uno degli elementi di retribuzione e dico e e diciamo e di condivisione del rischio
Se la ditta va bene il ricercatore che ha sto Coccioli diventa si sistema
Per per sette riparo alle proprie generazioni future e quindi una riduzione della tassabilità su questi possibili capital gain
è importante per attrarre prova ne sia che adesso queste due questi due regioni sono indicate come tra le più importante
Quindi
Questa la conclusione la conclusione la ve la do attraverso la lettura di un articolo del professor Carlo Maria Guerci che voi probabilmente che voi certamente conoscete
Che in un articolo del Sole ventiquattro Ore del ventuno di novembre quindi meno di dieci giorni fa diceva innovazione è un Paese fuorigioco
Parlava delle vie di alcuni premi degli e dei premi che erano stati dati a dei ricercatori e delle idee in da dal Wall Street journal e diceva le condizioni i criteri per i quali sono stati date le
Le ragioni per cui allora il primo criterio e quello di premiare non solo le invenzioni che hanno avuto già un certo successo sul mercato
Ma anche le invenzioni pure
Sempre che queste siano stati invenzioni di rottura e non semplici miglioramenti ed evoluzione delle conoscenze esistenti
Il secondo aspetto è che la maggior parte delle invenzioni e innovazioni premiate sono state originate da piccole imprese spesso start-up
Costruite da pochissime persone da un solo leader queste imprese minori hanno avuto successo su tecnologie difficili dove sono fondamentali le conoscenze di base le capacità di pianificazione
Un altro aspetto è il ruolo importantissimo che hanno avuto le strutture universitarie
Infatti a volte i fondatori delle imprese innovative
Erano ricercatori universitari altre volte le imprese hanno comunque utilizzato intensamente la collaborazione di ricercatori
E di strutture universitarie sia per sinergie di conoscenza sia per l'aiuto che importanti laboratori potevano fornire nei testi e nelle prove quello che avevo detto prima per la Mayo Clinic
Infine un quarto aspetto quando l'invenzione innovazione sorta nelle imprese minori il ruolo del Venture Capital è stato determinante quindi la capacità di Acqui dire Intini capitali di rischio
Sono quattro criteri che io ho cercato di esprimervi in modo forse meno chiaro ma credo di avervi reso l'idea dei miei pensieri grazie
Grazie dottor leone perché sto per relazione anche se non è tanto favorevole al nostro al nostro Paese meno che meno al Veneto veneto che non è presente in quello che lei ha detto ha citato il la Lombardia e Siena e quindi dati di fatto
Di Putin toccato che sono i brevetti il ritorno finanziario e si potuto la mancanza della politica farmaceutica del Paese in sostanza che e anni cronache non c'è l'ANCI forse che dovevano mai avuta neanche indussero machete che c'erano sottaciute completamente distrutte sa qualche cosa che è un è rimasta rimasto ma italiano CP niente risolvere questo è dispiacere che si deve sottolineare va be
Allora diamo la parola al dottor propoli per cortesia grazie
Grazie dopo questo interessantissimo
Intervento dottor leoni che ha coperto in modo generale quello che la situazione delle Biotecnologia dalla finanza Del Piero dei ruoli delle delle di delle università strutture pubbliche eccetera
Quello che ho pensato di fare io di fare un esempio
Molto pratico
Che ci tocca da vicino di quello che può essere l'applicazione della Biotecnologia della genomica in genere
Il padre o di una cosa che abbiamo chiamato tre versi Bazzi Novelli che
In qualche modo fa vedere come il l'uso del genoma può essere usato per lo sviluppo per esempio di cose che fino a ieri erano impossibili con le tecniche che avevamo
Nel fare questo vi racconterò anche al alcuni aneddoti cosa il
So che fa impressione ma la realtà
è un bambino con meningite la meningite è una
Malattia molto seria tutti la conosciamo e fa molta impressione soprattutto perché e colpisce bambini e adulti fino a venti venticinque anni praticamente sani possono giocare a pallone nel pomeriggio e essere in in in ospedale rischiando di morire poche ore dopo
Noi ci siamo da tempo messi a lavorare per combattere la meningite
E facciamo vaccini lavoriamo eliminare la meningite causata da quella da meningococco causato da una servissero gruppi abc Y eccetera
Di meningococco
Molti anni fa non ci siamo messi a lavorare per cercare di elementi di fare un vaccino contro la il meningococco C abbiamo fatto con tecniche tradizionali abbiamo presso il polisaccaride capsulare
Tutto circonda il batterio perché è un polimero molto lungo di unità ripetute di zucchero l'abbiamo coniugato
Con legame covalente una proteina abbiamo fatto un vaccino che si chiamano vaccini coniugati funziona bene
Lo abbiamo introdotto in Inghilterra dovevano un problema di la meningite cinque sei volte più frequente che in Italia in cui ha avuto è stato introdotto un anno e mezzo fa ha avuto un successo incredibile novantasette novantadue per cento di efficacia questa una diapositiva di cui sono orgogliosissimo perché fa vedere linea rossa la meningite dall'inizio dell'anno
Alla fine dell'anno tutte quelle
E in Inghilterra linea rossa hanno novantotto novantanove non esisteva ancora il braccino
Linea gialla il bacino è stato introdotto qui questi casi che c'erano già stati non potevano essere eliminati
La sono stati pochissimi altri casi mentre veniva introdotto introdotto il vaccino e questo è giallo novantanove due mila
Questa linea quel giù il due mila due mila uno dal prodotto un bacino scomparso la malattia
Questi casi che vedete sono pochi ma sono una popolazione al di sopra di diciotto anni che che non è stata vaccinata da due mesi a diciotto anni l'Inghilterra vaccinato tutti con questo vaccino hanno eliminato la malattia dovuta a meningococco C
Nella nostra sfida contro le malattie perché sappiamo che avendo introdotto questo vaccino possiamo fare un vaccino trivalente a queste opprimendo qua ci Y e W e quindi possiamo eliminare la maggior parte dei casi di malattia darne di meningite batterica
Tuttavia esiste una
Un salotti Pons perché il di che non possiamo non riuscì diciamo non riusciamo a combattere con queste tecniche
Combacino uguale a quello la ragione è semplice quel bacino RAI basato su un antigene che la lo zucchero Achab polisaccaridi dove sta all'esterno del batterio
Che a sempre una una unità ripetuta di zuccheri in base abbastanza una due unità e schiera si ripetono all'infinito nel caso del meningococco B questo stato molto più furbo di noi perché lo zucchero con cui si circonda è un acido Police viali collegato Alpa due otto che è identico a uno zucchero acido quali se a lecco che è sulle nostre glicoproteine nostro sistema nervoso centrale specificamente la proteina n Cam
E quindi questo batteria è stato molto furbo si esprime con dato di un'anticima che poi il senso per noi e quindi non viene riconosciuto dal nostro sistema immunitario di conseguenza le tecniche tradizionali per fare un vaccino contro questo batterio
Non funzionano
Questo lo sappiamo da anni
Negli ultimi quaranta cinquant'anni tantissime hanno lavorato contro cui per cercare e trovare una soluzione nessuno inclusi noi nessuno c'è riuscito
Per riassumere quello che lo sviluppo di un vaccino contro meningococco B o in genere in diciamo che finora nel secolo passato sono stati sviluppati venti trenta vaccini efficaci
Il metodo è sempre lo stesso si più si coltiva microrganismo qui è un batterio però può essere un parassita può essere un virus eccetera Bessie Smith si smonta pezzetto per pezzetto si purifica un componente si porta in laboratorio una serie di test non funziona si butta via se ne torna al microrganismo sicuri di un altro componente si porta in laboratorio non funziona si butta via finché un certo punto si trova il componente che funziona e allora si incomincia il processo di sviluppo e se si ha fortuna alla fine si al prodotto
Questo in genere funziona una cosa che può prendere dai cinque quindici anni per trovare qualcosa di buono
Nel caso del meningococco B quarant'anni aggirare in questo cerchio non non non eravamo usciti e tecniche tradizionali non ci permettevano di risolvere questo problema di questo batterio che era stato più furbo di noi
La soluzione la soluzione è venuta piazza del Campo a Siena
Novantacinque novantasei leggendo Sáenz quando sulla copertina è venuto fuori la prima io
Questa figura che la prima la pubblicazione del primo genoma di notte di l'organismo vivente che era e il genoma del batterio haemophilus influenzae tipo B
E con questa cosa venute in mente ma possiamo risolvere il problema usando qualcun informazione una tecnologia che ieri non avevamo e che oggi
A disposizione
E con questa idea in testa sono andato a visitare Craig Venter che era l'autore di quel del quella pubblicazione del genoma delle Motolese influenza e con l'idea di chiedergli se aveva intenzione di aiutarmi anch'lavorare sul meningococco B
Sono andato a trovarlo e gli ho chiesto bellissimo questo lavoro primo Rizzo la sequenza del primo genoma ma perché ha fatto le mostruose influenza
Luglio non si aspettava questa domanda ha detto ma perché dovevo dimostrare che la tecnologia
Aveva riusciva a fare la sequenza di un batterio così questo l'ho capito di qua perché ha fatto di un batterio inutile l'haemophilus influenzae
Il problema è già stato risolto un bacino sul mercato e lo ha detto allora cosa dovevo fare rispetto ma se avesse se avessi fatto meningococco B poteva usare quell'informazione per cercare di risolvere un problema medico
La cosa l'ha affascinata o e devo dire in meno di mezz'ora ci siamo messi d'accordo che lui avrebbe fatto la sequenza e noi avremmo usato quell'informazione per cercare di risolvere questo problema impossibile fino ad allora
Questo è Craig Venter sua moglie Cleo fresa che sono venuti queste queste state questo primavera si erano le è stata conferita la laurea Donovan in
Medicina
Con lui abbiamo cominciato questa questa attività
Razionale semplice
Finora con la biochimica la genetica tutte le tecniche conosciamo non siamo risolto riuscire a risolvere un problema
Se il problema risolvibile e si può usare un componente del batterio
Una proteina per fare un bacino
In quel
Questa proteina può essere solo una delle due mila centocinquantotto proteine che vengono codificato dal genoma di questo batte non può essere da nessun'altra parte
Quello nazionale era se riusciamo
A usare questa informazione per trovare quella proteina se ce n'è una la possiamo trovare e possiamo risolvere questo problema
Partendo con questo razionale come ho detto qui è un altro aspetto della genomica della cosa moderno sommi Touati
A lavorare con una un capo laboratorio due studenti e cercare di competere con il mondo
Nell'affrontare questo problema e non mi sono io non mi non mi han neppure venuto passato per la testa di me e diventare uno che di imparare a fare in sequenza in grande scala sull'andava Carpenter che è la persona che la persona migliore al mondo per fare quella cosa
Poi io sono un dio Group un gruppo che fa Baccini e siamo abbastanza bravi in quello ma nel Milingo Coco non è che avevamo lavorato moltissimo qui sono andato a cercarmi
Ah oscuro dove c'è un morso anche uno dei migliori genetisti del mondo sulla
Nella meningococco essenzialmente con l'idea di questo genere siamo usciti assemblare intorno un problema
Almeno due dei gruppi migliori al mondo che poté che pur mi poteva venire in mente per risolvere quel problema
Uno che facesse la sequenza più veloce di tutti tra sapesse interpretare che avesse gli algoritmi l'altro che conoscesse tutta la generica tutti i segreti tutta l'epidemiologia di questo batterio invece c'abbiamo messo la nostra professionalità quella di sviluppo di vaccini
E abbiamo dato un nome a questo a questo nuovo modo di fare i vaccini abbiamo chiamato reverse Bart Vaxi nodo di un po'signor stando
Ovviamente la reverse Genetics ma
Soprattutto per dire che stavamo facendo qualcosa di diverso gli ho fatto vedere prima l'approccio tradizionale si cresce microrganismo sì purifica no cosa si fa il laboratorio qui microrganismo non si vede più
Si piglia la sequenza questa nel computer
E dai computer si comincia a fare predizioni dal per vedere quali sono le le proteine che potrebbero essere interessanti come bacino dalle predizioni si va in laboratorio si esprime in Escherichia coli o un altro organismo in l'organismo patogeno nessuno lo vede finché non si va lo sviluppo veramente un percorso a ritroso per cercare di arrivare allo stesso al all'oste allo stesso gol
Brevissimamente cosa abbiamo fatto abbiamo tramite computer
Abbiamo idee e identificato seicento proteine che potevano essere potenzialmente buoni candidati per fare un bacino le abbiamo espresse trecentocinquanta le altre non ci sono riuscito non ci abbiamo pensato
Trecentoquarantaquattro abbiamo purificate abbiamo indirizzato dove trecentocinquantadue cinque gruppi di topi abbiamo provato attestato questi sieri
In diciotto mesi abbiamo tenuto molto più informazione che tutta la comunità scientifica che ha lavorato su questo settore dei negli anni quarant'anni precedenti
Abbiamo trovato novantuno nuove proteine che stanno sulla superficie del batterio nuove mai viste prima
E
Tanto per darvi un'idea dell'impatto di quel di questo numero
Le la comunità scientifica per lavorato in questo settore in tutto il mondo negli ultimi quarant'anni ha trovato circa dodici quindici proteine Trieste che stanno sulla superficie non abbiamo trovate novantuno
E ventotto di queste erano ottimi candidati per fare un vaccino
è la storia
Più o meno sì si conclude qua corte con un solo un esempio non dovete capire come funziona queste sono i tentativi questo qui e questo di sotto
In passato di avere i vaccini di fare un vaccino come vedete riuscivano a fare un vaccino contro questo ceppo contro questo ceppo ma non contro quest'altri
Al altri riusciva pare vaccini contro alcune scelte ma non contro questi le proteine che noi abbiamo trovato hanno riescono a funzionare contro tutti
Diciotto mesi abbiamo trovato ventotto proteine nuove
è stato un
Il fattore norme sembra siamo abbiamo cominciato a lavorarli dopodiché abbiamo passato ben due anni a ridurre quelle ventotto proteine alle tre o quattro che diventeranno
Su un farmaco la genomica ASL a ridotto tantissimo il tempo per scoprire nuovo fattore non ha nessun impatto in quello che è la parte di sviluppo la parte sviluppo è ancora lunga ancora costosa
Da quando l'abbiamo pubblicato su Science è venuto fuori un sacco di di commenti su molti i giornali quello che mi piace citare di più è quello sul wall street journal e di Claire fresa la moglie di Carpenter che adesso direttore del Tiger a proprio e chiede che disse vinse svuota ecco l'uomo al suo tempo Kobe Dowie gente guide jeans sicurezza information e se voi andate da Craig Venter oggi o sua moglie per Faenza richiedete qual è fra tutti i progetti che ha fatto il Progetto dove si è divertito di più
Mi dice che il meningococco B è quello in cui non lo dice a me lo dice ai giornali nel corso del e è quello in cui si è divertito di più perché è stato l'unione della tecnologia alla risoluzione di un problema e le piace proprio questo qua
è un approccio unico no quello che abbiamo fatto può essere applicato a Tatti tanti problemi irrisolti solo per parla delle malattie infettive malaria tubercolosi
Pneumococco stretto poco il gruppo a Lupo vi stafilococco
E così via quelli ci sono tantissimi altri patologie che si possono affrontare con la barca reverse dazi nordici
Una considerazione anche per i virus
Rilievo sulla genomica non è un non è una novità il genoma dei virus la conosciamo dagli inizi degli anni ottanta purtroppo
Nonostante che tutti abbiamo conosciute cui la geometria diedero sfida vinse l'anno ottanta l'approccio allo sviluppo di vaccini contro i virus è stato molto conservativo molto tradizionale cioè i vaccini convenzionali come sono fatti sono fatti bonificando le proteine dell'involucro
Che sono le proteine Enzo di solito con le hanno Emma Brutti mine e le proteine del capside e non si è mai pensata usare le proteine aeroclub per far per fare vaccini perché l'approccio tradizionale non permetteva di qualificarmi quindi nel fare i vaccini contro il virus dove ci metto anche dell'HIV anche la precipue eccetera abbiamo nonostante che avessimo la il genoma quindi avessimo l'informazione per un nostro preconcetto conservativo abbiamo perso venti anni
Perché non l'abbiamo neppure provato per venti anni a usare quelle proteine proteine dirle che nel caso del ed uso Nola empire la TAC la rap queste proteine qua
Che erano lì avevamo l'informazione ma per nostro preconcetto non abbiamo usato
Applicando il concetto che ho descritto per dire Barcelos yen verso non si scarta più niente sino a provare tutto comprese le proteine delle e i primi approcci a HIV con questo nuovo concetto fanno vedere che le proteine e lì sono molto e interessanti perché inducono ante inducono molti un'attività cito tossica molto importante e qui in Italia abbiamo la Barbara Ensoli all'Istituto superiore di sanità che è una più tra i pionieri di questo e quindi dare verso la sino all'ICI sta applicando
Non materialmente perché l'informazione l'avevamo già ma come concetto anche ai virus li cui il genoma era conosciuto da tempo
Se o
Un minuto volevo far vedere un'altra cosa che ancora tecnicamente molto interessante e che
Essenzialmente l'approccio quello che la genomica tipo permettere di fare parlò di macro presto ma essenzialmente quello che finora abbiamo fatto abbiamo studiato i microrganismi e le cellule eucariotiche
Separati uno piglia il microrganismo Battery ore e Cervélo cresce una piastra di Petri o in una bevuta
Pensando che quello sia il loro terreno lo studiamo come se quello fosse il modo in cui si trova in natura no quello il modo artificiale in cui lo stiamo coltivando il laboratorio probabilmente al molto poco a che vedere con quello che è la vita reale di questo patogeno quando incontra
Jorge l'organismo
E
Quello che si può fare oggi Angel pendere il batterio tiro su parassita mettono in contatto con la cellula ospite e andare a studiare l'interazione
Intima di questi due capire come cosa fa il batterio quando interagisce con l'ospite
Si usa ormai pioveva di tutto il due mila geni del del batterio su un vetrino se si fanno le utilizzazioni si va a vedere si trovano che duecento geni e durante l'interazione duecento geni
Vengono attivati centocinquanta vengono inattivati bellissimo difficilissimo da ottenere tutta questa informazione in un database cercare di capire l'alla fine cosa vuol dire
Vuol dire per esempio che con questo metodo siamo riusciti a capire
Qui è troppo lungo per andarci dentro ma a a trovare delle proteine che nessun'altro avrebbe mai potuto trovare perché sono proteine che vengono espresse dal batterio solo quando interagisce con l'ospite
E che con tutti i metodi tradizionali usate finora non avremmo mai trovato era stato semplice basta incubato il batterio con la cellula ospite fare una preparare Rna
Il mercato dal batterio da solo dal batterio che interagisce la cellula ospite e si scoprono una serie di cose nuove utili perché sono quelle cose che vengono espresse solo durante l'interazione con l'ospite quindi sono quelle rilevanti per la malattia per le per la cura per la diagnostica o quello che volete e questo diventato alla portata di tutti è una cosa che la genomica c'ha messo a disposizione
Grazie
Che lo sloveno che
Una bellissima è una bellissima applicazione del genoma Biko Curatolo grazie
Siccome il dottor leoni non ha molto tempo disposizione perché è una teleconferenza fra non molto perché lei il sporco lotta non a breve medica per i deve dire
Buongiorno a tutti immagino si attende anche abbastanza stanche perché avete ricevuto molte informazioni quindi cercherò di essere veramente sintetico
Chiaro confessano che quando sono stato invitato a partecipare a questa tavola rotonda su SAP
Poi il potere può quanto è importante nuovi farmaci potrebbe essere che anche
Voi che siete qui presenti dopo la vostra laurea possiate essere interessati non più a studiare
L'abitudine di base ma a studiare a capire come inventarsi nuovi farmaci e avete sentito tra l'altro mi sente veramente straordinaria
Non di farmaci di porcini ma concettualmente eccellente
Questo fare la prossima
La comandare lei
Grazie
Questo e il il paradigma correntemente utilizzato per scoprire nuovi farmaci Cioli dello schema concettuale
Che viene utilizzato dalla grandissima maggioranza delle aziende farmaceutiche al centro di questo schema che target bestia c'è l'identificazione di un target molecolare
Successivamente in base al target viene generato un testi screening immagine bocciati familiari con questo si fa uno scrigno biochimico in genere per esempio se avete identificato con nove target una china sì
Un attimo si inchinarsi l'avete clonate l'avete anche magari brevettata dopo mettete in piedi un testi screening che vuol dire che potete testare l'attività di questa chinarsi
Dell'ordine di decine di migliaia di compostaggio
A questo punto usato una libreria chimica pena per cercare un leader che funzioni su quel target a quel punto il processo va avanti ottimizzate questo leader migliorandone farmacocinetica tossicologia abbia disponibilità tutto quello che è necessario fare per scoprire un farmaco e infine ha detto un track cantilenante
Va da sé che protoni che genomica si inseriscono in questo schema concettuale
Perché protoni che genomica innanzitutto anche se non esclusivamente qui semplifico spero che chi sa tutto su questo mi perdoni però genomica e proteomica hanno prima primariamente lo scopo di modificare di migliorare quello che viene percepito come il collo di bottiglia di questo processo che la targa che il target a identificare show
Quindi la proteomica genomica servono a
Migliorare questo stent qui
Servono a identificare i nuovi target possibilmente proprietari
Per quella determinata patologia
Qui ci sarebbe molto da dire davo per scontato che anche preso scortese che purtroppo non c'è
Avrebbe parlato di questo però va da sé che la proteomica che come sapete lo studio il patrimonio proteico di una cella serve ad indicare i nuovi target
Questo approccio però ed è questo il messaggio che vorrei mandare ed è in questo approccio che si inseriscono proteomica genomica ha dei limiti
E vorrei spiegare credo per amore di completezza quali sono questi limiti almeno secondo secondo me secondo noi anche perché Mario prospetti una tavola rotonda quella fine sia quella di aprire una discussione se posso nella prossima
Quali sono i punti di debolezza di questo approccio concettuale basate che su quell'approccio concettuale stavo lavorando tutte le grandi aziende farmaceutiche Sutil multinazionali investendo come Dotti dottor leoni una montagne di soldi
Quali sono i le le debolezze bene anzitutto il il il la la proteomica a un problema di bassa sensibilità per molecole sottorappresentati all'interno della cellula
E vale la pena di ricordare che molte proteine ad attività regolatoria
Sono sicuramente rappresentati
A livelli quantitativi che sono al di sotto del limite di sensibilità della proteomica almeno come la proteomica strutturata adesso quindi si perdono alcuni potenziali target non è vero che la proteomica può rivelare qualsiasi target
E poi perde le molecole poco solubili in mezzi acquosi perché la proteomica per sua dinamica chiede di sciogliere tra virgolette le proteine per farle correre su un gioiello bidimensionale in un mezzo acquoso
Tutte le proteine che sono poco solubili in acqua vengono perse con la proteomica
E in questa categoria rientrano molte molecole che potrebbero essere molto interessata al CoDiSA farmacologiche rientro molte molecole che sono espresse nella membrana cellulare
La pena di ricordare che anche se si dice generalmente che il collo di bottiglia e trovare nuovi target questo in parte falso
Perché in realtà non basta trovare dei nuovi target
Di nuovi targhe ce ne sono talmente tanti in letteratura che potreste lavorare per i prossimi cinquant'anni
Il punto non è trovare i nuovi target il punto è trovare i target che siano rilevanti
Per quella patologia e siano specifici e questi in prima approssimazione la proteomica e non è detto che ve lo dica
Per rilevante intendo dire che un target non basta che sia rappresentato in una malattia ma deve anche essere importante per la fisiopatologia di quella malattia
E ci sono tanti esempi su questo che si potrebbero fare
La la la ciclossigenasi che come sapete è un enzima importanti perché inibito da tanti farmaci presenti sul mercato è sicuramente un target rilevante per l'infiammazione tante che inibendo la ciclossigenasi bovini dite l'infiammazione
Ma ci sono tante molecole coinvolte nell'infiammazione inibendo le quali voi non inibire tema d'infiammazione non sono rilevanti per l'infiammazione sono semplicemente con espressi nell'infiammazione
Non è detto che anche avendo un target voi trovate un inibitore
Ci sono migliaia di target eccellenti contro i quali nessuno ha mai trovato inibitori
Perché perché non è vero che avendo un target proferito inibitore e la primo motivo per questo e che per quanto le grandi aziende Annino con cremare che hanno lagunari di milioni di composti
Spesso si è poi andato a vedere la struttura di questi composti voi vedete che non saranno mai dei farmaci
Hanno delle strutture cosiddette che non sono tratte laica per esempio sono dei detergenti
E voi immaginate un farmaco comproprietà detergenti evidentemente no
Quindi sono delle degli assi delle delle assunzioni che vengono fatti in quello schema concettuale che siccome vanno viste nel giusto nella giusta maniera
Non sono così stravagante da da dire che lo schema non va più bene perché tali Dio voglio solamente dire che va fatto per carità però bisogna tenerne a mente i limiti
E infine uno screening di natura biochimico che fa parte necessariamente di quello schema mentale come vi ho detto prima
Non è necessariamente rappresentativo di quello che succede in una cellula voi in un test biochimico potete benissimo di trovare un inibitore di noti così inchinarsi per esempio ma poi con l'inibitore o anche il suo derivato ottimizzato Petra in più non potrebbe mai entrare in una cellula in tal caso il posto inibitore nella vita reale non funzionerà funziona sul testi biochimico ma non sulla cellula se posso nella successiva
Quindi schematizzando il messaggio che voglio dare che il Drug Discovery e una attività affascinante e complessa lunga e costosa ma che si può condurre con schemi concettuali DiVersi
Uno è quello che viene detto il drug discovery targa dentista però dopo c'è anche ci sono anche contro modelli concettuali Diversi che si tende a dimenticare perché il paradigma predominante è quello che vi ho detto che prima
E gli altri due paradigmi schematicamente penso che ci posso definire fisiopatologiche sta e un ruolo se il black list
Voglio presentare due esempi rapidissimi se posso di questi due diversi approcci concettuali altra Discovery per quanto riguarda i fisiopatologiche esito un farmaco che sul mercato da pochissimo
E chi ha utilizzato questo tipo di approccio concettuale per arrivare a identificare un farmaco e poi per quanto riguarda il buon se invece voglio presentare un esempio di come invece l'abbiamo approcciato noi in Dompé cioè come siamo giunti a una nuova categoria di potenziali farmaci perché non siamo ancora arrivati alla fine autorizzandolo questo tipo di
Framework concettuale la prossima
Ecco in questo concetto nel nel fisiopatologico Beiste tra Discovery il centro del problema non è il target pure trovare i nuovi target obiettivo primario non è trovare i nuovi target
Si parte della fisiopatologia della malattia
E della fisiopatologia che dice qual è il target
E su questo cui si fanno gli screening eccetera eccetera
Quindi la proteomica in questo contesto primariamente non gioca un ruolo fondamentale perché voi partite da come funziona la malattia
E in base a come funziona la malattia può identificato il target
L'esempio che può riportarli se posso della prossima e quella dello scimmione ironico cronica
La Cigna amiloide cronica e noto da decenni che ha un col Mark genetico
Notissimo ai e cito genetisti ha tantissimo tempo che il cromosoma Philadelphia
Questo è noto da da decenni il colosso da Filadelfia una traslocazione tratto non sono nuove il colosso ventidue quindi grosso a Filadelfia altro non è che una versione accorciata per colpa di questa traslocazione reciproca
Dal cromosoma ventidue
E si sa dal dal parecchi anni che questa traslocazione genera una nuova proteine
Che non è presente in nessun'altra cellula se non nelle cellule del della della leucemia mieloide cronica
Questa proteina la proteina chi Mary che a detta DCR abile semplicemente perché la traslocazione tra cromosoma diciannove il quale il nove scusate il ventidue ha creato una nuova sequenza genica
Nella quale un pezzo del gene BCR si trova fuso con un pezzo del Gene
Abile
Ah bel e nati lo si inchina sì
Quindi è stata creata una nuova molecola
Che non esiste in nessun'altra cellula e che Pato genetica
E torno a quel concetto di rilevanza che ho detto prima qui voi potete tranquillamente incominciare un'attività ritardi scoprì
Su BCR abita perché sapete uno che il target DCR apra e patto genetico cioè inibendo viceré abile sicuramente uccidete le cellule tumorali
Due e specifico perché viceré abile Espresso solamente nelle cellule tumorali
Qualcuno di voi dirà che questo sente troppo belle de unico non è affatto vero perché ci sono decine di targhette che possono essere identificati scoperti in questa maniera e che possono essere utili per un processo Itaca Discovery
Un altro esempio se posso farlo se non ci credete che ci sono tanti esempi sono l'immunodeficienza congenita
L'ex linked Sibir con banche immunodeficienza sì che a diverse forme e dovuta APPA motivi diversi ma tra i quali ricordo di mutazioni che la gamma cent'della andrà certo entro fine due e se volete fare dei nuovi muro soppressivi ed un target ideale e specifico dettato Cinetico
E un altro esempio è la più intimi assenza settanta
E ce ne sono ancora tanti altri
Sì forse nella prossima
In questo approccio è la fisiopatologia che detta il target
Vi sono degli esempi di successo
E c'ha un vantaggio secondo me unico ed è quello che la rilevanza e la specificità del targhette e implicita nel processo
Mentre il target Besta approccio voi dopo aver scoperto il target dovete fare un altro passo importantissimo dovete dimostrare che rilevante per quella patologia
La prossima
Poi invece abbiamo un sale Beiste screening
E qui la la faccio semplice perché noi no ok Pisco che c'è c'è un po'di fretta però voglio solamente dire che qui il centro del problema non è il targhetta
Non è per certi versi neanche la fisiopatologia ma il centro del Polo e della cellula ci si parte dal concetto che se voi trovate qualcosa che funziona sulla cellula
Avete fatto un bel passo in avanti
E da lì poi potete partire per ottimizzare il vostro inibitore sempre utilizzando una libreria piumino selezionata
Ma soprattutto potete fare una cosa molto interessante potete fare
Mediante dal Codice concettuale uno stretto Back voi potete risalire dal meccanismo d'azione cellulare al meccanismo biochimico e poi al target molecolari
Voi capite dal punto di vista concettuale qui il target è alla fine
Non è all'inizio
Quindi mentre questo approccio parte dalla efficacia per finire al target
Tra l'altro approccio quello che ha detto prima il target dei spartito al target e poi bisogna dimostrare l'efficacia se posso della prossima l'abbiamo utilizzato questo approccio per trovare una nuova classe di inibitori potenti selettivi di una citochine infiammatorie che si chiami trio chinotto
Non so quanti di voi sono familiari col mondo delle citochine delle chemochine voglio solamente quindi menzionare che intero china Ottorino citochine infiammatorie o meglio una chemochine
Cioè è una molecola che coinvolta nel reclutamento nell'attivazione del polimorfonucleati e come potete immaginare i polimorfonucleati sono cellule che intervengono dell'infiammazione
Ne abbiamo utilizzato un approccio diverso nel quale abbiamo congiunto realtà alcuni degli delle delle di flebo concettuali che vi ho detto prima
E siam partiti da considerazioni fisiopatologiche per giungere a conclusione che intendo chinotto e un target interessante
Però non abbiamo allestito un teste biochimico di inibizione dentro fino a otto abbiamo deciso di allestire un teste cellulare di inibizione in trio chinotto esattamente per quelle considerazioni che ho detto prima
Per cui abbiamo allestito un teste
Adeguato per Screen aree una librerie chimica semplificata e selezionata
Nel quale cercavamo quindi inibitori interrotti da otto testando questi composti sulla che mio taxi in vitro di polimorfonucleati umani
Che tassi indotto dentro chinotto
Nel fare questa scelta abbiamo anche fatto un altro passo in avanti secondo me non abbiamo utilizzato una linea cellulare
Abbiamo utilizzato la cellula che dopo nella vita reale noi veramente vorremmo inibire della sua attivazione cioè polimorfonucleati umani
E per fare questo noi quando facciamo gli esperimenti selezioniamo giorno separiamo
Giorno per giorno il polimorfonucleati da donatori normali questo richiede un po'di lavoro in più ma riteniamo e forse anche un po'più lentezza del processo manteniamo che alla fine le informazioni che avremo saranno più rilevanti
Abbiamo quindi identificato e degli compound
E abbiamo
Migliorato questi lidi compound mediante un approccio di di medicina Chemistry di chimica
E soprattutto se se se ho il tempo vorrei dimostrare come dalla inibizione di una cellula siamo risaliti al meccanismo biochimico d'azione di questi inibitori e come ci stiamo avvicinando al meccanismo molecolare d'azione
Se fosse il prossimo
Dicevo che son partite la fisiopatologia sì la fisiopatologia diceva che entro che inoltre una molecola molto importante in una situazione fisiopatologica rilevanti occultista medico per tanti motivi
La fisiopatologia ci insegnava che introiti noto importante nel danno territori fusione posti ischemica
E qui purtroppo non ho il tempo di raccontare dal punto di vista medico bene che cosa vuol dire danno da ripercussione posti ischemica di basti dire che il danno di perfusione pose schemi che il danno che si verifica in un tessuto ischemico quando viene reintrodotto il flusso sanguigno
Sappiate che in queste condizioni si ha un'infiammazione acuta di quell'organo di quel tessuto
Vengo richiamati polimorfonucleati perché viene indotto intero chinotto e polimorfonucleati che infiltrano il tessuto ischemico e profuso danneggiano il tessuto questo cuntista medico un'associazione che si verifica nell'infarto del miocardio
Arriva scolarizzato si verificande lo stronca si verifica nel danno dall'organo trapiantato
E qui ci sarebbe tanto da dire appunti sa medico però sappiate che è un problema importante
Si chiama di GF di legge classe faccio
La prossima
La storia
E arrivato a identificare un Lied compound come vi ho detto che inibisce Lacchin e tassi dei polimorfonucleati nell'ordine del nano molare come vedete quindi la molecola molto potente l'abbiamo chiamata di F sedici ottantuno la prossima
Dimostra anche che molto specifica perché non inibisce altri fattori che ne tattici cotolette non inibisce il cinque non inibisce Leffe metti la prossima
Non inibisce NC più uno che un'altra citochine time tattica non per i morti polimorfonucleati primariamente una prima usciti quindi un inibitore potente selettivo se posso nella prossima
Questo processo al TAR andiamo avanti
Ecco tra
Ci si è chiesti come funziona questa molecola
Per prima cosa abbia dimostrato che non è un inibitore recettoriale di intero chinotto cioè non è un antagonista scusate recettoriale di intero chinotto
Non non è una molecola che inibisce il buy indica di intero chinotto suo recettore non è un classico antagonista recettoriale come altre aziende sta facendo Glaxo a degli degli antagonisti recettoriali di intero chinotto
Anche se per ora sono uscite trovare sulla mente inibitori perché certo di tipo due e non precettori tipo uno come invece noi siamo riusciti a fare allora ci siam detti probabilmente questo inibisce la trasduzione del segnale del recettore intro chinotto
E in effetti questo il caso abbiamo studiato la la l'attivazione delle tifosi inchinarsi all'interno dei polimorfonucleati l'abbiamo dimostrato che questa banda di centosedici filo Dalton che viene fosforilata dopo attivazione con i trucchi da otto
La sua relazione di questa banda Dini vita dal nostro composto
Un'altra evidenza che il nostro composto a che fare con la trasduzione del segnale non con il buy indica recettoriale viene dalla successiva da quale dimostriamo che anche i flussi di calcio all'interno della cellula che sono indotti dentro chinotto sono inibiti dal nostro composto
Io adesso abbiamo un'idea abbastanza chiara del meccanismo d'azione di questo composto che non rimosso quindi taglio per motivi di tempo ma abbiamo dimostrato e sono in corso
In corso elaborazioni lavoro su questo che questa molecola inibisce l'attivazione della G proteine che associata recettore intro chinotto
Come sapete c'è trentotto inoltre un sarà entra spendere indomito essa torna che ha una jeep proteine appiccicata alla lato Inter citoplasmatico recettore ne abbia potuto dimostrare che l'attivazione della G proteine inibita da questa composto abbiamo inoltre potuto dimostrare abbiamo in corso di studi dimora color Modeling perché abbiamo identificato la tasca
Del target molecolare che abbiamo identificato nel quale nostra molecola può penetrare
E mediante questi studi abbiamo identificato il farmaco Foro e le interazioni molecolari che ci sono tra il farmaco Foro e la tasca proteica nella quale la molecola si inserisce
La prossima
Funzionerà in vivo
Nell'animale si nell'uomo non lo sappiamo evidentemente contiamo di incominciare gli studi clinici nella di lei dirà Function entro il secondo trimestre del prossimo anno
Nell'animale funziona perché infatti questo esperimento di trapianto di rene nel nel dal fatto e per meccanismi che vi ho detto prima io nelle trapiantato viene infiltrato da polimorfonucleati in maniera molto massiccia
Questa e l'inibizione dell'infiltrato i polimorfonucleati che abbiamo ottenuto con nostro composto come vedete l'infiltrato intra come durare inibito al cinquanta più il cinquanta per cento mentre l'infiltrato interstiziale e inibito a più del novanta per cento
Quindi il meccanismo il diciamo il meccanismo d'azione e confermato in vivo
Questa molecola inibisce il reclutamento dei polimorfonucleati in una situazione fisiologica nella quale si sa che entro chinotto e mediatore principale del reclutamento di polimorfonucleati
Se posso della prossima non solo inibisce l'infiltrato il polimorfonucleati ma preserva la funzione dell'organo che evidentemente poi punti seppi che quello che ci interessa maggiormente
Questa è la creatinina nel fatto che come potete immaginare e innalzata quando il rene viene danneggiato infatti nell'animale trapiantato in un trattato con alcun farmaco voi avete una cretina molto alta nel ratto
Il valore di creatinina viene riportata praticamente a livelli normali trattando
Nominale con il nostro composto
Noi per questa indicazione dell'agenda Function abbiamo ottenuto dalla Comunità europea del riconoscimento di una fan tra anche nel luglio di quest'anno
Questo evidentemente ci faciliterà pensiamo anche lo sviluppo clinico di questo composto se posso avere l'altra
Quali sono i problemi del sale degli strani screening beh ce ne sono anche qui evidentemente anche se non abbiamo avuto forse un po'di fortuna ma per ora abbiamo avuto successo evidentemente e limitata a librerie chimiche piccole perché sulle cellule si possono scatenare molti composti anche separate di sottolineare che questo e sempre meno vero
Adesso di una società in California bio quante che fa ai frutti screening sale dei strada sulle citochine che ne ha tanti
Quindi non è affatto vero che io in diventerà sempre meno vero voglio dire che il sale dei stesse non si presta all'altro putsch tecnica
Frida un tuo operetta a volte può essere ristretto perché
La libertà di operare a volte può essere limitata nel presente centro chinotto non abbiamo problemi perché entro chinotto come target non è coperto da perdenti però con questo tipo di approccio potreste avere questo tipo di problema
Il contesto c'è un'aria implicito nel processo questo è un vantaggio secondo me perché come detto prima invece il test di chimico a volte di dati falsi positivi
E incorpora quella che si chiama Brusca i Science no la la la compiaciuta Chemistry
L'analisi sofisticate delle proteine tutte queste cose le fa questo tipo di approccio ma le fa in un in un in una fase tardiva del processo quando il targhetta e in corso di edificazione grazie
Grazie dottor collottola disse interessante relazione non si può dire che in Italia non ci siam degli ottimi ricercatori non solo non esita ma anche nelle nelle aziende insomma la ringrazio molto vorrei siccome il tempo di a disposizione non è molto porre aprire la discussione per domanda rivolte alla per primo al Colleoni che poi deve lasciare convegno perché a una teleconferenze se qualche domanda da fare del Rivolta per specificatamente otto leoni
Prego
Pressorio al microfono
Grazie onorevole quanti dopo sì prego okay Giuseppe Del Giudice lavoro alla Cai non di Siena ci potrebbe dare un'idea di quante start-up nascono in Italia o son nati in Italia negli ultimi negli ultimi anni
Di nuove molecole
No dunque non ho capito attestata ci guardiamo alla voce storto
Le Società di bio tecnologie esistenti in Italia sono una quarantina di cui quattro sono di buona dimensione e le altre sono piccole
Amma a memoria mi ricordo
Tre start-up da società che ci sono fuse
Dia l'avvio io lo Novuspharma la la la la seggi poi ci sono un paio di start-up
A Catania
Uno della Berna è un'altra non me la ricordo come nome
Se ne stanno
Ce n'è un almeno un paio o tre
Al parco di dalla Bicocca e ce ne sono due a a a Siena quale che mi ricordo adesso quindi saranno nell'ultimo anno anno e mezzo una decina quelle che conosco io ma credo che siano molto di più
Prego si sente sono califfato sono sposati alcuni sono addirittura GE dell'Anpi italiana varie domande visto che lei ha sottolineato l'importanza mentre l'azione università accademie industria in questa ottica come valuta lei personalmente ora la sua industria
Il nuova trattativa estivo sul proprietà
Ma trovare universitari
Non conosco nel dettaglio la situazione credo che
Il riconoscendo e credo che ci sia un inconveniente che è quello della come dire della non chiarezza di chi alla alla alla di chi avrà la la la facoltà o meglio il diritto di sfruttamento industriale del del ritrovamento
Io sono assolutamente d'accordo che sia riconosciuto la paternità di una di un di un brevetto di una innovazione a chi alla persona che lo ha che lo ha trovato e che lo ha inventato dall'altro lato però bisogna anche riconoscere che le persone
A meno che ci siano dei ricercatori individuali ma che fanno parte di un'organizzazione aziendale
Riescono ad arrivare a certi successi anche perché c'è un'organizzazione alle spalle perché hanno avuto la formazione di norma
Da parte della società che gli ha che li ha portati
A livelli elevati anche di training e quindi di di di di di conoscenza di know how personale e quindi mi pare mi parrebbe opportuno garantire lo sfruttamento industriale
Della della della lo sfruttamento industriale del rito il bel dall'innovazione
Mi e così è nella nella nel privato mi sembra che il problema che ho detto prima almeno da quanto io ho potuto capire e più che altro un problema a livello universitario
So anche che il ministro ha intenzione di di di riprenderlo in mano per per gestirlo meglio
Qualche altra domanda
Al dottor Leonetti
Se così lo possiamo anche lì
Forse Oria prego aggiungo prego prego vi chiederei la pazienza ancora per un paio di giorni di di giorni un paio di minuti Raffaele minuti scusate no perché volevo
Riferirmi a a quello che ha presentato il l'amico ora fuori riguardo e e cercare di
Perché
In Italia è difficile far riconoscere la validità del farmaco in tutte le sue composizioni di carattere terapeutico ma anche di contenuto scientifico e di innovazione
Cioè a me pare che quello che ha presentato Rino là fuori è il mite assolutamente indicativo
Del beneficio che ne può dei verde che può derivare alla salute umana dai ritrovati di quel genere abbiamo visto qual le curve sono assolutamente eclatanti cioè da da una da uno sviluppo quasi esponenziale ad una curva piatta ecco questo è una cosa che purtroppo qualche volta non viene recepita in modo come dire in modo completo e compiuto non solo dalla dalla dal dal popolo diciamo dalla dalla dalla dal dalla gente comune dal dall'uomo della strada
Ma quello che è più allarmante che questa recepimento manca a livello di policy maker
Cioè dei politici che devono prendere delle decisioni
Cioè
Non si può pretendere di essere alla frontiera della conoscenza e alla frontiera della capacità competitiva se non si creano le condizioni
Adeguate non sto dicendo che cercando di buttare tutto sempre la palla o la patata bollente sulla mano di qualcun altro
Ma la presenza di una politica di decisione che non siano solo di carattere economicistico cioè riduzione costi e basta
E e di base cioè voglio dire noi
Siamo ancora oggi davanti a una incapacità di accettare la direttiva europea dei brevetti allora questo è una è una cosa estremamente grave perché
La competizione
è una cosa seria cioè se io fossi un investitore di multinazionale
Vado a investire l'auto in mia è chiaro e sicuro
Che quando trovo un brevetto Eolo proprietà inglesi intellettuale la mia proprietà e è protetta da una norma da una normativa che dice tu sei stato bravo ha investito la poi sfruttare per i quindici anni dal momento in cui ha investito il coso
Noi stiamo dibattendo io non vorrei tediarvi ma faccio una breve digressione vi leggo una cosa che mi ero portato qui come De Castro
Nel mille ottocentocinquantasette cinquantacinque la Repubblica dice Cisalpina aveva aveva negato il brevetto dicendo questo il brevetto avrebbe consentito forti speculazioni
Rallentato la ricerca e favorito i tra i cialtroni
O i ciarlatani
Dopodiché dalla dalla Repubblica Cisalpina questo concetto si è allargato in tutt'Italia
E noi abbiamo avuto la legge La recepimento della dal cioè l'introduzione del brevetto nel fare nella nel nel sul sui farmaci nel mille e novecentonovantotto settantotto che poi ha iniziato a valere dal mille novecentottantuno
Ecco nel mille no ottocentocinquantanove un certo signore Abramo Lincoln diceva il sistema brevettuale assicurato all'inventore l'uso esclusivo delle sue invenzioni per un periodo limitato di tempo
Alimentando con ciò il fuoco del genio della ricerca e della produzione di nuove e duttili cose chi avesse ragione lo dice lo dice la storia dove ci sono dove dove stanno i grandi poli di ricerca farmaceutica e le grandi competitività nel mondo anglosassone laddove è stato per cioè voglio dire
Quando si prendono delle decisioni di carattere economico con le di carattere politico bisognerebbe a vere
La visione di non guardare solo il costume da fashion o il contenimento dei costi nominerebbe anche tener conto dei contenuti e delle conseguenze a livello scientifico
A livello industriale e a livello economico sociale delle decisioni che si prendono
Io purtroppo devo denunciare che le ultime decisioni del tre quattro sette vanno in un in un in un senso opposto cioè è stato una decisione basato solo sulla quadratura dei conti
E quindi io credo che Lalla Lalla sostegni involucro Hooft cioè la crescita
Sostenibile che abbiamo vissuto negli ultimi quattro anni nel settore industriale farmaceutico e che ha fatto sì che i parametri di sviluppo industriale fossero due volte e mezza mediamente rispetta se confrontati alla media dell'industria verranno un po'meno nei prossimi anni a meno che ci siano delle correzioni
Noi in quattro anni abbiamo aumentato di quasi il dieci per cento la popolazione i nostri impiegati di cui dico il settantadue per cento sono laureati
La ricerca è cresciuta in doppia cifra per quattro anni di fila gli investimenti industriali son cresciuti in doppia cifra per tre anni
L'esportazione l'anno scorso il due mila per il primo anno abbiamo avuto una bilancia commerciale del farmaco attiva per quasi mille miliardi del farmaco intendendo anche i principi attivi si è la specialità di due mila centocinquanta miliardi dopo trent'anni nei primi quattro mesi del due mila uno le esportazioni sono cresciute del trentasette e mezzo per cento le importazioni del venticinque c'è il trend viene confermato avremo un surplus commerciale tra i tre mila i tre mila cinquecento miliardi
Ma questo la la
Se facciamo il valore apprezzo di fabbrica dei prodotti dal prodotti farmaceutici escono dagli stabilimenti Seat siti in Italia
Noi esportiamo un controvalore di quattordici mila e settecento miliardi e ne e ne mettiamo sul mercato per un controvalore di quattordici mila e cento cioè il sistema industriale farmaceutico è per il cinque oltre il cinquanta per cento
Orientato all'esportazione questo vuol dire che abbiamo attratto investimenti
Che siamo competitivi a livello internazionale
Che le multinazionali hanno creduto nel sistema italiano perché c'era un quadro di riferimento preciso io spero che la frusta usata come diceva
Non mi ricordo più inferocito subito
Il il il Platone vitalizi Platone diceva la Repubblica deve anteporre e privilegiare l'uso del ferro e del fuoco a quello dei farmaci però era il quattrocento avanti Cristo io spero che adesso qualcuno abbia un concetto più valido del farmaco grazie
Grazie dottor leone anche per quest'ultimo intervento a prego
Vedi la domanda la fa il dottor Leonetti
Sì
Siamo al problema dei brevetti nel senso che visto che il è stata la persona che ha direttamente tirato fuori il problema la domanda è rivolta a lui e più che una domanda di Hera è un po'un commento nel senso che io mi occupo di consulenza nel campo della proprietà intellettuale meno messi via Merlini e in particolare di brevetti biotecnologici quindi mi sento tirata un po'in ballo nel fornire alcune così alcuni chiarimenti anche rispetto a questo innanzitutto vorrei dare il nostro giudizio c'è il giudizio di chi lavora nel settore dei brevetti relativamente al decreto Tremonti
Quello che quindi conferisce la proprietà dell'invenzione all'inventore allora ricordiamoci che la proprietà dell'invenzione cioè il diritto morale
Di un'invenzione sempre dell'inventore però questo è un diritto morale quindi non porta nessuna bene fitta l'inventore
La legge Tremonti ha stabilito che contrariamente a quanto previsto nei casi di dipendenti di aziende pubbliche che finanziano la ricerca la titolarità dell'invenzione non è più di chi finanzia la ricerca quindi dell'azienda in questo caso l'azienda pubblica mai dell'inventore questo ha creato un un grosso problema una sicuramente è un problema che ha prosegue va nel senso contrario ha risposto lo torrone questo domando filosofo no volevo sì sì no volevo semplicemente dire qual era la diciamo l'idea di chi lavora nel settore dei brevetti anche per eventualmente così riagganciarmi alla domanda che era stata fatta precedentemente
Quindi si tratterà poi per le università in questo diciamo ore io rispondo alla persona che ha fatto la domanda prima si tratterà per le università eventualmente di trovare dei sistemi di cessione dalle delle della proprietà dell'invenzione
Dalla dall'inventore all'università credo che accordi di licenza e dice Silone siano occorre che possono esser fatti e che anzi vadano studiati comporteranno qualche lavoro in più per le università
E e basta e poi semplicemente dire che con la direttiva europea che passerà con la finanziaria del due mila e due comunque verrà garantito un così una un panorama uguale per l'Italia per l'Europa anche se ricordiamoci brevetti nelle biotecnologie in Italia vengono concessi perché derivano dal brevetto europeo
E quindi la convenzione sul brevetto europeo di Monaco ci garantisce di poter avviare di poter comunque azionare un provetto anche in Italia tramite Brevetto Europeo
Quindi ci permette un panno un panorama più adeguato alla panorama europeo però insomma qualcosa che deve esser fatta ma che comunque non è l'unico mezzo per avere
Debenedetti per poterli fare valere anche in Italia grazie grazie grazie
Ora io aprirei esso sia ancora un po'di tempo la discussione sugli altri due interventi dottor Polli
Del dottor corrotta se qualche intervento da fare qualche domanda qualche richiesta penso che relatore siano perfettamente a disposizione
Come giungere
Noi così saremmo arrivati esattamente alle dodici e trenta siccome ci sono degli altri tipi menti allora io sono ci sono altre domande ringrazio i relatori per primo è stato molto chiari
E hanno portato delle novità delle cose bellissime ringrazia ringrazio
Voi che avete ascoltato e lasciò il posto adesso credo al presidente del comitato scientifico per la distribuzione dei premi credo se tu Francesco sì grazie tutti grazie
Ora mi pare che siamo pronti per l'assegnazione dei premi che sono stati messi a disposizione del Parco scientifico e tecnologico Galileo
In collaborazione con l'Associazione Industriali dipinti del Veneto
Come sapete è stato bandito questo concorso per cui sono stati accolti dei poster dei quali sono stati selezionati otto che avete visto esposti entrando con locale dell'esposizione e di questi otto postero due sono stati premiati
Il primo poster è stato fatto presentato dal dottor Domenico Frezza dell'Università Tor Vergata riguarda lo sviluppo di un test per individuare la presenza di tracce di proteine animali in farine utilizzarli come mangime
Il teste basato sull'analisi del DNA mitocondriale mediante chi sia competitiva è rapido economico molto sensibile estremamente specifico
Per l'attualità della problematica la qualità della ricerca che ha portato allo sviluppo del teste RAI Med traducibili ITA dei risultati in prodotti commercializzabili della commissione unanime ha ritenuto di assegnando il premio al Progetto un nome tutti sia competitiva
Per la determinazione e quantificazione di tessuto bovino trattato ad alta temperatura
La temperatura secondo normative UE
Causa
Il secondo premio secondo soltanto dei Rolling però della falda alfabetico è stato assediato all'ingegner Riccardo Lattanzi
Tu un ambiente Software per la progettazione di protesi d'anca totale presenza un potenziale applicativo di indubbio interesse in chirurgia ortopedica assistita
Il prodotto della ricerca un forte carattere innovativo con ricadute rilevanti per le imprese nel settore dei dispositivi protesici tale ricerca anche Richie tour ricevuto un'ottima accoglienza da parte della comunità scientifica internazionale
Io chiedo adesso deserto a Roma Nigeria tornano il presidente del Parco scientifico e Leo di consigliare la targa e il relativo assegno al dottor Domenico Frezza
E quindi al presidente Ferruccio Marco la presente alla fiera Ferruccio Macola di prese consegnare secondo
Segno inconfutabile
Credo troppo
Diatomee adesso sì darà
Qualche breve annotazione in margine a questo premio
Sì spende molto molto molto molto
C'è il trucco
Io volevo congratularmi con i vincitori del premio ma anche con tutti coloro che hanno voluto adesso partecipare
Ci sembrava importante dare un segnale con un premio che atti messe al alla trasferibilità dei progetti di ricerca in risultati di natura economica industriale un segno della presenza del Parco dell'interesse del Parco scientifico la sulle biotecnologie
Questo insieme di risultati cioè i poster che sono pervenuti alla Commissione sarà oggetto della redazione di un piccolo do Klett
Di formato adeguato a rappresentare anche l'aspetto grafico così importante che verrà distribuito ad un mailing mirato di impresa che abbiano o potenzialmente possono avere interesse
All'uso di gruppo dei progetti presentati questo per dare un senso anche di continuità di concretezza lavoro che i ricercatori hanno voluto presentarci e che Contini a portare sul mercato il nome di questa manifestazione che tutti avete contribuito a rendere così efficace grazie
Pensione senza ricordare il contributo decisivo che il comitato scientifico intero e la manifestazione avuto da parte del Parco scientifico Leo che realmente ha fatto l'enorme sforzo di collegamento fra comitato scientifico la realtà industriale
Non soltanto di Padova ottenendo risultati concreti di cui questo è solo un aspetto ma che ci riproponiamo possa essere foriero di ulteriori miglioramento ulteriore miglioramento dei rapporti Fabio tecnologia il mondo imprenditoriale e che sicuramente è stato perseguito con molta determinazione dal suo presidente l'ingegnere torna grazie ancora
Mirò del prosciutto io Pozzani visto il comitato organizzatore
A questa sessione che si chiama prospettive terapeutiche la biotecnologia in realtà potevo Ricard dare una vera una famosa frase di Galileo che disse nella scienza io cerco la luce ma anche il beneficio
E in effetti questa sessione dedicata proprio questo come approfondire le conoscenze di scienza di base e come trasferire queste conoscenze
In attive nuove Therapy ieri
Metodi di cura che ritornino
Con un beneficio unico fronte salute umana degli animali della produzione di vegetali quindi un in un effettivo miglioramento della qualità della vita
Per illustrare gli aspetti le potenzialità di questo approccio oggi abbiamo un veramente un selezionato pannello di Dini spingersi
E il primo di questi il professor Giorgio Poli che è professore ordinario di Microbiologia
All'Università di Milano ne ha facoltà di medicina veterinaria di cui al preside e lui si interessa di una serie di malattie che sono state definite solo molto molto recentemente i meccanismi patogenesi non sono affatto chiari e mi riferisco a quelle malattie che sono causate da proteine con conformazione alterata per i quali è stato coniato un nuovo nome che quello di prioni
Presso il Polo proprio esperto di prim'ordine di questo ci parlerà così pure de dei suoi tentativi di trovare delle molecole che bloccano queste variazioni conformazionale lì quindi questa tradizione da
Proteine non patogeno poteva patogene e dei tentativi di fare i vaccini contro queste proteine allo scopo di prevenire la malattia
Giorgio
Buongiorno a tutti
Il titolo
Del convegno abbia nuova idea per la vita incomincia parlando di un morto ha poco a che vedere con i transgenici la salute e comunque mi piace leggervi due righe
Il deus ex arriva sul luogo del delitto la vittima è riverso sul tappeto la porta non ha segni di effrazione l'assassino non ha lasciato impronte ma siamo nel due mila e venti il delitto perfetto non esiste più il Detective estrae la sua valigetta un apparecchio di alta tecnologia neuro chimica lo applica le tempie del corpo ancora caldo e guarda su un piccolo video che cos'è rimasta nelle memorie della vittima
Le immagini degli ultimi momenti della vita il volto di chi ha ucciso
Addio Sherlock Holmes Addio mia mal Paul addio Hercule Poirot nessuno spreco di materia grigia ci penseranno le connessioni neuronali del morto a svelare la soluzione del giallo
Questo per dire che ciò che sembra irrealizzabile oggi diventa di routine domani pensiamo solo le cellule staminali di cui sentiremo una relazione oggi stesso
Per incominciare parate transgenici voglio fare un piccolo passo precedente nel senso che sapete che transgenici cosiddetti OGM organismi geneticamente modificati unico geneticamente migliorati sono usate questi termini se essenzialmente per piante modificate geneticamente o per animali si usa preferenze preferibilmente il termine Mgm per i i microrganismi geneticamente modificati e quindi un breve flash su quanto la Biotechnology offerto anche ingegneri Zandonà ed è stato il primo approccio microrganismi il tutto è possibile l'ingegneria genetica è realizzabile perché ne sappiamo che qualunque essere vivente anche Sibiu forse non possono essere considerati tali Tibaldi piccolo al batterio al mammifero più grande la balena sino all'uomo
Tutti gli esseri viventi tardano a livello di codice genetico cioè traduzione di un gene in proteina lo stesso linguaggio cosa vuol dire che vuol dire che se ne prendiamo il gene che codifica per l'insulina dal pancreas di un uomo inseriamo in questo escherichia coli questa una gigantografia microscopie tonico scansioni di Escherichia coli escherichia coli legge il messaggio come lo leggerebbe il pancreas
E si produce insulina umana autentica che quella che attualmente in uso clinico ricordo che l'insulina ricombinante cioè pronta un'queste tecniche e ormai usata clinicamente dal mille novecentottantadue la prossima
Dagli anni novanta e si sono sviluppate moltissimi altri prodotti cosiddetti farmaci salvavita
Che vengono appunto prodotti in microrganismi geneticamente modificati
Individuato il gene per il prodotto di interesse si inserisce in un batterio un macello Carioti in un lievito o anche in una cellula vegetale o animale
Io teniamo quindi prodotti estremamente puri di origine umana perché il gene inserito e di origine umana
Insulina interferone con le stime Nation Sartor eritropoietina tanto amata dai ciclisti
Porretti Pria l'attivatore tissutale del Trasimeno Gino che è un farmaco salvavita veramente perché di solito rapidamente i coaguli di fibrina quindi veramente sulla vita dei casi di ictus infarto di trombosi
Prossima
Parimenti oltre a commissionare un batterio o un altro microrganismo sostanze di tipo terapeutico ci posso commissionare anche sostanze preventive di Pacini perché i vaccini son costituiti
Da quegli elementi da cui è strutture proteiche che catanese caratterizzano batteri e virus protozoi e funghi
Il primo vaccino da Biotecnologia allestito punti microrganismi è stato il vaccino contro l'epatite B
Questo è lo schema il virione l'epatite B si presenta in questa maniera
Quando un soggetto è infetto a livello del suo fegato si moltiplica il virus che ha queste caratteristiche però produce un eccesso di guscio proteico rispetto al genoma interno
Quindi grande parte del Duce proteico non infettivo va in circolo e si presenti in circa otto forma di piccole particelle rotondeggianti o di forme filamentose
Inizialmente i vaccini disponibili venivano tenuti da soggetti portatori sani che avevano in circolo il cosiddetto antigene di superficie HP SG non infettante perché era sotto questa forma
Con tutti i rischi poteva conseguirà il fatto di usare sangue di un soggetto poteva essere
Incubatore del IVA delle partite ciglio di altri patogeni la prossima
Quindi in pratica i ricercatori hanno ingegni Rizzato né inserito il gene per far produrre il guscio vuol dire dell'epatite B in un ieri che in questo caso si capisce come lievito perché battere come sapete si dividono per scissione binaria metà qui invece proprio partendo il mondo vegetali gli eletti che sono questi funghi unicellulari
Fanno produrre alla cellula figlia attraverso gemmazione sì ma per le leggende di una pianta la prossima
Ingegneri Zanda ho questo microrganismo quindi individuato l'antigene di superficie o HP SG il gene che codifica per tale antigene e stato ingegnere Zagato
Saccharomyces cerevisiae questo lievito che adesso produce l'estrema pronto purezza un vaccino estremamente attivo e sicuramente Safe perché contiene solo proteine la prossima
Il braccio il futuro sarà che queste produzioni sia di prodotti terapeutici salva vita che di vaccini
Sì l zero anni le piante perché non c'è un po'di quei problemi etici e soprattutto non ci sono quei patogeni che possono esserci di rischio se lavoriamo in altri ambienti
Il tabaccaio delle piante più usate e già nel tabacco hanno prodotto proteine l'interesse medico come l'emoglobina l'eritropoietina anticorpi altre sostanze
Quindi il futuro sarà a mio parere il campo vegetale la prossima
Propriamente oggi piantarla di transgenici Sulutumana
Quindi gli animali transgenici su quegli animali che sono stati modificati geneticamente inserendo nel loro genoma un DNA un gene che mai avrebbero potuto avere in condizioni naturali affinché questi animali acquisì acquisissero nuove caratteristiche
Per potere ottenere un animale transgenico e che affinché questo gene sia presente in tutte le sue cellule quindi posso poi essere espresso in qualche modo bisogna inserire il gene estraneo
Quando l'animale fatto da poche cellule o meglio quando è fatto da una singola cellula cioè quando abbiamo lo zigote quando la cellula uovo che qui vedete
Una spaccato di una cellula uovo viene fecondata dallo spermatozoo
Questo il momento dalla fecondazione l'immagine reale e una vera foto al microscopio tonico scansione sono falsi colori
E quindi praticamente a dedicare non milioni di spermatozoi per fecondare una cellula uovo però non so se è stato più veloce fotografo molto veloce ora lento lo spermatozoo raccolto proprio al momento della fecondazione la prossima
Al microscopio normale vediamo quindi lo zigote l'ovocita che ha ricevuto il materiale genetico del maschio cioè dello spermatozoo il cosiddetto pro nucleo maschile
Allora quali sono le tecniche per potere
Rendere transgenico animale per dagli nuove caratteristiche di utilità per il campo medico sono quattro cinque quelle più utilizzate
La prima ad essere utilizzata è stata quella proprio della micro inoculazione di un circa cento duecento copie del gene da trasferire per ottenere o un farmaco salvavita o per ottenere prodotti di alto interesse o per modificare le caratteristiche dell'animale
Qui vedete queste nozze quote quindi lo cita
Il pubblico maschile questo l'ingrandimento c'è una Ripetta che mediante suzione tiene ferma telefono lo zigote e qui con un micro Agostino aprono come vi dicevo da cinquecento copie del gene da trasferire
Questo lo dei sistemi i primi usati e ancora usati adesso un altro sistema potrebbe essere quello e che viene ancora usato e che viene studiato e quello di usare per trasferire indigene che vogliamo fare esprimere l'animale
Dei vettori trovi orali quindi del virus che per loro natura si integrano nel genoma della cellula ricevente
Però siccome sono cioè di sono più losca Pacifico di indurre tumori deve sempre valutare il rischio beneficio quindici usano nella terapia genica dove sono maggiori benefici rispetto i rischi
Un altro approccio ancora è quello di usare cellule staminali modificate geneticamente oppure la prossima per introdurre il nuovo DNA
Una metodica molto interessante mi sembra sia molto fruttuosi è quella di utilizzare lo spermatozoo
Come vettore lo spermatozoo se lo si mette in una soluzione di geni di DNA lo assorbe assorbe questi geni sulla sua superficie e quando si fecondo un ovocita anche sperimentalmente trasporta all'interno della cellula uovo
Il DNA estraneo che volete fare esprimere e questo viene acquisito in circa il trenta per cento dei casi qui in pratica questo è un veicolo che sembra essere molto utile per ingegneri Zare un cellula uovo per avere un animale transgenico la prossima
Però il breakthrough cioè la soluzione vera e l'ottenimento del risultato migliore e quello di ottenere i cosiddetti condoni transgenici
Cosa vuol dire se voi inserito un DNA o termico inoculazione o con le cellule staminali modificate o con il vettore virale o con lo spermatozoo
Non saprete mai in sé il DNA dimostri interesse va a inserirsi nel punto giusto e se poi verrà espresso nella maniera corretta si procura le renne al Messaggero e la proteina desiderata
Ecco che allora hanno messo a punto un sistema estremamente vantaggioso che ci consente di dare risposta a questi aspetti
Già è in atto un animale che si chiama polli rinata quasi prima di Dolly
Il primo animale clonato che l'animale transgenico che produce nel suo latte il fattore nono della coagulazione del sangue quindi un farmaco salvavita per i soggetti colpiti da emofilia di tipo B come funziona il meccanismo
Sì prelievo sintetizza dall'uomo il gene che codifica in questo caso per il fattore nono della coagulazione
Si prende una cellula somatica dell'animale in cui ci poi ci interessa poi esprimere il proprio interesse il farmaco salvavita possono essercene mammarie come ho fatto per Brolli
Quindi in pratica si crea un costrutto genetico particolare per cui abbiamo incendi umano di cui vogliamo fare esprimere la proteina
In più per poter seleziona le cellule si mette un marker che determina la resistenza delle celle che acquisiscono questo nuovo costrutto genico resistenza alla neo mi Cina
In pratica si coltivano quindi Cellule modificati geneticamente in vitro cellule di pecora
Che contengono un gene di origine umana che codifica per la sostanza salvavita più hanno un marker per la distensione non vicina
Si coltiva un queste cellule in presenza di ricomincino a sole quelle che veramente hanno acquisito il costrutto potranno moltiplicarsi
Queste cellule sono geneticamente modificate si possono coltivare in grande quantità e a questo punto non può controllare severamente hanno quindi le mete che ci interessano
Quindi mediante Peace Jaro queste Belotti vedere se il gene di nostro interesse è stato acquisito dal genoma della cellula in cultura
Se produce Rena messaggero se questo era il messaggero vai riposato e produce la proteina salva vita di nostro interesse una volta verificato questo e abbiamo migliaia di cellule per verificarlo usiamo i nuclei di queste cellule per clonare gli animali quindi in pratica sempre nel nucleo della cellula che sicuramente transgenica
Si prende un ovocita e lo si svuotano citare il pericolo si svuota
Si inserisce il nucleo della cellula transgenica che contiene il gene umano di nostro interesse lo si trasferisce la madre surrogata e né in questo caso nel cento per cento delle cellule sicuramente abbiamo in genere i nostri interessi e che si esprime correttamente la prossima
Gli approcci uno degli aspetti più interessanti è quello di produrre animali transgenici
Che abbiano delle patologie dei difetti tipici di malattie umane per cui si possono avere un numero notevole di topini per esempio che sappiamo che dopo un certo per i tempo svilupperanno il tumore alla mammella come lo sviluppo alla donna quindi hanno inserito per esempio l'oncogene oncogene Genet che causa il tumore umano CIMIC si chiama
Nel topo e hanno tenuto il cosiddetto un cotto poche strade stato privato a poter essere brevettato
Questi topi si sa che da pochi giorni presenterà tumore alla mammella pensate che vantaggio per ricercatore sapendo che verrà al tumore la mammella la modalità di mettere a punto sistemi diagnostici che cosa cambia nel soggetto prima che compaia il tumore
Ossidata scrive are molecole terapeutiche a decine di animali su cui valutare l'effetto antitumorale
Ancora un altro approccio
Oltre a il discorso banco genesi è stato quello dalla malattia di Alzheimer hanno modificato dei topini
Inserendo il DNA che codifica per la proteina che causa l'Alzheimer l'Alzheimer è causato da un'alterazione di un gene che fa produrre la proteina corrotto una proteina anomala che si chiama che da forma un aggregato che si chiama amiloide beta quarantadue
Che si deposita nel cervello da le placche amiloidi che da tutti i danni che molti di voi però il merito per letteratura o per esperienza con dei parenti o con dei vicini conoscono essere tipico dalla mattina di Alzheimer
Questi topini transgenici perché sono stati inseriti già stati modificati geneticamente con questo gene difettoso andando incontro all'Alzheimer con tutti i danni istopatologici cerebrali tipici dell'Alzheimer
Avendo questi modelli dei ricercatori Rutelli ha molto intelligente han detto perché non cerchiamo di bloccare la produzione di questa proteina patologica o cerchiamo di eliminarla allora han preso la proteina detta quarantadue l'amiloide beta quarantadue
L'hanno utilizzato come vaccino hanno vaccinato questi topini
E hanno sorpreso o se osservato una cosa molto interessante quesito Pini producendo anticorpi contro l'amiloide beta quarantadue allora servivano immunizzarsi quando erano giovani addirittura gli animali non si ammalavano andavano incontro Alzheimer oppure si è già agli i topini avevano i sogni dell'Alzheimer e venivano vaccinati di anticorpi prodotti facevano regredire le placche amiloidi nel cervello
Riducendo il grado di patologia non portando guarigione ma ottenendo dei benefici incredibili
Lo stesso protestiamo facendo noi nei per i prioni abbiamo dei criceti che sono stati demonizzati con porzioni diverse del prione che causa la famosa mucca pazza la crosta egli ha come nell'uomo
E ad siamo riusciti usando durante i particolari a produrre autoanticorpi contro la proteina del prione e gli esperimenti sono in corso e speriamo che vadano a buon fine la prossima
Tutto questo se avevo fatto dovevo farlo prima anzi dopo aver fatto vedere quest'immagine perché era per ricordarvi in particolare dei topi transgenici che manifestano l'Alzheimer di tipo umano
Perché è di facile queste maglie tutto il Q qui sotto durare perché han visto che uno dei primi segni Della Compasso d'Alzheimer e la perdita la caratteristica dell'odorato
Quindi c'è una qualcosa che si alza il livello delle fibre nervose del Nervo fattorie o per cui c'è un'alterazione e ci sono anche dei sistemi per potere previa inerti care questo tipo di approccio quindi ve lo ricordo per ricordare che adesso avendo quesito Pini che svilupperanno l'Alzheimer abbiamo un modello sperimentale estremamente importante la prossima
Altro approccio animali transgenici per diciamo modelli di patologie umane oppure animali transgenici che producono come abbiam visto prima per i batteri operati microrganismi farmaci salvavita
In pratica individuato il proto salvavita potrebbe essere l'altra un'antitesi Presena i fattori della coagulazione del sangue tutti quei farmaci che non usciamo tenere farmaci biologici lasciamo tenere
Mediante estrazione dall'uomo possiamo farli produrre a un animale
Si chiama proprio Jing farmi la fabbrica la fattoria dei geni ovviamente non sono scopo alimentare questa rimane la parte produrre farmaci salvavita
Individuato il prodotto che vogliamo
Generare
Sintetizziamo ovviamente il DNA che codifica per questo prodotto lo inseriamo le perlopiù maschile di uno zigote in una cella uovo appena fecondate di bovino
L'animale che verrà alla luce l'animale transgenico avrà in tutte le sue cellule il gene che dice produrre per esempio la diciamo i fattori della coagulazione del sangue per esempio il fattore nono della coagulazione
Ed è detto che sia un animale polli una piccola in queste condizioni
Come si fa però a far sì che il prodotto che ci interessa venga espresso in quei tessuti da cui poi si può ricavare con facilità
Il costrutto genico quindi il gene che codifica per il farmaco salvavita
è stato allestito in modo che il promotore cioè l'interruttore che accende e spegne è il promotore della Beta caseina
Che attivabile solo nelle sale le ghiandole mammarie quindi vuol dire che questo genere si esprime produce il salmo consone alla mammella
In più cosa ancora più interessante
Si è visto che c'è un attivatore sceglie questo costrutto genetico che UGL della metà all'occhio Nina che regolabile somministrando con l'alimento lo zinco
Quindi una vuole che in questo mese l'animale produca latte ricco del farmaco ci interessa sita
Zinco
Incomincia a produrre se non ci interessa più si sospenda somministrazione e quindi possiamo interrompere la produzione del farmaco salvavita la prossima
Queste molto vecchia però già ci sono delle pecore transgeniche che producono il loro latte l'altra un anti Trips inumana che
Veramente un farmaco importante la terapia deve intriso della dell'enfisema assoluti una malattia terribile che la fibrosi cistica Figo reciti con la fibra e quella malattia che causa un addestramento partiva dei monconi Baldelli respiratorie io ho conosciuto persone con questa patologia
Pensate che i bambini quotidianamente devono essere aspirati proprio di diversi era spirato il muco dall'apparato respiratorio non far ginnastica funzionale di un certo tipo
E la Fura antisepsi invece diluisce fluidi Filagosto materiale quindi veramente un farmaco salvavita
Ancora vi ho citato i fattori della coagulazione ottavo nono
Del già ricordato il tipi a l'attivatore tissutale del Pac-Man oggi no che viene prodotto nel latte di capra transgenica
Che di soldi coaguli fibrina ma molto interessante ci son già dei suini che nel loro plasma producono emoglobinuria in autentica
Cioè sono stati ingegneri Zatti pigliando il DNA dell'emoglobina umana
Inserite le famoso con tecniche diverse comunque immaginiamo le produco maschile della cellula uovo di su meno appena fecondata
Hanno sviluppato la possibilità di produrre nel loro sangue quindi loro plasma in modo più inumano autentica in genere a seguito di incidenti stradali di incidenti sul lavoro la vittima a seguito di Gardini gravi diciamo emorragie decede nel trasporto di dal dal sito dell'incidente all'ospedale perché non c'è ossigeno che può arrivare al cervello
La carenza di trasfusioni immediate del sangue è spesso impossibile avendo disposizioni emoglobina
Ottenuta la suino ma emoglobina umana autentica perché il gene inserito di tipo umano
Avete un Javier un trasportatore di ossigeno salvavita veramente senza bisogno dalla compatibilità di gruppo sanguigno che sulla membrana dei globuli rossi qui non c'è un quadro ci sono emoglobina nuda la prossima
Perché vedendo questa immagine
In pratica la clonazione è proibita a livello mondiale per quanto riguarda l'uomo per quanto riguarda l'Italia la clonazione proibita negli animali
E il decreto è stato reiterato per almeno otto volte scale l'ultimo decreto al fine di quest'anno
E sia al ministro Bindi io partecipato queste commissioni e sia Veronesi la sempre reiterato cioè divieto di clonazione umana come è giusto a livello mondiale
Colazione animale con senza solo per gli animali che producono farmaci salvavita per non perdere delle diciamo delle fonti e dei prodotti preziosissimi oppure per gli animali in via di estinzione
Sembra che Sirchia invece voglia quando decade questo decreto la fine dell'anno applicando una nuova normativa consentire la clonazione animale quindi questo potrebbe valere anche per animali come vedremo tra poco
Donatore di organi per gli xenotrapianti
Ricordo che ho presentato bolli il primo animale clonato la prossima
Entriamo in un altro tipo di animale transgenico
Queste immagini Anna laparotomia laparotomia vuol dire apertura chirurgica dell'addome
In questo caso per fare un trapianto di fegato
Vi ricordo che un soggetto che per esempio ci avvelena con dei funghi Morigi di ventiquattro quarantotto ore se non vengono rimesse in funzione le caratteristiche del fegato cosa che anche qui a Padova è stato autorizzato il sangue del paziente viene fatto passare attraverso dei seghetti
Di suino per cui viene filtrato il sangue viene restituito al paziente nel frattempo il fegato si riprende è soggetto sopravvive se no morirebbe
Oppure c'è un debito reattori sempre extracorporei con cellule sempre di suino per cui queste purifica lo fanno la funzione del fegato che nel momento di danneggiato Easy potere questo risultato però il risultato più attesi e quello dei trapianti di organi
Vi ricordo che in Italia ci sono annualmente dodici mila persone in attesa di trapianto d'organo
Le persone che stanno aspettando un trapianto di rene e lunghissima
Quelli che aspetta un trapianto di fegato di cuore e molto ridotta non perché manca le necessità è che chi aspetta un trapianto di rene può farle dialisi in ospedale e adesso anche a domicilio che aspetta un trapianto di cuore
Mio cardiopatia dilatativa oppure intossicazioni acute di fegato va incontro a morte se non c'è nel giro di pochi giorni o al massimo di Nancy
L'evento nefasto per qualcuno che muore per un incidente per altri motivi credo nei suoi organi quindi proprio veramente costellato di Ante problematiche di tipo etico e di tipo anche biologico la prossima
E curioso rilevare che da sempre l'uomo ha cercato di trovare dei pezzi di ricambio per riparare ciò che alterato
Questo è l'immagine è un dipinto che ricorda i due Medici e martiri Cosma e Damiano sono stati con un intervento molto diciamo allora avventure mistico hanno sostituito una gamba necrotizzato una gamba
Ormai che andava amputata di un bianco con quella di un africano morto io ho scritto promettevano soppresso
Ovviamente siamo le mille duecento eh
Quindi avete pensate che parliamo Otello io vengo da Monza quindi c'è il collega esperto di trapianto delle mani pensate a tecnologia a che livello deve essere per trapiantare un organo tutti su una un un un alto come perse una gamba quindi ovviamente non c'è stato nessun attecchimento all'epoca ma per dire che il tentativo ci sempre stato la prossima
Quindi la richiesta di organi per i trapianti segreta molto spesso nei confronti di specie non umane non esce invece la disponibilità di avere organi umani quindi compatibile più facilmente
E c'è una storia proprio delle xenotrapianti xenotrapianto è un trapianto tenuto tra specie diverse dalla dalla scimmia all'uomo da suino all'uomo mentre invece si separa dalla mollano si parla di all'o trapianti se parliamo di xenotrapianti possono essere concordanti si son quelli da scimmie
Da primati non umani all'uomo perché son più vicini filogeneticamente oppure discordanti sono molto distanti periodiche sui molto distante da questo punto di vista rispetto all'uomo
E curioso rilevare che già nel mille ottocentosessantadue pensate un nobile russo era stato ferito alla testa e un chirurgo brillante dell'epoca gli aveva riparato la lesione alla al cranio
Preparando utilizzando non me la porto né teca cranica
Di un Cragno posso di cani
L'esperimento ha avuto successo però la Chiesa russa ha minacciato il nobile di scomunica Lou quindi emendato prontamente parte di asportare questo pezzo di tessuto di origine canina
Grande successo invece hanno avuto avuto la cute Tirana per il trattamento di grandi ustionati o soggetti colpiti da piaghe torbide
Nelle de la grande guerra anche la fine dell'Ottocento ma anche la grande guerra e pagano scoperto che la cui ti dirà la contiene sostanze antibatteriche antivirali molto efficaci
C'è questo personaggio che dice verso meno centoventi di avere ridato la virilità anni sono dico uscire ceti in sala
A soggetti anziani tra piantando testicoli scimmia la comunità scientifica non è creduto a questi suoi risultati ventenne c'è purtroppo tutti i tentativi di trapiantare da scimmie scimpanzé o babbuini o cuori orrendi
In persone per potere supplire al deficit che avevano non ha mai tenuto in vita i soggetti paziente prima di Pridi due settimane massimo tre settimane
Vuoi per la scarsa capacità di averla portata volumetrica del sangue vuoi per il Vegetti per acuto di cui parleremo
Nel senso che c'è un rigetto immediato origine dieci venti minuti da parte stemmi munita del ricevente rispetto gli organi donati
L'unica eccezione l'hanno fatta le cellule neuronali di suino che sono state trapiantate pensate nel cervello qui sono esperimenti in corso in pazienti colpiti da Parkinson
Che quando sono stati in oculati con cellule neuronali
Di suino hanno avuto dei benefici incredibili nel senso che hanno supplito al deficit dopaminergici poche tipico della materia Dini di potentati sono scusate
E perché non c'è stato rigetto perché il sistema immunitario e così insiste metallica del sistema nervoso centrale considerato un santuario immunologico lì dentro non arrivano né anticorpi le cellule difensive
Quindi a distanza con gli sette otto mesi da quando gliene oculati i pazienti stanno bene e le cellule sono ancora intatte quelli suini alla prossima
Un altro approccio intelligente è stato quello di usare sempre isole pancreatiche destino per produrre insulina per trattare i soggetti colpiti da diabete con desse con del tecniche particolari cioè inglobando in film plastici di provvista tale per cui queste sono le cellule pancreatiche di subito che producono insulina e che sono utili per i diabetici
Ma mentre l'insulina può fuoriuscire da questo film plastico gli anticorpi eventualmente presenti contro che risulterebbero il tessuto non riescono ad entrare la prossima
Questo necrotico per ricordarvi che quando cita la pianta da un soggetto di un altro si tratti di animale ma anche nell'uomo
Se non c'è compatibilità molto stretta sì sì trapianto un tessuto di un soggetto ad un altro differente per il gruppo sanguigno o di compreso visto compatibilità non entro in questo dettaglio
Il sistema immunitario del ricevente riconosce come estraneo l'organo trapiantato e lo distrugge e questo è un organo rigettato è un rene tagliato in due che fa veder la necrosi totale di questo organo stesso
Ne abbiamo rigetto iper acuto come vedremo tra poco che vede in dieci minuti il ricette invece diciamo a Couto che un rigetto pascolare Cocco cinque sette giorni interviene anche negli Allotta pianti quando sta la pianta da uomo a uomo anche usando farmaci immuno depressione come ciclosporina se la compatibilità non c'è il soggetto di gettarli nella prossima
Ecco allora l'idea di studiare se si riesce a creare a modificare in qualche modo gli organi del sondino che sembra essere l'animale che per fisiologia e caratteristiche biologiche più simile all'uomo non prevedevamo un po'come
Il la possibilità di modificare in modo che venga accettato e non ci sia rigetti per acuto perché vedete invece prendete
Il spiega Torre nel cuore di un cerino tra privati in un uomo di anticorpi naturali che qui vedete presenti normalmente nel circolo del ricevente
Reagiscono immediatamente questo è lo schema della membrana citoplasmatica di una cellula che riveste un vaso sanguigno
Ci sono delle molecole che caratterizzano sono diciamo molecole zuccherine con delega l'atto ci son degli zuccheri molecole zuccherine lineari
In pratica succede con mesi fa al trapianto del fegato dalla Sonnino all'uomo patrimoni Fassi allaccio dei vasi sanguigni per tenere in vita l'organo trapiantato
Nella nel suo nel ricevente ci sono gli anticorpi queste subito inondano il tessuto e se trovano delle strutture da su cui reagire come in questo caso l'anticorpo si lega l'antigene aveva poi il complemento che determina la morte della struttura
Allora ecco
La verifica che in campo umano per cui è questo non succede perché l'uomo invece di avere
A livello dei suoi endoteline molecole lineari di questo tipo con dell'Alfa galattosio a del focoso messo in questa posizione gli anticorpi naturali presenti non riescono a reagire non riescono a distruggerlo
Ecco allora l'idea dei ricercatori di fare dei suoi inizierà cinici che avessero questa immagine anziché questa
Cioè che avessero del subconscio
Posto in questa posizione secca e del della
Dall'altra galattosio come in questo caso la prossima
Me la vado velocissimo quindi mediante voce trasferitasi sia riuscito a ottenere dei suini che adesso non vado più in contro i giochi per acuto perché mimano il comportamento umano la prossima
Il nostro futuro sarà pieno quindi di suini la prossima
Ho pochi minuti mass media quindi grande reazione contro i trapianti di origine suina perché l'uomo però si è trasformato in su fino alla prossima
Anche Dario Fo è intervenuto in questo dibattito
Parlando di un tabulato dicendo quanti organi di suino quanti genetici Wind di uomo scusate Messi nessuno fa diventa sui nomi vanno oppure quanti ordini discipline messi l'uomo fan diventarlo Nocerino la prossima
Qualcuno invece vado un approccio diverso sono i due figli che dicono il nostro Papa est ha ricevuti tanti trapianti d'organo dovuto essere seppellito in un cimitero per animali la prossima
Però c'è
Cioè Dario Fo è giusto che faccia un'osservazione non se ne voleva cosa scientifica e di un aspetto molto diciamo eticamente importante
Brasile nel quartiere Palermo antileader sequestrano reni a due mila donatori per venderle in Brasile Messico in imeni ne deriva vengono uccisi prese mutilati degli organi
In pratica il giusti prigionieri giustiziati vengono divenne asportati gli organi per i trapianti di vittime di incidenti stradali prima che siano dichiarati ma tecnicamente vengono asportati degli organi fondamentali la prossima
Il problema è quello della rischio che ci siano dei retrovirus Chandhok e ci sono il rischio si son pericolosi delle frodi riuscendoci nella prossima vado fino alla fine rapidamente perché non poteva diversamente
Una tecnica per scoprire se veramente i retrovirus endogeni destino possono esser a rischio per il ricevente la prossima
Tutto potrà essere risolto mediante le cellule staminali la prossima
Un una placca di cellule staminali la prossima la prossima
Le diverse provenienze cosa può succedere ma venuti da qualcuno più avanti la procedura veramente terminato questo giusto per chiudere amore mio andiamo a casa dopo una certa e romantica e facciamo un bambino la prossima
La ringraziamo calano i talk show Poli per questa bella Chiara presentazione
Che aveva suscitato penso parecchie domande alcune sicuramente di per alcune sue micro mente potete trovare risposta in un libro che li ho appena scritto pubblicato dischi alle biotecnologie conoscere per scegliere
Presso UTET
Le altre ne possiamo porre subito perché appunto c'è tempo per la discussione e quindi se ci sono domande
Volevo porre due questioni due domande la prima e avevo sentito parlare tempo fa dell'utilizzo di una proteina inibito Rizzo del complemento per fare tu swing trasse inizi che potessero dare i loro organi per gli xenotrapianti Duff se non vado errato devo sentire come il sì questa area era stata sviluppata secondariamente le volevo chiedere alcune delucidazioni su
I retrovirus o animali che potrebbero eventualmente di attivarsi come accennava nel caso di se non proprio grazie
Alla prima domanda in effetti ci sono diverse tecniche per poter far sì che sì Uma inizi tra virgolette l'organo del suino o l'animale come tale affinché il sistema immunitario e non lo riconoscono reagisca in maniera imponente con i rigetti per acuto che avviene in dieci quindici minuti
Rigetto dell'organo allora un è quello di cambiare il disegno delle molecole dei vasi mitraglia all'alto come dice giustamente il collega
Che è stata della propria Italia grazie a una finanziamento del Ministero frase l'agricoltura della sanità
Nella nella regione
Mi sembra che sia a Reggio Emilia ci fosse questo questo stabulario sono riusciti perché l'idea qual era sia trapianto un organo di suino arriva l'anticorpo l'anticorpo è solo un segnalatore
Riconosce la sostanza estranea però che richiama il complemento che un sistema enzimatico estremamente litico e distruttivo
E siccome esiste il così detto data di Keynes e le reti in fatto cioè fattori che accelerano la fonte del complemento o lo rallentano ecco che allora cosa han fatto han costretto i suini transgenici
Usando tradotto la tecnica dello spermatozoo che porta dentro il gene estraneo
Con dentro appunto un Jenne che rallentasse l'azione del complemento umano quindi in pratica sono già nati questi suini e io ho avuto modo di seguire questi esperimenti non le sperimentazioni ma le relazioni qui son dei suini i quali quando i loro tessuti vengono trapiantati nell'uomo non c'è questo rigetto il per acuto perché loro stessi si difendono dall'azione del complemento in quanto degradano la molecola complemento che quella difensiva principali da questo punto di vista purtroppo voi sapete com'è andata la storia contro le biotecnologie sembra che stiano riaprendo le porte per favorire il discorso di base quello che contro le biotecnologie c'è stato un atteggiamento propri di chiusura diciamo
Non accettabili diventati ideologica perché ce l'hanno i campi sperimentali sono stati bruciati i campi sperimentali servì al per dimostrare se erano a rischio meno fossero stati dimostrati e rischiosi eliminavano sono stati bruciati privati avessero i risultati la stessa cosa ha bloccato i finanziamenti su questo esperimento che stava andando molto bene
Dove questi suini poteva essere usati per le prove cliniche di xenotrapianto in quanto evitando rigetto grazie la presenza di questo dato
Di questa molecola presente sul suino che bloccava il complemento umano
Diede troverà invece pur nel più delicato
Tutte le specie animali nel compresi abbiamo dei retrovirus cioè dei virus potenzialmente capaci di causare tumori si chiama retrovisore pagano trascrittasi inversa che fan parte del nostro genoma della nostra storia evolutiva c'erano i polli suini l'uomo e così via
Con successo e non conosciuti da sempre però un ricercatore un giorno
Ha dimostrato che questi virus integrati regina Mary suino possono crescere in laboratorio però anche in cellule umane Ras domandato non è che quando ne prendiamo l'organo di suino lo mettiamo nel soggetto che spetta al trapianto
Questo virus si sviluppa e incomincia a dare origine a nuovi perché non conosciamo che causano fu la morte del soggetto ma si diffonde anche diciamo nell'ambiente nel nel nella popolazione
Ci sono alcune indicazioni di massima proprio tutti in vitro che dicono stiamo attenti a questo evento di questo di questi virus che potrebbero creare dei problemi però c'è una storia di decenni o di centinaia di anni che dice che questo rischio sembra non esserci
Primo se questo fosse stato possibile c'è una storia di contatto tra uomo e animale con pensate ma ce l'attore insacca tori ai veterinari
Con quanto scambio di sangue c'è stato tra sogni dell'uomo senza che il pervenissero alla luce
In più annusato moltissime mute di suino per gli ustionati isolati di pancreas e altri trattamenti per cui soggetti anziani Soutine grande qualità materiali di origine suina senza che mai nessun per la cosa curiosa si chiamano erba
End oggi non se ne trova Eros Venus retro virali Prosecco esaurito umori
Endogeni per il Galles Nappi per dire pro Sahin perversi chiamano pericoli anche nato ceppo Circe per dire che può trasformare l'uomo il maiale no
Di pochi esperimenti fatti c'è gente che vive già da nove anni con trapianti o discutevo di soli Pancras mai nessuno di questi c'è stata l'evoluzione di un perno purtroppo dopo quell'esperimento che ha detto guardate che il per che presente non metallica genetico di Sonnino comici anche nell'uomo
Può causata moltiplica senso inumane
Molti Paesi europei magari giustamente ha messo al bando costituisca alimentazione in America è consentito dopo approvazione del Comitato etico c'è un comitato etico fatto da un virologo da un filosofo della scienza da un chirurgo eccetera decidono se e maggiore è il rischio di usare un organo di suino col mio disco del per opporrà
Però anche l'aspetto particolare mi preme dire quello del Sum Istituto tempo prima quando Dario Fo dice quanti geni di suino
Quanti ce ne divorando mesi nessuno fa nell'interno su in un uomo
Rendiamoci conto che se esaminiamo l'omologia dei geni perché naturalmente fa salti noi deriviamo dal primo RNA catalitico che diventato proibire battere poi all'attore G8 la forma di vita sicché se crediamo la storia dell'evoluzione
Il novanta per cento dei geni di troppo sono analoghi a quello dell'uomo infatti tutti i dati sperimentali la maggior parte ottenuti nella genomica sul corpo sono attribuibili sono trasferibili all'uomo
Il cosiddetto homo sapiens a pensate il trenta per cento di omologia genetica Collins non fermi nella Torah decimo Rabitti se eleganza neanche batteria hanno riso genetico sono nostri cugini
Quindi anche queste affermazioni vanno sempre modulate
La la vaccinazione
Per l'Alzheimer penso sia una delle poche più
Pronto
La la vaccinazione e la zarina penso sia uno del del aspettative più importante di questo secolo probabilmente però diciamo anche che al momento attuale le prime sperimentazioni cliniche utilizzando i vaccini
Non hanno funzionato allora io mi mi pongo mi pongo la domanda dobbiamo ancora dire che l'animale transgenico non rappresenta almeno in questo caso una una patologia umana o diamo colpa al modo con cui è stato fatto l'esperimento da un punto di vista clinico che a volte non è non è facile fare sperimentazioni cliniche oppure hanno scelto un antigene sbagliato
Ma rispondono difficoltà perché la letteratura che ho a disposizione primo lavoro ed invece del novantanove dove dimostrò che veramente nel topo transgenico abbiamo la prevenzione licenza la malattia addirittura la regressione poi sono state meno duro e oltre altri lavori sempre fatti su topi transgenici confermo questi risultati però non sono a conoscenza che siano passati dalla fase clinica
Se me lo sta dicendo lei non sono informato sull'argomento siglata da Bari non sono un tuttologo però se mi dà le indicazioni ciò mi interessa molti ci possiamo e dobbiamo San Giuliano lavoro di di dell'Amgen
E badi quando tempo fa prove propri qualche di di poche settimane qualche ore di qualche secondo fa
Quindi mite comunicherò Park perché mi interessa moltissimo questo allora lo posso spiegare quasi narra che trascorse questo di tutto la proteina son pronti esisti entrati le malattie che son dovute alla formazione proteine corrotte nel cervello c'è la proteina che di solito ci forma normalmente a un certo punto per mutazione puntiforme del genio perché nel caso di primo niente dal prione
Diventa un potere corrotte e assume una morfologia stili Ca'diversa per cui diventano indistruttibili si accumulano e pacche Miloje di ovviamente anche dei prioni dobbiamo metodi su cinque spezzoni del primo lì uno solo è quello che e da su cui è bene produrre anticorpi affinché venga bloccata la conversione quindi anche vedere se nominati esattamente quello che è un fatto in campo umano però la ringrazio dell'osservazione
Bene credo che
Possiamo una domanda ma su insomma
è un coglie il futuro a eventualmente di organi indi artificiali convegno Conticello vieni mai Vienna in transgeniche
Immobilizzate in mente Rizzini polimeriche eventualmente per aggirare il problema nel rigetto
Cioè c'è un futuro Ciampi capitali pensiamo rasente Cembra gli studi sullo molto ampi
Sul fatto di poter usare cellule animali che pur essendo funzionali producendo sostanze di utilità Tripoli sull'inno qualunque altra sostanza
Però non vengono attaccate Restelli Tariq quindi sono dei grossi studi su dei poi il film cede il film diciamo biologici che hanno una provvista tale per cui il consentono la secrezione sostanza utile
Ma non consentono l'ingresso quindi molto probabilmente spesso per il diabete migliore dovrebbe se curato attraverso diciamo capsule di questo tipo messe addirittura sottocute per cui c'è la liberazione dell'insulina
Efficace senza che ci sia un rigetto
Quindi in effetti la direzione e giusta si va in cioè si sperimentano tutti i settori perché anche il trapianto del suino sarebbe l'organo pronte non è che per sempre non se ne davano il suino serio per salvarla vide in quelle ventiquattro quarantotto ore nelle prime settimane nell'attesa che poi si risolve il problema
Sì con le cellule staminali come sentiremo oggi poi ci riuscirà a trovare
Diciamo la compatibilità le sue società staminale dove la differenziata in cielo muscolare in cielo anni nervosa in cielo a quota non solo tattica sarebbe no
Quella
Quel punto it
Grazie purtroppo sarà aperta utile introduzione
Di depositi vedo che risultano un po'piccole ma per le strisciate comunque a seguire il la mia presentazione
Il mio titolo parla di concetti di base e vi darò alcuni concetti di base di terapia genica
Anche se spenderò la maggior parte del tempo a dargli un sommario non lo stato dell'arte della terapia genica soprattutto e in campo oncologico perché questo è il settore di cui mi sono sempre occupato
E terapia genica vuol dire cercare di modificare l'organismo attraverso l'introduzione di uno o più geni pure di modificare alcune cellule di questo organismo in vivo o in vitro
Quando si modifica l'invito si parla di terapia genica ex vivo perché alle cellule dell'organismo che l'ho messo in vitro ed avviene il trasferimento dei germi che ci interessa inserire nella cellula
Per trasferire i seni occorrono dei vettori
Ne abbiamo sentito in parte parlare nel corso di queste giornate questi lettori possono essere vettori virali
E ce metto una lunga serie nazionale ma da alcuni o possono esser vettori non virare anche lo stesso DNA tra il medico può essere utilizzato
DNA nudo come qualcuno dice e poi ci sono dei vettori come Illy posarmi delle microsfere ore lipidiche che possono contenere DNA o o altri acidi nucleici adesso lei utilizzati per trasferire il loro contenuto nelle cellule
I più importanti non i più comuni lettori usati per la terapia genica sono finora i vettori virali
Soprattutto i lettori retro virali di cui vedete
Un esempio nelle prossime due taglio positivo questa una diapositiva che mostrando di un rosso con un retrovirus l'abbiamo appena sentito parlare
Motivo in questo caso che compiendo il suo RNA e che interagisce con un recettore specifico della cellula attraverso quale penetra nella cellula stessa come si vede nella prossima diapositiva
Penetra nella cellula libera il suo contenuto gli acidi nucleici e attraverso la trascrittasi inversa come accennavamo prima materiale
Viene inserito nel DNA della cellula quale a tutte le caratteristiche i geni necessari per produrre ulteriori particelle virali che vengono poi vedete escono dalla cellula normale hanno plastica dunque essa sia
E sono pronto a infettare altre celle a questo il ciclo normale dovettero virus la prossima diapositiva di porvi in mi fa vedere come questo ciclo retrovirus è stato utilizzato per produrre un vettore infatti si sostituisce parte del materiale genetico del retrovirus col virus l'interesse che viene inserito questo punto attraverso la particella virale si riporta all'interno di una cellula che è stata modificata questo nel cielo in Rete pacca Jim
Sono indispensabile per la creazione del vettore perché è consentono la produzione attraverso la presenza di geni
è un per la produzione di particelle che contengono riunione qui che escono dalla cellula pacati un contenuto nel virus il tiene d'interesse
Ma non sono più in grado una volta entrate nella cellula bersaglio di far fabbricare nuove particelle virali quindi qui si esaurisce
Diciamo il propenda per un processo che a noi interessa e questa cellula ce ne sono sempre una cellula tumorale
Ricevo il gene di interesse che si inserisce nel suo genoma queste celle poi possono essere selezionate soprattutto in vitro se oltre la genuinità adesso che si trasporta anche un gene ad esempio che codifica per una proteina
Che rende la cella resiste intorno all'antibiotico qualsiasi farmaco in modo tale che in vitro io posso selezionare le cellule che hanno ricevuto igiene che mi interessa trasferire il retrovirus sono stati ampiamente usate una terapia genica e hanno una caratteristica importante è quella di trasferire il gene soltanto in cellule che si replicano
Non sono in grado di portare il gene all'interno di ciò che non si replicano
All'inizio si pensava che questo fosse un notevole vantaggio soprattutto per la terapia dei tumori che sono costituiti da cellule proliferanti
Tuttavia a ben guardare ogni tumore anche senza una frazione di cellule non proliferanti e quindi non ricevono il Gene se se utilizzare i retrovirus soprattutto negli studi in vivo
Nella prossima diapositiva dimostra un altro lettore virale citate di un adenovirus anche in questo caso là dove lo scudiero DNA come sapete
A strutture che gli consentono di interagire con loro recettori specifici della cellula
Vedete queste fibre intorno
Hanno la particolarità di interagire con un po'converrà eccetera specifico di tutte le cellule e inoltre ladro che in USA anche altre strutture capaci di interagire con un altro e diverso recettori quindi è un virus
Che molto attivo nel entrare nelle cellule il vinile ogni tessuto e quindi nel caso si sia trasformato in un vettore con procedura analoga con l'avevo fatto vedere prima del retrovirus
Capace di portare germi d'interesse all'interno delle cellule
Al vantaggio quindi di non limitarsi a sé la serie dei geni all'interno di celle proliferanti dal vantaggio di non integrarsi nel nel genoma dalla cella ricevente e quindi di non provocare
Danni tipo quelli che vediamo nella prossima diapositiva quanti
E che vengono qui elencati qui vedete un elenco di vettori virali ulteriore ai retrovirus ed un ovvero su molti altri vero sono stati utilizzati qui c'è un esempio ma ce ne sono tanti altri
E dicevo prima il rischio di l'utilizzo di questi virus sono vivo su molti sono virus oncogeni comica retrovirus anche se ne sta occupando nell'uomo in questo caso e quindi la preoccupazione enorme
Dell'utilizzo di questi vero soprattutto quando si sperimenta nell'uomo quindi ogni protocollo che vuole affrontare questo problema deve garantire contesti sicurezza che questi virus questi vettori non siano in grado di provocare danni e il rischio di retrovirus e che si inserisca nel producono una muta genere quindi questo rischio prestato coccolato essere molto basso sono pochissimi esempi nuovo nessun esempio per fortuna oppure può ricombinare assi con sequenze virali dell'ospite e produrre la particella che riacquista la competenza ad infettare e questo potrebbe essere un problema serio questo è accaduto almeno in Uganda studio basta sì importante pubblicato diversi anni fa nelle scimmie
Generando dei linfomi dei tumori maligni il sistema linfatico Nencini che ricevevano questo vettore
Gli adenovirus può anche noi ricombinare sì e riformare particelle infettanti ma nell'uomo per rottura vadano virus un virus che causa delle semplici
Infiammazione diciamo dell'albero respiratorio anche se e questa possibilità è sconosciuta dell'uomo perché non è stata dimostrata mentre invece quello che è stato dimostrato ripetutamente
è la reazione
Forte immunologica infiammatoria nei confronti del virus quando questo venga utilizzato come vettore nell'uomo e questo è un elemento importante di cui bisogna tener conto agli studi clinici
Sono poi gli altri neri scheletri qui vaccini a virus che possono dare altri problemi in questi rischi vanno tenuti presente dicevo per qualsiasi tipo di studio clinico
Avanti vediamo adesso quell'insuccesso della terapia genica in questi dieci anni circa di attività
Parliamo quindi Dellera regge no mica perché terapia genica attivo
Credo che continuerà a essere una importante al di ricerca sia pre clinica che clinica ma i dati che vi faccio vedere su tutti i dati ottenuti dai partire dagli a dei primi anni novanta fino ad oggi
Elegante la quantità di protocolli clinici che sono stati attivati in questi sette otto anni
Di lavoro molti quattrocentodiciotto euro sono pochi notate anche che la maggior parte oltre sessanta per cento San protocolli clinici destinati a curare o a tentare di curare la malattia neoplastica
Ma se poi guardate numero pazienti coinvolti tre mila rendete conto che ogni protocollo aveva una media inferiore al dieci pazienti quindi si tratta i protocolli pilota di protocolli fase uno
I protocolli quindi che non sono mai riusciti ad andare a
Testare i se una particolare tipo di terapia genica fosse veramente efficaci in confronto ad altri terapie
Testa che si fa quando si esce arrivare alla Fase tre in cui si confrontano larghi gruppi di pazienti con un trattamento verso un altro tipo di trattamento quindi tanti tanti studi piccoli e questo già in subito indicazione di una notevoli difficoltà nell'ottenere risultati
Vedete qui infonde oggi tutto questo dato cioè che tra i vari approcci terapia genica adesso vediamo dove è più frequente è quello che utilizza i geni delle citochine
Per trasferirli all'interno di cellule e vale a dire las la preparazione di vaccini che contengono geni di citochine vaccini cellulare di cui vedremo degli esempi
Avanti quindi dicevo che varie tipi di approcci terapeutici sono qui elencati il primo è quello dell'agire presto io cioè la sostituzione di un gene mancante all'interno della cellula neoplastica
Mancante perché è stato detto perché è mutato quindi ha la sua funzione non è più in grado di svolgerla
E i geni più in studiati da questo punto di vista sono la p cinquantatré che come sapete un gene di grande importanza nelle Colacicco cellulare è stato definito il guardiano del ciclo cellulare
Altri geni che sono stati studiati sono e Ras e P sedici ma direi molto meno in clinica moltissimo a meno che non il p cinquantatré
L'altro approccio è quello del corretto cenni suicida vale a dire si introduce in una cellula
Di mammifero geni che provengono o da virus come genera timidina chinasi o da batteri e ciò conferisce alla cellula
La capacità di trasformare un po'a farmaco in farmaco il profano a quella sostanza
Che non ha attività cito tossica
Quando questa arriva all'interno della cella che all'enzima capace di trasformare questa sostanza non ci tossica in una sostanza tossica si verifica quello che è stato definito con un po'di fantasia il suicidio della cellula tumorale
Ci sono diverse combinazioni che vedete quelle in capi di geni capaci di trasformare una c'è una farlo profarmaco in un farmaco fino al punto terzo l'approccio della induzione di resistenza ai farmaci nelle cellule
Staminali del sistema emopoietico
E questo consente di poter somministrare una dose maggiore di farmaci antitumorali che sapete sono tossici
Perché il sistema emopoietico viene trasformata in un sistema resistente ai farmaci grazie all'introduzione di un genio della Resistenza che vedete qui elencato
Molti tra triste oggi
Vediamo però l'approccio immunologico a cui accennavo prima che l'approccio sostanzialmente vaccinale
Sì ottengono vaccini di cui parleremo fra un momento
Che doveva essere più immunologia dei più capaci di stimolare il sistema unitario del del paziente attraverso trasferimento di geni che codificano per citochinine Opel molecole costi moratoria nei confronti dei linfociti
Infine ultimo punto o di cui parlerò alla fine con una serie positiva
E che
Vende nel così giustizia un nuovo approccio al nuovo approccio che riguarda la capacità
Di
Il virus di essere selettivamente cito tossine confronti di cellule tumorali qui più che di terapia genica dove si dovrebbe parlare di Vieri tira Pia virale e vedremo poi perché
Però adesso alcuni esempi pratici di questi approcci clinici avanti rimpiazzo genico e questo è uno studio abbastanza recente del novantanove in condotto in tumori del polmone nell'uomo
Ventotto pazienti sono stati in oculati come un adenovirus Vettorello ovvero spie porta un gene normale poi in cinquantatré in tumori del polmone che sono privi di questo genere quindi è stato visto non gli animali e studi anche in vitro che riportando all'interno del tumore il genio normale p cinquantatré questo tumore subisce il fenomeno cosiddetto di appalto ausili per cui le cellule muoiono e il tumore regredisce si è cercato di fare lo stesso
Nel mondo e vedete qui lo sperimento consisteva nell'inaugurare attraverso un bronco scoppio il vettore adora virale che porta il gene p cinquantatré all'interno della lesione neoplastica
Il primo punto la quale di capire se si riusciva a fare questo è il almeno in dodici casi su ventisei c'è riuscito a dimostrare che i geni era entrato
Nelle cellule del tumore dove lo si voleva fare entrare tuttavia la risposta clinica misurata in termini di risposta parziale che vuol dire almeno cinquanta per cento di regressione dalla massa tumorale
Era stata vista soltanto in due casi su quelli che soprattutto in oculare in sedici casi stato una stabilizzazione dalla malattia vuol dire qui almeno otto settimane nessuna variazione
Cioè nessuna aumento
Del volume del tumore oggi risultato tutto sommato non eccitante dal punto di vista clinico ma un risultato che dimostra che il genio si può trasferire in una buona frequenti con buona frequenza e qualche regressione scippo
Scusate ho temere
Lo stesso lavoro è stato fatto avanti in un altro studio in cui si è confrontato la chemioterapia pazienti ancora con carcinoma del polmone
Rispetto alla chemioterapia più la terapia genica ed ente che la differenza non è significativa
E anche in questo caso circa cinquanta per cento di risposte cliniche entrambi i gruppi di malati trattati e quindi non c'è l'impressione che la terapia genica faccio una notevole differenza in questo caso la ragione e ve la dico subito anticipando quello che lei punti cruciali della terapia genica è che soltanto una parte dei tumori come abbiamo visto riceve in maniera appropriata al gene ma soprattutto che soltanto una parte delle cellule del singolo tumore ricevano il gene
E quindi basta che ci sia il dieci cinque anche l'un per cento dicevo tumorali che non ricevano il gene perché questo è il primo però ricomincino crescere questo è un punto cruciale
E non limite il poderoso altro cioè sulla terapia genica nel tumore
Avanti vediamo adesso un altro approccio più coinvolto lei gene suicida
Igiene della timidina chinasi del virus herpes arrestato introdotto vedete all'interno di questi tumori nella norma che un tumore maligno della cute ed io Gaston ma che un tumore maligno
Cerebrale vedete il numero dei pazienti trattati in questi studi vedete la risposta clinica nel melanoma zero anche se c'erano solo otto casi mentre in uno di questi studi ci sono voluti due risposte complete che significa sparizione totale ad un errore eterea risposte parziali un risultato di grande interesse anche se fosse viziato
Dalla selezione dei pazienti cioè dall'utilizzo di pazienti con tumori veramente molto piccolo
Altri studi pubblicati in questi ultimi due anni purtroppo non hanno confermato in questo è un risultato di grande interesse
Si sono aggiunti alle delusioni finora patite diciamo da coloro che hanno utilizzato questo approccio nei tumori del del cervello vediamo l'altra faccia ancora avanti
Che è quello del trasferimento di geni della resistenza ai farmaci nelle cellule il precursore né politici qui bisogna distinguere uno studio fatto quello sotto qualche anno fa
Studio negativo è stata trasferita al genio del molti Bracco esistente
Quindi precursori mo'cui etici di malati con cancro alla mammella che avevano subito un trattamento chemioterapico e non c'è stato nessun effetto significativo tuttavia proprio lo scorso anno è stato applicato un lavoro importante perché lo stesso approccio in pazienti con il turnover veloce allo geniale a abbia fatto registrare otto casi supera l'undici di pazienti che in cui i serie di certi c'è lista una significativa risposta clinica
E la differenza in questi pazienti che ricevono un trattamento chemioterapico o ricevono un autotrapianto di midollo poi ancora utile mettere un trattamento chemioterapico è un secondo trapianto di midollo autonomo cioè non lo stesso in cui
è stata fatta la modificazione genica
In questi pazienti dicevo insuccesso pari sia stato determinato dalla possibilità di trasferire con grande efficienza il gene di interesse nelle cellule staminali oltre il venticinque per cento di cellule
è una politica staminali ricevevano il genere e quindi anche a distanza di parecchi mesi in circolo esistevano cellule che esprimevano Gene
E quindi conferivano resistenza
A tutto il sistema emopoietico del paziente rispetto alla grande quantità di farmaci che il paziente riceveva quindi questo è certamente un uno studio più segna con successo di questo tipo di approccio di terapia genica dei tumori
Avanti
Vediamo adesso a quello che l'approccio immunologico di vaccinazione di cui ci siamo più occupati nel nostro istituto approccio il seguente si preleva dal paziente o da cellule in vitro
E cellule tumorali questo è certo Mario messo in coltura vi si trasferisce il gene d'interesse questa freccia va in senso contrario
E le c'è una vengono espanse e studiate da vari punti di vista soprattutto dal punto di vista della presenza di antigeni
Perché è vero che noi trasferiamo ingenue di citochine per aumentare la immondo igienicità la capacità del del vaccino stimola il sistema immune ma il prerequisito fondamentale che queste cellule tumorali esprimano degli antigeni naturalmente
Le cellule vengono espresse invariate
Perché non possiamo da curare Charlot non irradiata nei pazienti e somministrate al paziente come vaccino magari insieme ad altre citochine adiuvanti immunologici
Quello che è stata fatta davanti in questi anni di molti studi da cui in questo approccio vedete qui riassunto lo Stato utilizzati diversi tipi di elettori di orari non virali in morte di grosse citochine
Ma il maggior numero di citochine stato trasferito usando dottor retrovirale vedete qui risultati quali sono stati i duelli riassunto prima lo fa vedere a quale meccanismo generale avanti di questo approccio che schematizzato qua
Sino a cura il vaccino che consiste di cellule tumorali vedete quindi al due le quali e liberano
Le citochine uno a citochine
La quale ha la proprietà di attirare nel luogo di no cura il sito di no a cura del vaccino
Attira delle c'è lungo un il cui sono dei granulociti o delle cellule T o dalle cellule è un ok a seconda del tipo di citochina che viene rilasciata
Oppure in altri casi può fare esprimere allacciato tumorale biomolecole con stimolatore come di sette uno che ha la proprietà di attirare anche le cellule NK
Oppure ancora di far esprimere una molecola si chiama CD quaranta lycan a quale attira direttamente le cellule dendritiche nella sede del tumore perché le cellule dendritiche sono lo step intermedio cruciale
Affinché possa avvenire la stimolazione dei linfociti e infatti tutte queste manovre determinò la distruzione almeno parziale delle cellule del tumore che abbiamo somministrato come vaccino la liberazione di antigene che vengono prelevati dalle cellule dendritiche portati nel linfonodo dove vengono presentati i linfociti che si attivano Rossi immunizzare diciamo così e circa l'organismo fino a bersagliare la lesione neoplastica cattolici in un organo distante basta è diciamo un meccanismo provata da molti studi negli animali che dovrebbe funzionare anche nell'uomo ma vediamo che non ha molto funzionato in un momento avanti questo agli studi che abbiamo fatto in istituto
Gli scopi dello studio clinico valutare la tossicità di lunedì no Kuni molto più di questi vaccini costituiti
Facevano di melanoma in questo caso che era state trasposte col Genoa dentro Lucchina quattro ma abbiamo fatto studi anche con gli alle due gli studi con dei sette uno stabilire la potenziale attività antitumorali questo vaccino e allora giù analizzare induzione un aumento della risposta immune perché questo cerchiamo quando utilizziamo il vaccino prima di tutto di stabilire che il vaccino inducono ad un'altra risposta immunologica che non sempre e questo accade anche in molti altri studi vaccinazione si associa purtroppo una risposta clinica
Avanti cos'è accaduto in questo caso tossicità praticamente nessuna vedete qui una paziente che rifiuta il vaccino c'è un'area di eritema che trasmette non dà grandi problemi sul mondo il prurito
Qualche volta poche linee di febbre e il punto diciamo importante che questo tipo di vaccinazione certamente non sono tossiche per il paziente avanti la risposta
Clinica la vedete qui due studi convoca cinque diversi di melanoma che liberava interleuchina due oppure quattro
Dodici undici pazienti la risposta clinica modesta risposta mista significa che alcune lesioni sono regredite altre lesioni non sono cambiate affatto e quindi da questo punto di vista il beneficio del paziente rimane assai modesto
Avanti vediamo cosa è successo a punto vista immunologico dal punto di vista immunologico alcuni pazienti circa il venti trenta per cento manifestano una reazione specifica nei confronti del vaccino
E quindi mostrata con un testo immunologico invito vedete linfociti del paziente prelevati prima e dopo la vaccinazione stimolati con l cielo di melanoma periodi c'è una forte liberazione interferone gamma è questo un teschio rivela che linfocita ha riconosciuto l'antigene sul tumore
E questa reazione non viene bloccata da anticorpi anti classico-romantico al pianti classe due HLA
Indicando che si tratta di un riconoscimento ristretto dal sistema HLA due quindi questi linfociti sono probabilmente dei linfociti T nel per ma questo è secondario il punto fondamentale che in alcuni pazienti si si vede i cassetti
Una stimolazione specifica da parte del bacino avanti
Come è successo in questi studi sono stati condotti non solo da noi ma insomma intanto tornando negli ultimi cinque sei anni questo riassunto anche se parziale degli studi del melanoma vedete centosettantasette pazienti vaccinati con cellule che liberavano diversi tipi di citochine risultato assai modesto
Trema aggressioni complete vuol dire totale scomparsa del tumore Mattarella sul centosettantasette sei negazioni parziali in complesso circa sette otto dieci per cento di risposte
Certamente un dato che non ha entusiasmato nessuno
La Regione quale ce ne sono molte andiamo avanti per ogni semplicemente concludere su questi studi e che di vaccinazione che dicevo prima hanno dato una bassa frequenza do risposta sia immunologica che clinica
E tuttavia le nuove conoscenze che mentre si facevano questi studi clinici arrivavano dai lavoratori consentono di riprogrammare questi tipi di studi e forse di ottenere un miglioramento
Di quanto abbiamo visto visto fino adesso avanti e questo è un tipo di indicazione che un riassunto in questa diapositiva come il loro migliorare questi vaccini costituiti da cellule tumorali modificate con geni di rilievo immunologico
Un anno di aumentarle nuvole di differenti antigeni che sono espressi dalla cellula
Oggi conosciamo quasi cento diversi antigeni molecolare mente definiti soltanto nel melanoma quindi è possibile prendere i geni di questi antigeni inserirli nelle celle melanoma e farle spende per esprimere una grande quantità e una grande varietà
E questo dovrebbe migliorare in maniera sostanziale la risposta al paziente inserire geni anche di due o più citochine che oggi sappiamo hanno funzioni diverse
Manipolare ulteriormente le cellule in modo da conferire loro una capacità di presentazione dell'antigene che è una carestia caratteristica peculiare di altri cellule normali come le cellule dendritiche
Quindi con queste manipolazione è possibile che riusciamo a migliorare la risposta clinica attraverso dei pazienti vaccinati con
Le cellule geneticamente modificati
Avanti vediamo adesso quello che l'ultimo approccio di terapia genica lo vedete qui elencato state dell'utilizzo di virus che hanno acquisito attraverso una manipolazione genica la proprietà selettiva di distruggere le cellule tumorale risparmiando le cellule normali
Se vuole tempo ironico perché questo approccio sta avendo successo è un po'ironico che la terapia genica tra virgolette cominci ad avere successo quando non si trasferisce nessun gene
Si possono anche trasferire dei geni ma il
La gente che in questo momento è un po'sulla cresta dell'onda ha dato dei risultati positivi che vediamo si chiama Onix zero quindici ed è un adenovirus manipolato in modo tale che la rimozione di un suo gene consente nelle cellule tumorali che hanno perso il p cinquantatré di replicarsi selettivamente ed distrugge dalla cellula
Tra me e questa è la condizione occorre la cellula tumorale che non ha più la p cinquantatré almeno sembrava la condizione fondamentale quando i primi studi sono usciti in realtà pare che questa selettività non dipenda soltanto dalla mancanza di p cinquantatré e quindi posso essere più estesa magari anche a tumori che la p cinquantatré ce l'hanno ancora ma comunque ci sono studi clinici presso nessuna remora uno che indicano come il questo agente da solo non c'è in grado di determinare regressioni significativa quando somministrato
Insieme chemioterapici soprattutto nei tumori della testa del collo
Che sono un tumore un che una volta resiste superata la Chirurgia diventano veramente resistenti a ogni terapia questi tumori adatto dei risultati piuttosto importanti e questa nuova impostazione di manipolare il via i virus che venivano usati come lettore per renderli tumore specifiche citotossici
Sta espandendosi in un lungo elenco di questi virus qui ci sono altri esempi questa importante perché ha più o meno lo stesso virus in cui e spero sì è inserito anche un gene da trasportare vedete genere timidina chinati
Quindi il virus entra nella cellula tumorale avendo le proprietà di Onix e teme una distruzione della cellula tumorale ma in aggiunta a questo ci si somministra la profarmaco però anche determinano regressione attraverso il suicidio delle cellule sopra diventi ce ne sono altri qui vedete virus professore uno che è un vero scontro attivismo neuronale e ce n'è una variante che proliferare soltanto nelle cellule tumorali e le distrugge e infine l'altra possibilità è quello di manipolare vero sulla introducendo
Un promotore che si mette in azione soltanto a livello di certi tessuti in questo caso c'è un promotore della caratteristico dalle celle prostatiti che attiva il il generi un nomade l'adenovirus trasformando questo virus vivo citotossico è una nuova linea di ricerca dicevo prima avanti credo sia l'ultima diapositiva che atto ottenuto dei successi e qui vedete i successi della terapia genica lascio perdere malattie non oncologiche ma che pure sono molto importanti come a dire questa immunodeficienza
Severa come l'emofilia come la genesi ecco dei tumori la testa e collo che la terapia più il dirlo son coliti colon l'Onix
è stato pubblicato lavoro l'anno scorso con regressioni di oltre il sessanta per cento dei casi regressioni anche complete in pazienti per i quali non c'era alcuna terapia valida perché la chemioterapia da sola
Determinava una riduzione ma regressione di circa il trenta o meno del centro in questi pazienti quindi questa combinazione sembra funzionare infine l'ho già citato prima l'esperimento dei tumori delle cellule germinali chemioterapia in pazienti in cui è stato trasferito genio la resistenza ai farmaci nel all'interno delle loro cellule precursori e modelli etici quindi conclusione possiamo dire che la terapia genica avuto un'esperienza difficile è stata segnata da molti fallimenti da qualche insuccesso proprio non è tuttavia una bocciò che possono essere dimenticato va rivitalizzato soprattutto le moltissime informazioni le novità chiedendo la ricerca genomica ad altri tipi di ricerche ed ora ci facciano convinti del fatto che questo approccio terapeutico debba continuare se ho studiato applicato sia nei tumori siano altre malattie grazie
Grazie al professor Giorgio Parmiani prima di quindi discussione
Abbiamo siccome c'è stato il siamo stati informati che purtroppo l'ultimo relatore professor Vescovi non potrà raggiungerci in quanto si sono verificati i problemi
Alla stazione di Milano che hanno bloccato la partenza dei treni abbiamo pensato Lucio Del Monte Cucco di interrompere dopo la discussione del relazione Parmiani di avere il coffee break e poi procedere con le ultime due relazioni
La discussione sul Parmiani è aperta
Ci sono domande
Ma nel eccetera qual è la possibilità di utilizzare una ICI hanno terapia genica immunologica in moneta diciamo preventivo già è un tumore curata o tarato rischio di recidive o quando le agenzie non proprio quel tipo ma in prevenzione rischia c'è acqua casa in corso
Vedi di plichi di di pratico di già in alto non c'è niente però un'idea importante perché tutti sappiamo che le manovre immunologica dei in questo caso sono più efficienti quanto più piccolo il tumore e quindi ci sono così patologie penso al melanoma incerti passaggi dalla visione del primario igiene metastatiche ci sono lesioni premio plastiche del
Del
Cosa onorevole prima fase del polmone che si presterebbero
A interventi immunologici la carenza maggio all'informazione sugli antigeni che sono espressi la queste lesioni premio plastiche ci sono ma ancora non abbiamo identificate brumista molecolare
Quindi diventa difficile organizzare un vaccino in questo momento ma sicuramente a cosa si potrà fare il prossimo futuro
E difatti vuol proseguire su questa Giorgio pronto nella prostata su almeno due antiche sono molto ben caratterizzati
E quindi uno potrebbe in effetti pensare a un'immunizzazione che so io doppi cinquanta
Nel a scopo preventivo nei confronti di questo tipo di tumore diventa
Non ha questa più che ragionevole il però le vaccinazioni finora
Che sono state fatte non sono state fatte un buon numero sono ancora in corso diversi studi nella cacciava la prostata hanno dato risultati un po'controversi alcuni casi ci hanno degli effetti clinici abbastanza importanti in termini di riduzione del PSI circolante diessina circolante ma non dalla massa neoplastica quel se
Conclusioni sono un po'contestate tuttavia sono condizioni che probabilmente in presenza di ulteriori risultati sulla lesione già manifesta potrebbero consentire di tornare indietro e impazienti che aveva caratteristiche marcatori di rischio di sviluppato ma la postura da vaccinazione potrebbe essere approvato in effetti dovrebbe essere la citazione con molti componenti in un cucciolo ad aiutarci son Jarman almeno quattro cinque numero diciotto entro dicono una sola volta certo certo
Su altre domande
Avevo un paio di domande o richieste di chiarimenti la prima ho la sensazione che i i dosaggi utilizzati nella nelle nei trattamenti genici siano abbastanza empirici
Dieci al dieci dieci alle undici particelle virali che mi sembrano già abbastanza elevate
Si sa qualche cosa può fare commenti ulteriori su il tuo saggio utilizzato la trattare questi pazienti se c'è un razionale oppure sera il limite massimo di fattibilità dito sarà e poi l'altra domanda che avevo era quella che accennava a cui accennava Cesare
Voi siete stati formidabili né tumori all'Istituto dei tumori di fondare questa atti terapia associando
Fari farmaci né vaccini c'è sempre di più
La tendenza ad associare più antigeni mi riferisco ai vaccini antinfettivi
Cosa si sta facendo in terapia genica di associare più antigeni espressi o più approcci contemporaneamente
Qui c'è una sola domanda tutte e due le cose cioè più antigeni possibili per evitare quello che noto confermano di perdita di antigene la progressione del tumore quindi piantine riusciamo a dare maggiore probabilità di potere
Dirigere il sistema in maniera efficace contro le cellule tumorali e naturalmente anche approcci diversi si combinano ad esempio fatto vedere forse troppo fuggevolmente l'approccio di decimi suicida
Si può combinarsi con la pace non oggi Panzeri due cose interagiscono non ho avuto tempo tonalità darmi dettagli ma ci sono dei di di Baj standing che quella terra su cui si rilascia nello farmacologia metabolizzato nei tessuti circostanti mentre in una distruzione dicendo che a loro volta libro antigeni innescano fenomeni unitario quindi si può combinare certamente nel topo ed è stato fatto questi due approcci per quanto riguarda prima domanda la domanda importante finora il il criterio per la scienza della base è quella della tossicità o per lo meno della
Non
Non detector abilità del vino rosso lei gli altri organi o nei liquidi biologici a seconda del tipo direttora naturalmente questo è quello che ha governato finora le dose che sono però tuttavia empiriche si pensa che più se ne mette meglio è
Dipende dal genetista specie ma certamente siamo a livelli ancora abbastanza lontani dalle sofisticazione della farmacocinetica dei farmaci o di altri agenti terapeutici
Questa mattina è stato ricordato che lo sviluppo di un farmaco di sintesi oppure anche la Pontina ricombinante richiede circa dieci anni è un mille miliardi di investimento
Rispetto a queste cifre crepuscoli son le prospettive di sviluppo pratico della terapia genica
Sprechiamo costi minori oppure maggiori o uguali
Trattative non sono entusiasmanti ma questa domanda rivolta le compagnie
Non a noi
Certamente i costi saranno non inferiori io penso superiori perché i costi di questi studi clinici anche con un meritato i pazienti sono piuttosto consistenti superiori ai costi che vengono affrontati per la valutazione qualsiasi altro farmaco non biologico ecco
Quindi cioè abbiamo un serio problema di
Finanziamenti abbiamo un serio problema regolatorio nella attivare questo tipo di studi
Questo certamente
Se non ci sono altre tombe deve allora
Facciamo un break subito e ci ritroviamo Commenda orario previsto alle quattro e mezza precise in quest'aula grazie ai relatori
Perfetto in perfetto orario
E la prossima relazione sarà tenuta danno al professor Luigi Naldini
Io conosco prosegue Antonini da tanti anni molti chili fa Terme e qualche capello in più bianco in e in meno anche per lui
Quando era un giocatore e promettente ricercatore nel gruppo sul convoglio
Pace Maldini
Viene dall'Università di Torino dove si è laureato in medicina
Ha poi svolto una lunga e fruttuosa oltre che importante esperienza negli Stati Uniti prima
Nella costa Est dove ha lavorato con sorge la Sisley Singer su problemi dissi nelle in crea recettori
Si è poi spostato dall'altra parte della costa americana
E dove ha cominciato ad occuparsi di problemi di terapia genica nel gruppone sofferma
Il poeta ormai parecchi anni se non so se non se le notizie non sono procurate sia ritrasferito all'Università di Torino
Dunque adesso ne parlo solo di Istologia
E direttore del laboratorio di terapia genica nel l'istituto di ricerca sui tumori di Candiolo
Lo ringraziamo due volte per la sua partecipazione non solo per aver accettato l'invito ma anche per aver superato due notevoli difficoltà
Ferroviarie che si sono opposte al suo arrivo grazie
Grazie Julio
Effettivamente a parte il viaggio in treno relativamente più lungo del previsto
Sono arrivato poi senza così grosse difficoltà quindi non non è il caso di esagerare con ringraziamento
Io credo che vi riportava un pochino in laboratorio rispetto alla alle relazioni precedenti e anche perché la terapia genica che ha cominciato a mietere qualche successo in clinica
Pure si è scontrata però con grosse difficoltà come evidenziato dalla dalla relazione precedente in particolare nel caso della terapia genica dei tumori
Ebbene quando è difficile decidere quale strategia terapeutica utilizzare le cose sono ancora più complicate ma anche nel caso di malattie genetiche dove sappiamo esattamente quale gene vogliamo veicolare nelle cellule
Bersaglio dobbiamo ancora superare grossi scogli per far sì che la terapia genica diventi un'efficace arma terapeutica
E lo scoglio principale di qui vorrei discutere oggi e lo strumento base che il veicolo per introdurre efficientemente i vettori
Ai geni terapeutici nell'organismo malato
E tra queste
Difficoltà da superare per rendere questo approccio efficace io qui elencate alcune che a mio parere sono rilevanti in particolare la possibilità di fare esprimerà in modo indefinito e stabile il gene terapeutico nell'organismo
La possibilità di regolarne l'espressione ovvero di poterlo indurre ma anche spegnere che quindici permetterebbe una molto maggiore flessibilità nel tipo di geni che vogliamo introdurre funzionando non soltanto la garanzia di sicurezza ma anche come possibilità di aggiustare la dose del dell'attività terapeutica nella condizione specifica
La possibilità di restringere l'espressione del gene terapeutico in particolare i tipi cellulari e in particolare i tessuti che altrettanto ci permetterebbe la molto maggiore
Libertà di azione
E in infine e di questo parlerò però non parlerò oggi
La possibilità di ampliare l'efficacia terapeutica di una somministrazione genica localizzata e la possibilità di evitare in qualche modo il riconoscimento da parte del sistema immunitario del nostro Gene
Del prodotto del genere terapeutico
Per affrontare questi queste sfide che oggi abbiamo opportuno migliorare l'armamentario strumentale di vettori che abbiamo la somministrazione di geni
Vi sono molte nuove generazione direttore che si stanno testando in laboratorio è in alcuni casi in clinica e oggi io vi parlerò di una soltanto di queste che può permettere di affrontare alcune di quelle sfide senza naturalmente pretendere che nelle isole risolva tutte
Ma che crediamo che possa in effetti per avere un certo una certa probabilità di successo su alcune di queste i lettori lenti violare di cui voglio parlare
Nascono nella famiglia più generale dei vettori retrovirale vettori cioè basati sui retrovirus
Perché questi virus integrano il loro genoma nella cellula bersaglio e quindi perfezione o no lo scopo della terapia genica che quella di di introdurre una modificazione stabile
Nella cellula bersaglio non solo stabile in quella cella ma anche trasmissibile alla sua progenie
Non solo ma l'esperienza ormai ventennale con vettori onco retrovirale dire quelli derivati dal vivo della leucemia murina ci ha insegnato di questi vettori sono relativamente sicuri non trasferiscono geni virali col disegno standard perché stavo discussioni in precedenza e quindi sostanzialmente permettono di trasferire il gene soltanto senza innescare risposte per esempio in una logica tossiche dipendenti dalla presenza di altri geni virali come invece succede nel caso per esempio di vettore dei nuovi rivali di generazione di prima o seconda generazione il problema però di fondo di questi vettori o ancora trovi orali e il limite biologico del dipendente dal fatto che soltanto una cellula che entri in mitosi
Nell'intervallo di qualche ora dall'infezione con un retrovirus e suscettibile all'infezione una volta che il virus in o il vettore nel nostro caso introduce
Alla
Al a questo così complesso di Pola integrazione e soltanto sulla membrana curare si frammenta come quando una cellula entra in mitosi
Il retrovirus riesce a raggiungere questo DNA e quindi a completare la sua infezione o il nostro vettore a completare la sua traduzione
Questo mai mette in media immediatamente fuori campo dalle nostre applicazioni un grande numero di tessuti interessante per la terapia genica pensate al tessuto nervoso pensate al muscolo
Ma anche cellule che possiamo prelevare dall'organismo come cellule staminali emopoietiche che preferiscono essere qui uscenti e che se stimolate a proliferare in modo forzato spesso perdono le loro proprietà quindi l'interesse del nostro lavoro era proprio nato dalla ricerca di un sistema che potesse superare questo scoglio questa dipendenza dalla mitosi
Dell'infezione da parte del retrovirus ma mantenere i vantaggi del vettore retrovirale l'integrazione la pulizia diciamo del trasferimento genico senza portarsi dietro altri geni
E per fare questo ci siamo rivolti a un gruppo di altri retrovirus più complessi che sono i lenti virus che hanno e volte ho voluto la capacità di infettare almeno un tipo di cellula che non si divide per il Macro Fago e fanno a questo perché parassita no i sistemi di trasporto nucleare attivo di una cellula e il loro complesso tipo a integrazione una volta introdotto nel citoplasma viene caricato da questo sistema di trasporto attivo e attraverso i pori nucleari raggiunge la cromatina
L'idea quindi è di arrivare a un vettore configurato come un vettore retrovirale ma dai lenti virus per permetterci un maggiore campo di applicazione terapeutica
L'approccio di costruzione del vettore quello tradizionale dal genoma del virus e qui noi abbiamo lavorato con HIV che il antivirus meglio noto
E il
E quello di segregare le Struth le sequenze che producono proteina virale quindi sostanzialmente i geni del virus
Segregata Lane costrutti dove questi geni vengano espressi a produrre le proteine ma private delle sedi dalle sequenze invece attive Inches che servono al caricamento del dell'RNA virale della particelle la sua trasferimento nella cellula bersaglio
I geni così isolati espressi in costrutti di espressione nomi di orario non correlati
Produttore poteri nella cella Bersani la ce lo conduttrice ma non vengono trasferiti nella cellula bersaglio le sequenze attiva Inches gliel'tirar del retro virosi il segnale di parcheggi vengono invece utilizzati
Per associarli a una cassetta di espressione per il gene terapeutico e questa struttura verrà invece trasferita nella cellula bersaglio
Vedete che il poiché non vi sono geni virali qui dentro si verifica un'infezione abortiva senza conseguenze per la cellula che noi chiamiamo trasduzione
L'approccio è stato quello di sviluppare un vettore ibrido non è un vettore HIV
In questo caso
è un vettore che di HIV che lenti virus di origine utilizza la frazione minima
Di geni necessari a far sì che il complesso di Pai integrazione venga trasportato nel nucleo cioè in pratica i geni gadget Apple giorni strutturale di HIV
Sono due su nove presenti nel virus che codificano questa particella
L'interno di questa particella virale o di vettore se volete
L'esterno rivestimento della particella è costruito con un'altra con le la proteina del in ballo più un altro virus spesso noi usiamo il virus della stomatite vescicolare ma qua potrebbe anche esserci lembo e l'otto del del retrovirus di Moroni o ecco troppo o così via
Questo ci permette di ampliare il troppi ISMU del vettore che infetta molte più cellule di quelli che infetta HIV originale lì che va limitata linfociti macrofagi
E infettare invece per esempio neuroni e cellule staminali emopoietiche tra l'altro questo fa sì che è anche impossibile che una qualunque ricombinazione nel sistemare i generi HIV il che naturalmente non ebbe
Messo fuori questione l'uso di questo vettore per impiego impieghi clinici
E questa come vedete e il carico genetico come vi ho indicato prima che viene viene portato sul vettore
Ma vorrei parola sulla Dio sicurezza di questo vettore di parlava più della sua efficienza e di quello si può fare ma il nostro lavoro operava in realtà un tre anni circa da dopo la dimostrazione iniziale della sua per il suo funzionamento è stato dedicato a migliorarne l'avvio sicurezza rendere questo vettore proponibile per impieghi clinici e l'approccio per questo è stato sostanzialmente un lavoro abbastanza lungo e tedioso in cui dall'iniziale
Genoma di HIV che vi dicevo contiene tutta una serie di geni strutturali regolatoria accessori abbiamo provveduto a eliminarne progressivamente U uno ai più
Fino ad arrivare a questa ultima versione
Ridottissima che noi chiediamo di terza generazione dimostrando che mantenevamo l'efficacia introduzione del vettore che la quello che a noi serviva
Tutti questi altri geni che comunque non verrebbero trasferiti nel
Nella cellula bersaglio ma che sono espresse nella cella produttrice tutti questi altri geni non servono a fare un vettore efficace
Servono in realtà al virus a fare un virus temibile patogeno quindi se il nostro vantaggio qui è stato di segregare non soltanto geni da sequenze ma di eliminare tutti i geni associati alla patogenesi del virus e quindi a tutt'oggi a fare un vettore venti virale ibrido che sostanzialmente viene prodotto con un con una quantità di informazioni simile a quello di un qualunque altro vettore non corretto virale un gene Guardian Genet Paul
è un gene & di un altro virus questo configura quindi una per una potenziale biosicurezza del sistema accettabile per l'uso
Il allo stesso modo sul fronte del vettore che viene trasferito qui della sequenza che va invece a è stato integrato nel genoma
Abbiamo anche qui lavorato per esempio a eliminare
Le sequenze del Piave quelle che permettono il trasferimento di genico ma anche un eventuale mobilitazione del vettore da parte di altri virus che possono lenti virus che possono infettare la cellula
Attraverso il processo dell'auto in attivazione questa struttura quest'altra il primo del tirate sta altre primo del vostro costrutto quando produce del vettore viene replicata
Nel Mennea il progetto di trascrizione inversa al cinque primo
Se voi la eliminate altre prima o durante la produzione del vettore nulla succede perché e il promotore al cinque primo che funziona
Ma dopo la duplicazione viene eliminato in entrambi i casi e quindi questo è il chiaro abortivo incapace di replica di trascrizione
In dove però a questo punto inserire un promotore di vostra scelta ma che è un promotore endogena un promotore ballabile o promotore che può essere punto specifico per qualche tessuto e non avete interferenze con le sequenze di orale quindi sistema sostanzialmente molto più pulito rispetto a quello che è un un un virus che si porta dietro tutte le sue sequenze regolatrici regolatrici
Ha così possono servire questi vettori sul primo acquisito anche espressione a lungo termine vi illustro tre casi cellule staminali emopoietiche umane
Cellule del fegato del dopo delibera Rizzi stemmi Ca'e cellule del cervello dopo somministrazione intraparenchimale del vettore
Le cellule staminali sono ovviamente il il bersaglio preferenziale per la terapia genica per applicazioni in campo malattie genetiche ma anche malattie acquisite come diamo seguito prima il problema di fondo che mentre i progenitori che si trovano in questa gerarchia
Che proliferano attivamente e sono ottimi bersagli per i vettori o ancora trovi rivali perché perché si dividono rapidamente queste per genitori non sono poca Paci di auto mantenimento e di ripopolamento di un individuo
Sono ormai indirizzati e hanno una breve vita di sono soltanto le cellule staminali che stanno a monte di questi progenitori che ci interessa tradurre in modo efficace ex vivo
Queste cellule non vengono facilmente misurate come attività se non con un saggio di ripopolamento di un ospite nel caso umano ovviamente un uomo e non è possibile fare un esperimento bisogna usare un saggio alternativo
Per fare questo esperimento chiama cominciata prenda prelevare cellule progenitori ma poi etici umanità sangue cordonale trattati in vittoria con il vettore lenticolare dimostra un'etica inefficienza per trasduttori trasduzione molto elevata virtualmente
Il novanta per cento di queste cellule può estratta la sbotto quindi genio marcatore fluorescente
Le cellule possono essere attestato in coltura liquido oppure dopo aver fatto cresceva delle colonie ma poi etiche questi sono progenitori che dicevo indirizzati non non ci dicono nulla
Sulla possibile possibilità di tradurre una cellula emopoietiche staminale chiari i popoli per fare questo nelle stesse condizioni che abbiamo ottimizzato
Bisogna prendere le cellule marcate fino a curarle in un topo Schede in un arco alpino ed efficiente capaci quindi riceve un trapianto di cellule umane che ha ricevuto impegnava di azione per eliminare pub del suo midollo emopoietico in queste condizioni le cellule emopoietiche umane possono attecchire
Per ripopolare l'animale con una emopoiesi umana sia pure non completa ma parziale si può poi prelevare a distanza di otto dodici settimane il midollo dell'animale verificato apparendo di cellule umane che amo dei marcatori specifici come ci di quarantacinque
O di colonie umani dopo saggi cono genici nel midollo e verificare se queste cellule Manta esprimono il transgene che vi ripeto Eggert epicentro transgene fuori scena
Questa popolazione cellule umane nel topo deriva da una cellula staminale capace di ripopolare no e non dai progenitori che vengono eliminati molto più rapidamente nel top il risultato dell'esperimento competono venti virale che dopo una minima manipolazione ex vivo delle cellule praticamente da dodici a ventiquattro ore
Con o senza addirittura stimolazione con citochine quindi in condizione di Piacenza o di stimolazione comunque molto rapporto Breve
Troviamo nelle un efficiente ripopolamento queste sono le cellule umane nel topo vedete che indica generalmente dal cinquanta per cento anche al settanta per cento a seconda delle condizioni quindi il midollo dei troppi dodici settimane dopo l'inoculo contiene in prevalenza cellule umane
E di questo c'è l'una una frazione che può arrivare anche al settantacinque per cento esprime il transgene quindi c'è stata una trasduzione efficiente un mantenimento a lungo termine dell'espressione del transgene
Di queste cellule umane ci di quarantacinque possiamo esaminare le varie sotto popolazioni progenitori
All'infuori di mieloma idi ritrovi dei in tutte queste qua popolazione si trova l'espressione del transgene nella stessa misura che nel totale la linea ritualità e si sviluppa poco in questo modello perché mancano mancano eritropoietina efficiente
Ma se prendiamo addirittura il midollo e lo seminiamo in coltura come genica troviamo colonie si assicuri mane
Che vengono selettivamente fatte crescere pari per i precari i fattori di crescita giunti che esprimono il transgene verdi fluorescenti e se poi verifichiamo la presenza del transgene
GRP per PCR sulle colonie
Tutte le colonie che sono fluorescenti al microscopio come atteso ma contengono il vettore
E tutte le cose che sono negative alla fluorescenza non contengono il vettore a indicare che non ci sono indicazioni di uno Schott offrì una silenziamento trascrizionale del vettore c'è quindi espressione a lungo termine in una cellule staminali emopoietiche ci manca ancora un aspetto importante per poter dire che staminale e che il signor dimostra il suo automantiene mento
Per fare questo occorre per prendere un tocco ripopolato con cellule umane tra sedotte effettuare un trapianto secondario dal midollo di questo topo in un secondo ospite questo trapianto è molto difficile inefficiente perché ovviamente
Sono le cellule umane che noi cerchiamo in letteratura riportato con successi parziali attenere in genere poche per cento di prostitute di cellule umane nel se nell'hospice secondaria
Ma se in queste se riusciamo a farlo come non lo standard e la letteratura ritroviamo che queste cellule continuano a esprimere in modo paragonabile il transgene vedete questa la popolazione del topo secondarie per esprimere quindi non solo la cellula staminale primi che abbiamo trasporto
All'inizio dell'esperimento ha dato regionale vari allineano proiettile nell'ospite primario massive mantenuta permettendo l'espressione di ripopolamento in un ospite secondario a indicare la sua natura gli affetti di progenitore capace di ripopolare
E di auto mantenersi
L'altro modello che cosa fa vedere quello di una somministrazione in vivo diretto del vettore in questo caso nella vena della coda di un topo e poi ad esaminare le cellule del fegato las pressione in questo caso efficiente
In cellule del fegato e mantenuta anche qui tre mesi dopo la somministrazione di ismi sono parecchi epatociti e parecchie cellule non parenchimali Kupfer probabilmente che esprimono il transgenico nascente non solo non c'è necessità di stimolo e di stimolare la replicazione di queste cellule perché avvenga la produzione
Sei topi son stati trattati con promo di ossimori Dina per marcare le cellule che proliferano
Il duodeno intravedete che c'è molta luce portato come qui si marca quelle pesantemente il fegato in realtà sono animali adulti ha un tasso di replicazione bassissimo non si marca mentre invece le cellule hanno avuto la trasduzione stabile ed efficiente
Si può dimostrare che il transgene è stato integrato fa parte della cromatina
Di questi del fegato dogmatica delle cellule estratte dal fegato di questi animali con vari approcci di di analisi di Santerno condanna PCR inversa
Su cui su cui sorvolo ma quello che è interessante se voi invece di mettere un gene marcatore usate in genere terapeutica potenzialmente come per una per un fattore Antimo Fineco umano il fattore nove
Potete voi misurare la cui espressione di questo fattore nel plasma dei troppi
E
Avete due dati il primo a te le la concentrazione di questo fattore raggiunge in questo caso l'uno due per cento dei valori normali in un uomo che sarebbe terapeutica in un elmo finnico se fossero giunta egualmente e quindi potenziale terapeutico
E potenziale di mantenimento a lungo termine per quella per la vita del topo circa quindi di nuovo espressione a lungo termine mantenuta stabilmente l'ultimo esempio di questo approccio e la delibera i la somministrazione intraparenchimale nel cervello in questo caso in varie aree sia un efficiente produzione qui per per esempio dall'ippocampo di neuroni
Che si marcano molto bene si mantengono anche qui per quello che sappiamo per la vita di questi animali quindi la di la possibilità di tradurre geni in assenza di stimolazione della cellula bersaglio in vivo o ex viva ci e accompagnata da una espressione a lungo termine stabile mantenuta del transgene
Cosa riguardo a questo punto la possibilità di regolare il transgene la sua espressione noi abbiamo inserito nel sistema vettore
Un sistema classico di regolazione dell'espressione genica da parte di una farmaco esogeno il sistema si basa su una un trans attivatore chimerico che utilizza una porzione d'un tratto attivatore batterico che risponde alle tetraciclina e che in presenza o in assenza di tetraciclina attiva la trascrizione da un promotore chimerico che in questo caso esprime i vostri geni marcatori
Abbiamo fatto tre combinazioni in cui il sistema che regola di espressione regolato avviene son viene somministrato da due vettore DiVersi oppure abbiamo fatto dei vettori in cui tutto questo sistema è montato in un vettore unica non non vi discutono gli aspetti tecnici di questa parte
Ma io mostrò risultati
Non solo si ottiene un'espressione ha regolato ed efficiente in cellule in vitro in questo caso quella corretta in blu e l'espressione indotta del vostro transgene luciferasi era quello era il primo il g ospiti era il secondo questa una cassetta DC Speroni Carlucci frase vi dice quanto espressione totale avete nella vostra popolazione
Questa mi dice qual è l'espressione all'interno di ciascuna cellula e quindi quante cellule sono state trova Sgotto vedete quasi tutta la popolazione Posatora sbotta
L'espressione indotte molto alta più alta ancora dell'espressione
Che dipendente da un da un promotore costruttiva commessi empi
E se voi aggiunge aggiungete la tetraciclina voi sopprime te questa espressione abbassandola di almeno due logaritmi
Rimane un'attività basale superiore però al controllo che dovuta al al all'attività basale del promotore
Non solo ma voi variando la dose di di di Dazzi ciclina potete anche mantenere l'espressione a un livello
Da voi scelto tra dei due ordini di grandezza dei violenti e di espressione che avete che ovviamente potete anche sotto spegnerla
E a sua volta riaccenda la con la giunta o la rimozione del farmaco
Questi esperimenti sono fatti invito la ma ci hanno convinto che il sistema funzionava bene
Perché tutte le cellule tra svolte senza bisogno di selezione esprimeva in modo regolato il transgene questa è una grossa differenza rispetto all'esperienza fino adesso avuta convettori o vetro virali tradizionali
In cui il sistema di regolazione trasferito in modo simile a quello che le ha fatto vedere funziona ma solo dopo che voi avete selezionato i cloni dove tutto ha funzionato ovvero l'integrazione è avvenuta in modo tale da mantenere un'espressione regolata
E comunque mantenere un'espressione dei vari componenti del sistema
Il Rettore antivirale riabbraccia permesso invece di trance dove anche ad alta efficienza tutta la popolazione senza dover andare a selezionare
I cloni efficienti questo cioè permette quindi di far fare un passo in avanti e usarlo direttamente in modelli in vivo o ex vivo come quelle che gli ho fatto vedere prima quindi questo caso trascura le cellule staminali emopoietiche che ricoprono il nostro troppo
Naturalmente sporgono il topo nell'acqua da bere alla presenza del farmaco voi vedete nella sangue periferico dell'animale espressione da luciferasi che può essere di nuove indotta repressa in questo caso non c'è praticamente attività basale
E quello che si può vedere e anche la possibilità nelle settimane che seguono al trapianto di accendere e spegnere di nuovo l'espressione del transgene in questo caso il transgene un marcatore ma potete pensare alle possibilità
Non solo di indagine sperimentale e questo sistema ci dà per quello che ne sappiamo questa è la prima volta che si può esprimere in modo regolabile un gene in un modello in vivo di ma poi si umana e quindi non sono studia nelle potenziali
Funzioni biologiche ma naturalmente pensare anche a una eventuale applicazione terapeutica
Il midollo del topo prelevate qualche seminato in coltura cono genica
Di se esposto o meno alla droga può regolare espressione indipendentemente se il popolo invita la Terza esposto no alla tetraciclina quindi i geni rimangono regolabili in modo anche qui a lungo termine senza comprometterne la espressione si può anche fare una sommi somministrazione diretta in vivo in un tessuto in questo caso è un tumore che cresce in un topo un tumore trapiantato in un topo nudo la la somministrazione del vettore prego labile nella massa tumorale
Porta all'evidenza al alla espressione regolata del transgene lager topi si vede in modo molto evidente il dove è stato iniettato il vettore e e anche in questo caso la soppressione dell'espressione molto efficace
E quello che è interessante che se volete avere un'idea della quantitativa di quanto potete regolare espressione usate la luciferasi su estratti totali del tumore iniettato anche qui un topo che non senza lato Doxa ciclina
Topic con doxiciclina toppe di controllo
Di nuovo due ordini di grandezza di regolazione dell'espressione
Quindi la la possibilità offerto dal grande torrenti rivali a questo riguardo è di raggiungere una somministrazione efficace una regolazione nella nel Baltico nel totale delle cellule tra sedotte senza bisogno di selezione
Che permette una serie di applicazioni one-off e gli studi in vivo probabilmente su questo non mi soffermo ma i nostri dati molecolari ci indicano che la capacità del dottor antivirale di di fare questa migliore performance rispetto a quelli Concorezzo virale dovuto al fatto che in qualche modo quando si integra il vettore o selezione dei siti di fra mattina
In qualche modo Perrotta e trascritto ascrivibile o induce uno in modo in della cromatina dove si integra e quindi mantiene questa cromatina aperta è esprimibile diversamente da quello che succede convettori con colatura virali
Espressione bersagliato espressione specifica per un certo tessuto
Anche qui l'approccio è quello di naturalmente di sostituire al promotore interno che è l'unico a controllare l'espressione nel nostro caso dei promoter i derivati da genica non espressione specifica in certi tessuti nell'organismo
Con una somministrazione sistemica nella vena della coda noi otteniamo una traduzione di vari organi nel nel nel nell'animale soprattutto il la milza il fegato e il midollo osseo attualmente dovuto questioni sui principali organi filtro che captano
Il vettore e vengono tradotte troviamo DNA del vettore in questi organi però a seconda di quale sia il transgene introdotto l'espressione si osserva nella milza fegato e midollo osseo qui non si vede mai realtà dieci per cento del cielo sono positive se il se il promotore costitutivo
Se il promotore come in questo caso viene dal gene dell'albumina quindi tende a essere specificata da cellule del fegato
Il promotore da espressione selettiva negli nelle cellule del fegato e in particolare
L'espressione sia in cellule
Non sorse il promotore costruttivo a livello del fegato abbiamo sì epatociti che cellule di Cuffaro non è Pato citare che esprimono
Se invece il promotore e tessuto specifico come quello dell'albumina abbiamo l'espressione prevalente negli epatociti non c'è espressione di Mostar bene gli altri
L'ultimo punto che volevo illustrare e sempre nell'ambito della della passività di bersagli ha un tessuto l'utilizzo di un promotore specifica per per tessuti in corso di angiogenesi com'è l'endotelio abbiamo testato tutta una serie di geni espressi in cellule endoteliali che vengono utilizzati per regolare l'espressione del vostro gene marcatore
Questi i vettori vengono testati per la loro capacità di trasferire il il la cassetta di espressione che in tutti i casi efficiente ma se voi guardate l'espressione in vari tipi cellulari
L'etica delle cellule endoteliali questi geni questi vettori esprimono bene ma per esempio in cellule come linfociti l'espressione è assente per quelli che sono meglio più specifici
Quindi retorica nel maggio miglior profilo di espressione come questo per cellule endoteliali sospetti usati per somministrare Leading vivo in tumori di nuovo
O nella vena i topi parata di tumore o nel nel topo spesso ha ritenuto il tumore l'espressione del transgene si ritrova a livello delle cellule endoteliali del tumore in modo specifico per questo vettore
Quello che è interessante che non soltanto le cellule endoteliali nel tumore che sono i in corso di angiogenesi esprimono il transgene diversamente da cielo endoteliali presenti in altri tessuti come il fegato e la milza
A indicare che abbiamo un'espressione non soltanto dipendente dalla natura endoteliale del tessuto ma persino dalla
Specifica
Atto associazione di questo tessuto all'angiogenesi io termina qua concludendo che queste sono alcune delle proprietà che questi vettori danno e che possono essere utilizzate per il disegno di nuove strategie terapeutiche alcune delle quali sono già in corso di esplorazione dovuto tempo di di di discutere
E naturalmente voglio ringraziare collaborato al laboratorio che hanno partecipato a questo lavoro e che ovviamente hanno fatto a maggio tanto di questo lo ringrazio per l'attenzione
Donando
Lei è l'oratore che l'ha preceduto Hasan parlato di sistemi virali
Da chimico mi piacerebbe avere un qualche confronto con le proteste potenzialità offerti da sistemi non viali ippodromi
Polimerici grazie
Ma lei ha molto maggiore a fare il suo domanda non sono la persona adatta disco risponde doveva avere un esperto i sistemi non virali
I sistemi non virali hanno spento un ruolo importante nella tanto agli approcci per la somministrazione di geni sostanzialmente a tutt'oggi soft soffrono di una notevole inefficienza
Rispetto ai sistemi virali e quindi il loro inefficienza non soltanto nella quantità di di tessuto che rientra sotto ma anche soprattutto nel tempo in genere all'altra alla dalla spedizione seguono pochi giorni di espressione
Quindi le loro impiego al momento limitato ad applicazioni che richiede un'espressione molto ridotta ed anche temporaneamente cioè sia nel tempo che nello spazio oltretutto tossiche sempre pensato che i sistemi non virali garantissero la sicurezza della somministrazione lo sono certamente dal punto di vista biologico
Ma non così tanto dal punto di vista di tossicità generica perché in realtà la somministrazione di Mitidieri DNA comporta una tossicità sistemica significativa e quindi ci sono dei problemi anche su questo fronte da sviluppa
Domande prego
Una curiosità insomma quella il produttore specifico per l'indotto gli proliferazione che avete usato il promotore deporre Janet ai due che un abbiamo dato il promotore e Lennart sa di questo gene niente
Animali transgenici che esprimono a questo che pareva certo parlando poi Tina quindi è un gene che spesso nelle cellule endoteliali espresso apparentemente in tutte le cellule endoteliali ma tende a essere iper Espresso in cellule che sono attivate a proliferare e quindi parimente la selettività che noi vediamo dipende da questo
Ci sono altre domande
Posso farti una domanda idea che il numero di copie di questi transgeniche sono inseriti nelle vostre condizioni
Sì in genere ci si possono abbastanza titolava in vitro invita così da titolare e quindi aumentare anche arrivando alta numero elevato dieci venti copie per cellula con altissime moltiplicità di infezione questo in già già non è desiderabile
In vivo siamo ingenera intorno alla coppia per Genova quindi una singola copia singola copia e quindi il questore la seconda domanda e la possibilità che questi inserimenti e poi rossa sua volta disturbare dei geni importanti che che tipo di controlli si possono fare
Dunque beh questo è tutto un Peppone vagamente la spada di Damocle dell'integrazione il vantaggio è la stabilità della modificazione lo svantaggio la possibile perturbazione dell'espressione genica
Se quello che viene a mancare un gene vitale in in genere il problema si risolve nel perde la faccia lontano sbotta una fra tante quindi non preoccupa più di tanto il problema è la possibilità ovviamente della mutagenesi internazionale quindi attivazione di geni
Non oncogeni così di l'esperienza con i venti minuti in genere Lolli queste studiato con studi all'osservazione a lungo termine grandi numeri in vivo
L'esperienza per i vettori concorre trovi orali su questo fronte molto in cava di molto positiva non ci sono state riscontrate ripetono gli antivirali sono più efficienti quindi tonnellata cessò sentiamo più attenzione ma
Dati io direi di chiudere la discussione questo punto anche per non fare ritardo e vorrei introdurre il prossimo speaker che concluderà in maniera penso eccellente questo interessante pomeriggio
Stata del dottor Giuseppe Del Giudice che è un pugliese si è laureato in medicina a Mila no e subito dopo è andato a lavorare all'estero in realtà lavora al dipartimento di patologia dell'Università di Ginevra
Dov'è rimasto per dodici anni servendo nell'ultimo parte di questi ultimi otto anni realtà di questi alla organizzazione mondiale della sanità dove si trova benissimo
Fino a che è arrivato riproporre l'ha convinto grazie per quel folle nostra fortuna tornare in Italia tornare a Siena la Cairo dove adesso dirige il Progetto vaccini della Cairo
Giuseppe
Ti ringrazio c'è Sagredo che ringraziare gli organizzatori per l'invito credo che ringraziare anche duri per la pazienza di a rimanere qua è sempre difficile essere tutti lo speaker mantenere alta l'attenzione della audience e devo dire che che c'è una certa difficoltà
A a attacca la di Baccini innovativi come mi è stato chiesto di fare
Anche per una ragione di parlarne dopo che almeno k fuori a mezzogiorno ha parlato di accorcio genomico
L'approccio egemonico che stiamo seguendo appunto alla Cai con nello sviluppo di vaccini contro il meningococco bit a quello che cerco di fare dei potuto avere molte scelte devo confessare ho deciso di
Selezionare per la discussione di oggi un esempio un esempio che mi permette di discutere insieme con voi i le diverse tappe
Che partono dal ragionamento di basse fino allo sviluppo
Le tappe per lo sviluppo di un vaccino innovativo conto un patogeno verso il quale non ci sono vaccini
E quindi o scelto per discutere con voi l'approccio che abbiamo seguito negli ultimi anni a Siena per lo sviluppo del vaccino contro l'Helicobacter pylori
Quindi
All'inizio vino sterrato
Perché di voi non conoscesse questa infezione questo batterio una breve introduzione e poi pian pianino cercherò di condurre insieme con me lungo la strada che abbia seguito in questi ultimi sì o sette anni
E vi anticipo che questo non è affatto un quel getto genomico
E è una dimostrazione che soprattutto anche lavorando nell'industria o nell'Accademia qui non non cambia volto lo l'importante l'obiettivo le strade per raggiungerlo possono essere vampiri l'importante
Raggiunge
Quindi se parliamo di Helicobacter pylori devo anticipate che a marzo di dell'anno prossimo verrà festeggiato a Perth il ventesimo anniversario della nascita di questo batterio che come vedremo non è affatto giovane per la fa parte di quella cornucopia di patogeni che sono son saltati fuori dal vaso di Pandora
Negli ultimi vent'anni venticinque anni ed è in buona compagnia non mi dilungo su questo utile Helicobacter pylori che quindi vedete i due ter la superficie di punte di una mucosa gastrica un batterio Kamm negativo che infetta sono gli umani e cosa importante rimane sempre extra cellulare in ambito extracellulare questo sarà molto importante che vedremo perché
E anticipo perché a inventato dei sistemi che gli permettono di dialogare con la cellula pur rimanendo senta perché strettamente all'estrema
Ancora qui o un altro batterio sempre alla superficie da la la corsa mi scuso per la risoluzione ma
L'originale molto più fine
L'Helicobacter pylori quindi viene trasmesso per via soprattutto ovale anche se quello fecale non può essere non può essere esclusa e cosa molto importante viene acquisita soprattutto in età pediatrica soprattutto in ambito intrafamiliare studi epidemiologici molto eleganti a livello molecolare hanno mostrato che il fattore il rischio principale per i nostri figli per i nostri bambini sono le mamme
E questo in ogni società dal Giappone Israele e in Italia per una ragione che io da buon padre o da cattivo padre posso ben intuire non ci passo molto tempo non c'ho passato con i figli
Quindi non ho dato molto fischio a luogo di beccarsi il mio pilota ma contabilmente hanno quello della lo compra altre
E questo è vero un po'dappertutto
Come dicevo l'Helicobacter pylori se è stato scoperto vent'anni fa per pura combinazione in periodo pasquale
Attore solo perché si erano dimenticati qualche giorno in più una cultura che è stata fondamentale
D'altro canto studi genetici hanno dimostrato molto chiaramente che da un punto di vista evoluzionistico e nato praticamente con l'uomo con la specie umana ed evoluto con lui come un
Per scimmiottare il titolo di un bellissimo come Enzo americano di Hunt Tyler come un un al turista per caso ha seguito l'uomo nella sua migrazione
Dalla dall'Africa dalla Rift Valley lungo tutta la la l'annichilazione degli ultimi cento mila rende
E come dicevo attraverso la via Ugo fecale o soprattutto corale si mantiene come quasi un finger printing una
O una un marchio di ogni famiglia di ogni soggetto che ognuno di noi a il nostro coro Helicobacter pylori che avremo cura di trasferire ai nostri figli attraverso dati varie vari mezzi in questa maniera il batterio si trasmette e persiste
L'effetto di tutto questo è che la stragrande maggioranza della popolazione umana è infettata con l'Helicobacter pylori immaginate un po'c'è voluto così tanto tempo per scoprirlo eppure in questa stanza probabilmente più della metà tra di noi
Tre anni più giovani probabilmente pannello Helicobacter pylori o l'hanno avuto sei dopo aver avuto sin troppi sintomi se ne sono liberati con una buona terapia
Nei Paesi in via di sviluppo abbia fatto degli studi epidemiologici recentemente in Africa orientale perpensa empio il sessanta per cento dei bambini sono già insetti all'età di sei mesi di vita
Quindi immaginate questo se succede all'età di due anni son tutti infetti
Studi sono stati fatti per esempio minoranze etniche immigrati che vengono in Europa anche dopo la percentuale molto alta
Quale sarà l'effetto di questa infezione nella maggior parte in una buona fetta dei soggetti ci porteremo con noi il nostro Helicobacter pylori in maniera sintomatica ma una grossa
Fetta di questi soggetti svilupperanno
Un non cercate tic
Soprattutto a livello duodenale ma anche a livello gastrico e un
Da di soggetti svilupperà almeno avrà un rischio significativamente elevato di sviluppare un cancro gastrico un classico adenocarcinoma
In più una minoranza veramente pochi possono sviluppare un linfoma gastrico a cellule di questo un tumore l'unico probabilmente
Che regredisce dopo una sana cavitazione a base di antibiotici
Quindi cioè uno dei postulati di Koch piene francamente
Dimostrato sulla base terapeutica
Gioca ci son molte domande qui ho voluto mostrare questo bellissimo quadro di Klimt perché non bisogna andare a vedere a Vienna e a Roma perché la pazienza di andarlo a trovare che mostra le tre età come dicevo ci si infetta inetta pediatrica né i sintomi per la stragrande maggioranza dei casi arrivano non a quel bandito ma sua madre ecco a sua nonna
Quindi cosa succede dal giorno in cui dallo schermo cosa gastrica dire con l'agonizzante a fino al giorno in cui a quindi in età pediatrica fino al giorno in cui da adulti avremo i primi sintomi che la patologia in realtà quello che manca ancora siete i benvenuti entrare in questa ricerca
Che quanto a letteratura produce è seconda solo all'HIV
E ma ha bisogno di di di di spiriti di di mente fresca francamente qual è la storia naturale di questa infezione
C'è un'altra domanda allettante perché mi piace sottolineare la domanda c'è immunità naturale dopo infezione ognuno
Alcuni suggeriscono che si sulla base del fatto che per esempio ci sia un giorno ritardo dell'infezione nei bambini che sono stati allattati al seno però questo non è stato formalmente provato in esperimenti caso controllo ben fatti di casi clinici di perdita spontanea dell'infezione però non è mai stato fatto uno studio sull'uso di antibiotici quelle che chiaro che l'infezione rimane cronica una volta che ci prendiamo il nostro Helicobacter pylori ce lo portiamo a vita
A meno che lo facciamo una terapia e poi ci sono altri modelli sperimentali quindi affetti una infezioni pregresse non danno è un'unità effettivamente mi piace mostrare questa targa che ho fotografato sullo di nuovi di Assisi che dice qui non si gode di più immunità
Questo concetto che i latini d'immunità avevano ma concepito come concetto eminentemente squisitamente legale che ora gli scienziati hanno applicato alla biologia
Quindi te approccio terapeutico l'approccio terapeutico per chi di voi di noi l'ha fatto l'associazione di Uniti pittore di Pompa cotoni con due o più antibiotici per una o due settimane funzione se si prende bene prego
Problemi grossissimi problemi resistenza agli antibiotici effetti collaterali controllare s'un numero elevatissimo di pastiglie
E per chi fa il medico sa benissimo che molto spesso la gente torna non mi son fermato dopo cinque giorni non mi son dimenticato di prendere queste pastiglie
Effetti devastanti intuizione di resistenza il medico batte che ritorna e problemi gastrointestinali
Certo punto sviluppato un vaccino per risolvere questi problemi e qui mi piace fare un paragone collagene con la linguistica con la genomica
Se pensiamo a questo signore Champollion questo signore è considerato il padre dell'egittologia perché è riuscita a decifrare gli caratteri il circo più difficili se potremo la stele di Rosetta che è stata la base non solo insieme con altri obelischi altri altre cose alla base di questa decifrazione a quello che mi piace della stele di Rosetta
E che assomiglia molto se prendiamo la parte centrale o quella parte interrotti coinvolge con glifi Comanche incarico poco importa come la parte centrale assomiglia maledettamente alla sequenza genomica che ci ha mostrato vino Capponi
C'è questa banda continua di geni o di carattere che se abbiamo una chiave di lettura possiamo interpretare altrimenti ci rimangono estranee
E con attenzione nel momento in cui dal dettaglio andiamo totale dalla tavola andiamo all'intero sette di informazione cosa abbiamo come discutevamo stamattina con Cesare Montecucco e innovatori Massimo abbiamo un vocabolario ci manca ancora la sintassi grammatica
Cosa vuol dire il contesto e probabilmente lo adottò è stato un milione egittologo rispetto a Jean con gli occhi o sicuramente i due dovevano andare a braccetto come sono andati a braccetto se oggi conosciamo l'egittologia questo per dire una cosa per dire che è una cosa e l'ha visto una cosa il contesto che nel contesto e come giustamente discuterà pieno capponi il la genomica trovati la sua fondazione nel momento in cui i meccanismi i ruoli di ogni genere vengono decifrati Peppino che è stato fatto una cosa
A monte prima dell'ECA genomica
Stata quella di definire gli antigeni cruciali nella patogenesi dell'infezione quindi un approccio assolutamente nazionale stato quello di sviluppare modelli animali di infezione e quindi di testate in accorcio profilattico terapeutico queste molecole in questi modelli animali
Questo solo per di per cominciare l'approccio di quali molecole selezionate come selezionatore
è stato quello di dire bene prendiamo molecole che sono importante nella virulenza in versetti c'erano due grosse famiglie di di batteri che erano stati definiti già su base epidemiologici più epidemiologica datori di tipo Due nudo e due Pitti pugno associato più frequentemente al riforme liberali ulcera peptica cancro
Quel titolo due soprattutto a forme più lievi per esempio gastrite
Non c'è un punto Helicobacter che sia buono quello buono è quello morto questa è la vera del mio modo di vedere perché anche quello di tipo due da gastriti anche gravi però intendete queste sono penalmente schematizzazione epidemiologici
Quello che era chiaro se si andava a fare una lista di antigene questo è ecco qui o minima di Ranieri
E ora che c'erano molti antigeni necessari molti fattori necessari nella violenza da la batterio alcuni che erano presenti su tutti i ceppi batterici
Non ho altre che erano presenti soprattutto solo scusate per esempio la Camargue un la neri batteri di tipo uno cioè che quelli più virulenti quindi il lavoro e su è stato quello di penalizzare il primo a livello molecolare e funzionale e poi nel topo
La potenzialità di questi di queste molecole come molecole vaccinali con l'avvocato dei molto brevemente in maniera veramente schematica passate attraverso alcune molto particolarmente c'hanno interessato in questi ultimi anni europei per sottolineare il contributo veramente detti
Nel laboratorio di di Cesare Monti Cucco che è stato un una collaborazione che è andata molto al di là della del fatto che scientifico
E credetemi se vi dico che ci siamo veramente divertiti a portare avanti insieme questa questa esperienza questa esperienza
Questo batterio produce una tossina otto sino alla polizza anche la tossina assembla a formare questi questa è una Vieri disse io sette petali dove c'è una parte enzimatica mente attiva una parte che si lega alle cellule
E l'effetto finale questo questo aspetto tra spappolate quindi questi buchi questo aspetto a formaggio svizzero appunto viene da in cui
Con dall'Atac
Proprio qui prova dire qualche tavole su questa su questo genere su questa continua che la Calabria e cioè un antigene meno dominante numero terminante vuol dire che la massa a grande maggioranza dei soggetti infettati con l'Helicobacter pylori hanno anticorpi come vedono più tardi anche una risposta cellulare molto forte comunque questo antigene
E a posso anticipare che è una continua che permette il dialogo fra il batterio della Centro latte aste perché viene iniettata all'interno della cellula
Un pur non essendo una tossina
Perché non viene secreta direttamente nel mezzo di cultura è una proteina che viene in contatto non con la parte est della cellula per poi essere internalizzate avviene direttamente iniettata nel citosol
Perfetti
Il genoma del titolo dei contiene una serie di geni che vengono definiti isolati patogenicità
Che codificate per quello che può essere francamente definita una siringa molecolare
Quindi consente di geni che codificano per continue che poi si assembrano insieme e cioè hanno questa macchina questa pompa potremmo dire non un po'un una brutta definizione che fa sì che delle proteine possano essere poi inserite che asportate dentro dentro l'accenno a questo al microscopio con focale un po'quello che succede
Quindi che il batterio si avvicina
Stacca la la l'allacciatura
A questo punto ci son dei meccanismi molecolari che vengono tendono attivati
Per cui queste proteine che vengono codificate assemblano si crea questa specie di piglio che fra nella membrana cellulare della cellula Carioti Ca'che alcune proteine tra cui l'HD lei
Viene iniettata deve
Qua sappiamo questo grazie al lavoro di Antonello Kovaci dei nostri laboratori assieme a te questa proteina viene fosforilata in certi siti critici che questa e questo questi cambiamenti biochimici porteranno a dei cambiamenti molecolari livello dell'actina
Per cui la forma stessa della cellula cambierà
E si pensa anche che questo sia fondamentale anche perché questo succede cronicamente dell'induzione di di quello che sarà poi che il tumore a della cellula gastrica questo per dire semplicemente che non solo si inducono anticorpi e quantità gay
Ma non è che se noi andiamo a vedere quali cellule quelli linfociti T possiamo trovare a livello della mucosa gastrica la stragrande maggioranza di questi linfociti T sono diretti contro questa unica coltellino
E questo è veramente strabiliante per un'infezione batterica
E molti di questi torno un fenotipo funzionale di tipo infiammatorio la stragrande maggioranza quattro parole su questa continua perché sembra una palla da baseball o un pallone di calcio dipende se lo diciamo e qui in Italia o negli Stati Uniti che fatta commento dei cameramen rock non poteva che è stata molto attentamente studiata
Da dal gruppo dice sarà in collaborazione con il nome per la proteina che induce che mo'Tavassi su neutrofili che
Monociti e attivazione che più recentemente se visto che questa continuano attivando anche molto potentemente lì mastociti quindi inducendo rilasciamento di sostanze tra cui anche citochine come l'interleuchina sei e potenziando quindi Effetto infiammatorio di della di questa proteina e quindi dell'infezione da Helicobacter pylori non mi dilungo molto nei dettagli sperimentali
Questo è semplicemente per concludere per dire che nei setti ci sono dati i meccanismi attraverso i quali l'Helicobacter pylori
Induce patologia attraverso una tossina come l'Atac lei per esempio attraverso il rilascio di un atto a questa ultima Cotrina che passa attraverso l'epitelio ecco indurre recruitment che mo'tassi di e attivazione di neutrofili che daranno quindi una visione un livello basso laterale
Attraverso la Adyei che viene iniettata nella cellula e non ho anticipato prima induce ti lascio l'interleuchina otto biondo alto potente mediatore con infiammatorio
Quindi ci sono vari meccanismi quindi queste molecole possono essere bene utilizzate potenzialmente come vaccino
Ma per gli animali
Un po'di anni fa a cioè molti animali modelli animali sono stati sviluppati
Quello che va per la maggiore modello mulino perché è più facile più semplice un po'di anni fa quando Montino è stato adattato ogni infezione di per sé innaturale abbiam detto che il pilota infetta sono un uomo e questo fu reso possibile grazie a lavori di fatti a Siena
E più recentemente abbiamo messo a punto questo modello nei miei cani beagle
Normali xenobiotici che assomigliano molto che producono molti aspetti un'infezione umana questo solo per dire per esempio l'elettorato
Che se diamo un un certo molto più lento quello per cui ha dato Istologia centrale
Sia una una discussione importante dell'integrità dell'epitelio perché con un ceppo cade negativo questa la lesione molto minore come succede nell'uomo
Questo nel canone semplicemente per mostrare per esempio fenomeni si vedono male in alto a sinistra di Tonya ometto di cellula Rita formazione di di distruttore linfociti che veramente approvava formale quando dicono sì follicoli macroscopicamente evidenti
E Bacco distrazione dell'epitelio perdita della funzionalità
Molto brevemente avendo i modelli uno si può permettere a questo punto di testare la fattibilità dell'approccio vaccinale per esempio con immobilizzazioni catastrofiche sia in maniera preventiva che terapeutica
Facendo per esempio prima l'immunizzazione poi c'è l'annuncio viceversa primi infettando e poi andando per immunizzarsi ogni sempre per via gastrica l'abbiamo colossale rabbia gastrite ad altre vie monco salino son facili perché non molti degli antigeni non sono indulgente ci quando vengono dati perdiamo Cossali quindi uno si chiede
Premunire al con adiuvanti che funzionano a livello monco sale e questo è stato un filone di ricerca è molto importante che ci ha condotti
Per dopo alcuni anni assieme in una per con lo sviluppo di alcune di Pantin Cossali che l'anno prossimo entreranno in fase clinica questo sarebbe potuto essere un altro suo oggetto di discussione per oggi
Ma questo non tradotto sono più dire che questi adiuvanti manco sali sono stati utilizzati
Nelle immunizzazione dei nostri topi
Per esempio e questo è una tabellina una un piccolo grafico che però chi assume anni di lavoro dove molti antigeni sono stati testati
E terrà vedere se si riusciva in maniera profilattica prevenire un'infezione ampio e la risposta è sì la cosa è possibile
Richiede sto forti edicolanti non Cossali richiedendo in proteine nella loro interezza perché Conte di frammenti non si induce protezione
Non solo ma anche a livello terapeutico la cosa è fattibile infatti qui la cosa è mostrata con la vacche con l'accademico
Impossibile quindi e abita con infezione già esistente nello stomaco dei topini ironizzando ricco con alcuni antigeni ricombinanti e qui lo scempio appunto dalla che la capirei
Non solo ma a livello terapeutico quello che il vaccino fa è qualcosa in più rispetto all'antibiotico non sono che fatica ma inducendo una risposta immunitaria protegge contro una se infezione se guardate quindi la il traffico in basso
Quindi non solo dati fatica va
Permette a i soggetti di essere Community protetti contro non nuovo contatto quindi induce e memoria
Poca le che le grosse domande che si pongono che ci poniamo se questi risultati verranno saranno applicabili all'uomo
Mentre per i trial terapeutici la cose semplici perché uno guarda immediatamente all'approccio di eradicazione o o miglioramento della patologia
Però dobbiamo tener presente che finora nessuno dei vaccini che abbiamo in mano una un vaccino terapeutico
Per quello profilattico ci sono maggio problemi per esempio
Non abbiamo correlati di protezione invito non sappiamo quali sono i meccanismi di profitti reti di protezione dobbiamo prevenire l'infezione o prevenire la malattia
Son tutti discussioni che stanno andando avanti e non si sa che nel caso del piloni anche devo confessare e anche quali sono i meccanismi di protezione
Regia
Regia secreto
Luigi Gilli
Ci sono argomenti a favore argomenti contro e quello che sembra essere chiaro è che importante avere un compatimento CD quattro rispetto per tanti genetista compatibilità di classi due integrato perché ci sia protezione questo almeno Bertotto
Con la per concludere molto brevemente e ci sono alcuni trial clinici che sono stati fatti soprattutto con un antigene l'ureasi quell'antigene più abbondante dieci per cento delle proteine batteriche sono grassi
E tutto quanto sono state non positive
Cioè proveremo non c'è unicità nessuno efficacia terapeutica e soprattutto contro dati a livello monco sale spesso inducono dia non perché sono tossici nuovo comma perché per via di un'antica e questa persona hanno utilizzato era un tossici
Oppure per esempio ureasi espresse in salmonella tali tipi di salmonella più recentemente un vaccino
Ucciso inattivato nato per via orale anche quello scarsi risultati
In conclusione quello che si sa fino a che il vaccino contro l'Helicobacter pylori può essere sviluppato è fattibile sia dal punto di vista profilattico che terapeutico questo è stato provato in in Dari modelli animali l'esperienza clinica comunque ancora abbastanza limitata filtra allargata sicuramente sia per soprattutto per imparare la fattibilità nell'uomo
Come dicevo il pilota non batterio che infetta naturalmente sono un uomo e poi anche per imparare quali sono i correlati di protezione e quali sono i meccanismi per cui ci si può Conte quindi per concludere noi crediamo che il Daccico il vaccino futuro contro l'Helicobacter pylori sarà un vaccino contenente una un o l'associazione di più antigeni e che sarà importante
Definire del le formulazioni appropriate
Aveva che queste può questa efficacia sia accettabile
Posso anticipare che agli altri indici con i nostri Baccini sono in corso
I risultati saranno conti il primo semestre dell'anno prossimo
Più probabilmente verso l'inizio dell'estate dall'anno prossimo quindi far per il prossimo vivono forse strega
Bene discuterne vi ringrazio per l'attenzione vorrei concludere che questo progetto è stato il ed è tuttora un esempio di quella che può essere una proficua collaborazione costante
Tra industria e Accademia
E che è un concetto assolutamente eccitante per quella che è la biologia del Battelli dimostra anche che lavorando nell'industria uno non solo e cinico ma si può divertire anche con la scienza di base
Grazie
Grazie
Giuseppe ristabilisce un presentazione su domande
Dal comincio io intanto
Le già qual è il ruolo della risposta immunitaria cellulare in nella protezione dell'incubazione cioè bevendo in ogni vaccini spesso si pensa alla produzione di anticorpi notai girata di Gigi eccetera
Però questo è un batterio che cito in una zona molto particolare
E c'è chiaramente una una risposta cellulare e volevo chiede se avete dei dati al riguardo insomma
La domanda è molto cioè la domanda è semplice la risposta è molto complessa chiaramente pena varie ragioni quello che è chiaro è che
Anche la patologia gastrica indotta dall'infezione sembra essere mediata dalla risposta immunitaria
Quindi la
S'è opportuno che ci sia un giusto equilibrio tra
La risposta indotta ad
Dal vaccino quello che sembra chiaro
E che
Uova e soprattutto una risposta poi infiammata
Sicura
Almeno questa è la nostra ipotesi di lago
Risposta di tipo C H due
Per esempio chiamiamola anti-Bush
Netto che ci sono da
Pensa che se uno
Funzionari
Una risposta di tipo che è accaduto
L'eradicazione e questo può essere fatto per esempi
Facendo
I dati utilizzando
Indirizzato era
Sposta verso quella che potrebbe essere una risposta protetti
Succedono
Per tutta la
Molto spesso i batteri si vanno
Però nel cielo come fa
Estrazione Ulan
Veramente escludere che un due per cento
Sì nascono dei le e che questi siano quella riserva costituiscono quella riserva
Vi ottici di Hagi
Quest'ipotesi staranno
E cioè di questi antibiotici
è uno dei pochi antibiotici più capaci passa la mano
Te lo so risponde cioè quello che posso dire sulla
Quello che si discute
Nei con con i colleghi e quello che si vede è che
Cioè personam
Le fettine istologiche che son passate sotto i neon ho mai visto uno ad e quello che si legge in letteratura
Teso
Il di dire
Erano invece lo
Dopo in realtà individuava antigeni dicendo
Gli antigeni prosa mentre
Sono dieci mila tantissimi non specifici noto
Neanche disturbare i meccanismi di secrezione
Che ha detto di aver visto il batter
Ora cosa ci sarebbe
Dio solo lo sa
La fretta ci possa si possa mettere dentro l'accenno
Perché no diciamo che la RAI
Questo cioè
Tutti coloro che sono in
Per il giudice grazie