Bionova: 2ª mostra convegno Biotecnologie e Bioingegneria-organizzato da PadovaFiere, Università di Padova, Azienda Ospedaliera Padova (presso il Padovafiere, 28 - 29 - 30 novembre - 1 dicembre 2001)

Alla che può aver provocato qualche disguido
Iniziamo ora la sessione su sugli organi artificiali
Organi umanizzati qualità di Padova hanno
Componente del comitato scientifico di Bear Nova
Do il benvenuto
Al professor fu un mero
Di Milano del Politecnico di Milano a cui cedo immediatamente la parola
Per l'inizio della sessione
Grazie professor Amicone grazie al comitato organizzatore per avermi invitato
Particolare in questa sessione che credo sia particolarmente significativa perché raramente si vede in un'unica sessione riunite le tematiche dei trapianti degli organi artificiali
Siccome questo è molto importante anche perché l'immagine che si ad est proprio dell'altro ieri un articolo sul Corriere della Sera sembra contrapporre questi due approcci sembra eccessiva alternativo organo matura alle e organo artificiale
In realtà questa è una visione assolutamente scorretto
Non tanto ragioni filosofiche per la contrapposizione tra un naturale e artificiale è sempre stata piuttosto artificiosa no
Sempre colpito quell'immagine fantascientifica del dell'alieno che arriva sulla Terra
Deve scoprire se esiste un modo degli esseri viventi
Allora arrivando verso la Terra i primi manufatti che vede quindi le prime cose artificiale tra virgolette
Sono la grande barriera cinese e la grande barriera corallina australiana
Tutte e due sono prodotti artificiali
Tra virgolette di esseri viventi
Però noi vediamo una grande muraglia cinese come un sistema artificiale la barriera corallina
Come un elemento Maturana è chiaro che c'è una visione antropocentrica che far sì che l'uomo sia considerato dal punto di vista esseri viventi diverso dagli altri esseri viventi
Ma al di là di questa ragione un po'sciocco filosofiche fantascientifica in realtà senza la tecnologia anche i trapianti non potrebbero avere nessuno sviluppo cioè il supporto tecnologico assolutamente fondamentale le problematiche sono lo stesso cioè al far convivere un mondo un sistema meccanico elettronico con il biologico richiede di risolvere un problema di biocompatibilità di compatibilità funzionale così come i trapianti
Al di là della necessità degli strumenti informatici meccanici elettronici per poter sviluppare tutte le tecniche di trapianto
Quindi questa sessione congiunta secondo me è estremamente utile per focalizzare questo Davison questo legame tra questi due settori però non voglio portarvi via
Troppo tempo quindi la RAI subito la parola al primo relatore direi che le discussioni possiamo farle alla fine dei primi tre interventi concedendo domande eventualmente dal pool quindi il primo relatore e il professor Ermanno Ancona dell'Università di Padova ci parlerà dello xenotrapianto come nuova frontiera in medicina
Ecco mi ritrovo qui
L'argomento di questa
Si può inutile che va bene
L'argomento di questa prima la relazione
Lo xenotrapianto
è un argomento perché in questo momento sulla
Bocca di tutti e anche su tutti i mass media perché si presta a molte polemiche
Ora l'occasione di bio nuova
Lo vorrei cogliere per fare capire i motivi reali che stanno alla base
Di questi studi studi che
Mi ero hanno al
Sostituzione di organi impazienti
Dava in mente ammalati
Il senso clinico raffigurato in questa diapositiva vedete che vi sono cento mila pazienti nel mondo che sulle liste di attesa per il trapianto
Continuano ad aumentare
E ogni quattro ore un paziente muore perché non vi sono gli organi per poter supplire alle sue funzioni deficitario
Se guardiamo ai dati della agenzia uno solo degli Stati Uniti vedete che vi sono quasi ottanta mila pazienti in lista di attesa per il trapianto di vario tipo di organi
In particolare vedete il rene la fa di gran lunga da padrone in questa lista
Non solo ma si può anche osservare che la lista di attese di il PIL per i trapianti
Ma continuamente e crescendo mentre vedete che
I donatori trapianti eseguiti più o meno
In una situazione di stallo
Se guardiamo la situazione in Italia nel Nord nel questo il Nord Italia Transplant voi potete osservare che dal novanta al Duemila
La lista di attesa è passato dal due mila due mila cinquecento anche se i trapianti eseguiti vedette si sono più che raddoppiati e anche il numero dei donatori è più che raddoppiato
Quindi nonostante uno sforzo organizzativo
Ottenere dimettersi un po'al passo con il resto del mondo con l'Europa
Abbiamo ancora una grave deficienza di organi e vedete che il il quello che si chiama il tasso di procura mento di organi per milione di abitanti
Se guardiamo il rally
Naturalmente questo non vuol dire che sia raggiunto la media ottimale europea ma o mondiale però il rally sono due per ogni donatore equipara vedete siamo
Attorno a quaranta arredi procurati per milione di abitanti nel Veneto e in genere vedete la linea rossa del niente che nettamente migliore rispetto al resto d'Italia
Quindi per i reni abbiamo questo sforzo organizzativo però per il cuore
Ecco vedete che per il cuore
Non sia un miglioramento del procura mento di organi questo perché perché stanno invecchiando i donatori
D'altra parte quando mi viene chiesto no perché molte volte ci sono queste contestazioni
Io personalmente molte volte vengo contestato io o una domanda da fare sempre
Ed è condividete com'è che il mio primo compito come medico e quello di annullare la fonte attuale del procura mentre di organo
Il cadavere legato cosa l'incidente stradale trauma del lavoro un incidente cerebrovascolare in cui una medicina preventiva può contribuire a ridurre la causa era uno screening delle delle morti improvvise
Per problemi cerebrali vascolari negli anni ragazzi giovani cioè io come medico devo o non devo ridurre la fonte del popolamento gliela devo ridurla credo quindi devo cercare però di fronte a questi dati fonti alternative
Vedete che lo stimolo per cercar fonti alternative nasce dal fatto che la differenza di vita tra chi è in lista di attesa e non vien trapiantato la linea gialla e chi è trapiantato la linea rossa è drammaticamente
Diverso nel trapianto di cuore nella lista di attesa per trapianto di cuore ma anche nel trapianto di fegato quindi purtroppo vi sono degli organi in cui non vi è il rene artificiale che può supplire ma costringono a cercare soluzioni alternative
Come migliorare
Questo carenza di organi
Una parte lo deve fare il legislatore l'ha già fatta
La nuova legislazione nuovo utilizzo
Dei donatori disponibili anche dei programmi di educazione c'è il tutto questo in questo momento è partito in Italia
Il medico anche il anche il medico ha un una quota di compiti nel migliorarlo situazione una il miglior utilizzo di quei donatori definiti marginali cioè quelli che una volta venivano scartati persone anziane persone che hanno io venni border line oppure il fegato borderline e quindi
Migliori studi su questi
Deceduti che si trovano nelle rianimazioni per poter capire chi scartare chi non scartare dal prelievo oppure anche l'utilizzo dei donatori viventi che può essere fatto per il rene e anche fatto per il fegato qui a Padova è stato recentemente fatto
Grosso lavoro in questo settore e anche dobbiamo dire che l'adozione di tecniche e mini invasive laparoscopica e per il prelievo di di rene
Rende ben più praticabilità ma anche il prelievo da vivente per poi la solidarietà familiare e grande
Sono tanti il familiare che son disposti a donare un rene
A un congiunto ammalato si può vivere con un rene solo questo è dimostrato da migliaia e migliaia di donatori i denti che sono stati tenuti in osservazione noi oggi cosa possiamo aggiungere possiamo aggiungere che con la la chirurgia laparoscopica
Il trauma di questo prelievo si riduce e questo va a beneficio è a dispetto del donatore
La settimana scorsa qui noi abbiamo fatto un prelievo di un rene da vivente per via laparoscopica il malato in sesta giornata il malato anzi il donatore
Malato il il trapiantato che sta bene ma è ancora ricoverato perché c'era ovviamente adesso il seguito e il donatore in sesta giornata andato a Venezia quindi questi sono piccoli se volete
Motivi di miglioramento che fanno vedere che anche il medico può fare qualche cosa e ma più di tutto è il ricercatore che vede supplire a questa mancanza attraverso la ricerca di organi artificiali ovvio artificiali e veniamo al nostro tema no xenotrapianto cenno trapianto
Il trapianto tra individui di specie diversa
E questo è una situazione che configura delle barriere geneticamente importanti i vantaggi potenziali quali sono
Intanto che di è una fonte illimitata di organi e quindi quelle più grandi liste di attesa potrebbero azzerarsi e poi che e possono essere sempre più riccamente stiamo parlando della nel delle motivazioni che hanno portato a questi studi possono essere anche eseguiti degli aggiustamenti genetici per avere organi resistenti a fattori infettivi
Possono essere utilizzati come trapianto ponte quando anche anche in nell'attesa di un uomo trapianto ceduto al pianto
Da cadavere prima che l'individuo de ceda può avere un periodo di settimane o mesi in cui può sopravvivere con questo tipo di trapianti questa è la storia del dello xenotrapianto vedette
Di solito è stato usato
è un primate lo scimpanzé o il Babuino dopo
Parleremo dei problemi che vengono dall'utilizzo dei primati ma è stato usato anche vedete nel novantadue un cuore di maiale però è stato rigettato dette quasi subito mentre del primate abbiamo delle sopravvivenze
Anche prolungate per mesi
Il
Il vantaggio che ci sarebbe nell'utilizzare il primate è che vi sono rigetti diciamo più simili a quelle che ci sono tra un uomo e un uomo però vi sono degli svantaggi
Che sono la trasmissione di malattie virale potenziale
Tutti sanno che Lai se imputata di estrarre sorta nell'ambiente dei primati
E inoltre che i per avere dei primati di dimensioni adeguate all'uomo entriamo in una fascia di primati che possiamo considerare specie all'estinzione
Cioè i grossi primati quindi problemi etici e anche problemi che comunque può anche volessimo allevarli sono di alti costi di lunga durata della gestazione quindi non è facilmente praticabile mentre in maiale
Questo povero animale che viene di solito usato
Nelle polemiche andava far fare vedere questi
Questi uomini maiali usati diciamo quali vantaggi a che ha delle somiglianze anatomiche fisiologiche importanti e soprattutto che e già entrato in una catena di montaggio alimentare diciamo per cui viene utilizzato routinariamente viene allevato a bassi costi
Non vi sono quindi problemi etici sostanziali
E può essere anche esso portato da allevamenti chili in cui vi siano le esclusioni determinati agenti patogeni
Però vi è uno svantaggio che il rigetto il per acuto
Questo deriva dal fatto che quando vi è una reazione
Tra antigene anticorpo collegata una differenza di specie si attiva il complemento e viene una coagulazione nell'interno dell'organo
Del sangue e quindi l'organo nuove immediatamente
Noi queste cose le possiamo vedere nell'uomo stesso se facciamo un trapianto che sia Biserni incompatibile cioè con i gruppi sanguigni incompatibili
Il motivo vedete legato al fatto che in questa
Riunione tra antigene anticorpo si attiva il complemento e si depositano le piastrine all'interno dei vasi e quindi in questo modo abbiamo la coagulazione
Intravascolare
Questo avviene perché nella ontogenesi degli esseri viventi a un certo momento sia realizzato un un bracco una differenza tra tutto una serie di animali che esprimono un determinato antigene
Contro cui
Quelli che sono venuti dopo di essere venuti dopo hanno degli anticorpi pre formati quindi tra questa serie di denti e questa vi è questa differenza che porta a rischio della coagulazione del sangue immediata
E questo serve anche a spiegare perché si deve
Operare diciamo su questi animali se si vuole introspettiva arrivare un domani a
Agire sull'uomo
Ecco cosa succede quando viene fatto uno xenotrapianto vedete che immediatamente dopo la rivascolarizzazione otto sembra così ottimale avviene questa formulazione dell'interno dei vasi questo il rigetto iper acuto
In cui abbiamo delle emorragie attorno ai vasi perché i vasi non riescono più attenere diciamo non hanno più una loro capacità di contenzione del sangue all'interno perché si sfaldano i rapporti tra le varie cellule endoteliali vi sono degli aggregati
Di Cellule polimorfonucleati abbiano un'emorragia interstiziale ebbe ma e l'organo viene a essere mortificato in poche ore
Nell'uomo
Noi abbiamo una proteina la Dassault che impedisce al complemento di attivare questo meccanismo di deposizione delle piastrine quindi
E l'acqua che è nata l'idea di condizionare geneticamente dei maiali in modo da far riprodurre questa proteina che impedisca
Il rigetto iper raccolto cioè questa coagulazione intravascolare
Quindi ecco che la sequenza genomica che produce la proteina Duff
è stata prelevata è stata introdotta nell'interno di un ovulo di maiale riempito e qui due milioni di maiale praticamente e capace di si sviluppa e si produce quello che si chiama il maiale transgenico che è capace di produrre la proteina adatte e quindi l'organo di questo maiale
Non attiva il meccanismo della coagulazione intravascolare
Ecco la differenza quindi vedete tra un cuore trapiantato senza questa produzione di proteina bassa
E il cuore trapiantato invece con questa proteina che inibisce il rigetto iper acuto si vede a vista anche perché non è un tecnico specifico alla differenza tra il tessuto vitale della figura di sinistra e quello invece mortificato
Della figura di destra
Ed è anche stato provato in questo studio pubblicato nel Duemila vedete che nel trapianto di cuore orto topico da maiale a primate utilizzando maiali transgenici si è avuto una sopravvivenza media di quattordici giorni
Con un caso di rigetto iper acuto quindi in un caso diciamo non è riuscito il condizionamento
Alla della della proteina Duff negli altri cinque casi si e questa è la media ora sono valori bassi possiamo dire sì però sono un fatto già importante perché un passetto nella e all'uso del cuore come trapianto ponte in attesa di avere poi
Un organo diciamo più adatto ci si può arrivare e anche c'è da dire che in parallelo comunque va avanti il cuore
Artificiale invece che può ottenere le stesse cose quindi si tratterà di vedere quale dei sistemi può arrivare prima da vere eventualmente il compito di un di un tratto di un trapianto ponte
Ora a Padova ci siamo dedicati a questo studio perché ha paura
Perché abbiamo delle ambizioni che davano sempre
Così espresso dalla della nella nostra attività clinica nel settore dei trapianti
A cominciare dal primo trapianto eseguito da Gallucci
Poi il primo trapianto di cuore rene che è stato eseguito dall'ottantasei anche il pancreas isolato in Italia per la prima volta è stato fatto a Padova come il trapianto di fegato da vivente
Recentemente anche il trapianto di epatociti cioè per cercare di condizionare una malattia genetica metabolica
E poi la nostra diciamo attività trapianti Istica nel Veneto
Vedete si è sostanziata anche in questa grande crescita dell'organizzazione del prelievo
In questo momento il Veneto con la Toscana decolla Emilia si colloca ai vertici della organizzazione del procura mento di organi
E vedete che a Padova
Abbiamo tutti gli organi sui vari colori rete cuore fegato rene pancreas polmone tutti gli organi vengono trapiantati
E e ci si è attestati ormai su dei valori che vanno centottanta e duecento circa valori di trapianti eseguiti all'anno quindi e Padova ha investito molto sul piano organizzativo e scientifico e clinico in questo settore inoltre oltre l'interesse clinico appena esplicitato
Abbiamo dei rapporti con l'Università di Cambridge dove è stato creato questo maiale transgenico per la proteina da quello che usiamo noi altri ne sono stati anche prodotti anche in Italia vi è un gruppo di lavoro Roma e Bologna eccetera che produce dei maiali transgenici per la danza
E poi abbiamo delle disponibilità logistiche ad Agripolis in cui abbiamo pensiamo di sì alla grosse possibilità operative
In quest'area cioè la facoltà di Veterinaria è importante perché da una sicurezza di gestione della ricerca anche secondo quelle che sono le regole che ormai da comuni non solo la comunità europea ma il buonsenso
Consiglia di avere quando si sperimenta sulla mi male inoltre vi sono degli istituti come lo Zooprofilattico ad alta caratura tecnologica e scientifica Diellas facoltà di agraria con la zootecnia
E quindi noi pensiamo che questa sia una zona di sviluppo in cui probabilmente molte altre imprese di tipo scientifico del settore biotecnologico dovranno svilupparsi e potrà essere un vero polo di sviluppo di occupazione nel nostro territorio
Le risorse tecniche scientifiche che abbiamo potuto raccogliere sono appunto di tutte le varie facoltà coinvolte
Conto e anche la risorsa di mezzi messi a disposizione dall'azienda ospedaliera di Padova il laboratorio dall'azienda stessa
E le collaborazioni in atto oltre a quella con l'Università di Cambridge con l'Istituto di medicina sperimentale del CNR e con l CBA il Centro di biotecnologie avanzate di Genova quindi la
La gestione diciamo di questo potenziale di ricerca avviene attraverso questo consorzio
Che è stato curato tra la Regione
L'ospedale l'università
La Fondazione per l'incremento dei trapianti di organi e il colorito e così e si chiama il consorzio che gestisce praticamente amministrativamente anche diciamo sul piano dell'operazione scientifica lo studio
Sono stato ottenute le autorizzazione eseguire questo studio nel trapianto da maiale transgenico a e primate
Sono stati investiti notevoli risorse per realizzare lo stabulario laboratorio di Immunologia con forte contributo dalla Cassa di Risparmio è stata trattata la sala operatoria e è partito
Questo progetto basandosi su del personale che è stato impiegato nuovo personale a contratto oppure con consulenza
E se voi vedete di vario tipo veterinari chirurghi biologo molecolare biologo esperto in comportamento animale tecnici di laboratorio stabulari visti investigativa sono tredici persone che lavorano in questo in questa attività come nuovi assunti diciamo
E oltre a questi naturalmente vi è una forte stacco di invece persone di ricercatori
Di tutte le tipologie da chirurghi anestesisti immunologico veterinari nato a patologie virologi
Biologiche appartengono invece all'università o all'azienda ospedaliera e che quindi operano e anche l'Istituto zooprofilattico e che vengono impegnati nello studio su questo progetto
Il progetto che cosa sì e propone di verificare come controllare il rigetto che avviene dopo il superata la fase del della mancanza di coagulazione diciamo e quindi di provare vari protocolli che io ora non sto a specificare più di tanto ma vari agenti immuno modulatori immuno soppressivi per far sì che una volta superato questa rigetti per acuto vi sia una lunga sopravvivenza
Dello xenotrapianto
I reni vedete qui beh prelevati in blocco per Fusi
Vengono poi trapiantati è questa il campo alla fine del del trapianto
Noi nel nostro studio il primo studio che facciamo il trapianto di rene in primate arreso a metrico cioè dopo aver tolto i due regni in maniera che la sopravvivenza del primate legata solo al funzionamento dello xenotrapianto vengono controllati quotidianamente con un attento monitoraggio come il doping si vede la vascolarizzazione si sviluppano quindi nuove competenze anche nello studio di questi fenomeni di rigetto maniera funzionale abbiamo eseguito i primi due steppe diciamo in questo studio che uno lo studio con la ciclofosfamide la ciclosporina e qui vedete altri lo steroide gli Harlem vedete
Raffigurate le sopravvivenze di questo primo lotto
E qui il l'ultima riga il
Il primate
E lo xenotrapianto eseguito più lungo sopra vivente con René
Nel nel mondo vedette comunque che vi è una certa variabilità destato un rigetto iper acuto nonostante diciamo condizionamento transgenico però detto che vi è una notevole mediamente questa che
Una non serie con una notevole sopravvivenza abbiamo poi eseguito uno studio con metotrexato e e ciclosporina
Cioè ottenendo delle sopravvivenze inferiori tutto sommato
Dimostrando che certi schemi farmaco cinetici proposti dal da studi eseguiti dagli Stati Uniti non erano reali ma anche gli aspetti negativi di uno studio cioè il dire che certe cose vengono portate non sono aderenti al vero fa parte della verità scientifica che gli studi devono portare
Quindi voi potete vedere anche per sfatare il fatto di queste sofferenze che vengono eseguite questa è una delle nostre scimmiette operata con uno xenotrapianto qui queste la scimmietta a due mesi dal trapianto vedete che
Non
Non ha segni di sofferenza può muoversi può fare una vita normale ovviamente quando subentra la fase della rigetto che porta la sofferenza dell'animale e questo deve essere sette e viene sacrificato in prima di avere una sofferenza importante il motivo per cui ce l'ho con i primati l'ho detto prima cioè noi abbiamo questo solo animale che simile alla specie umana per poter studiare realmente come si può diciamo superare la fase del rigetto diciamo non iper acuto ma del rigetto acuto
I risultati scientifici sono stati su una serie di relazioni su invito comunicazione a congressi nazionali anche sette comuni
Sì internazionali tesi di laurea questo lo cito per far capire che la ricerca e produttiva
Quanto distante l'applicazione clinica è ancora distante abbastanza perché vi sono ostacoli immunologici
Fisiologici e virologi si che sono in fase di studio in questo momento nell'ambito della nostra struttura anche oltre che in altre strutture ma quali sono le potenziali applicazioni cliniche vedete malattie che possono avere vantaggi sono il diabete cioè il trapianto di isole la malattia l'HIV
Le ustioni importanti vedete i parchi sono l'Alzheimer molte malattie cerebrovascolari Varalli
Anti insufficienza epatica fulminante
Con attraverso il fegato di o artificiale sul fegato più artificiale si è parlato avvio Nova due anni fa
Era stato presentato modello di questo fegato appunto con una con le cellule mantenute vitali che possono depurare
Un insufficienza epatica acuta cosa possiamo dire che a distanza di due anni lo studio ha portato a questa
Dimostrazione che commissariato più artificiale con cellule di maiale i cinque è un cinquanta per cento di maggior probabilità di sopravvivenza delle pratiche fulminanti
Nei pazienti che a cui venga applicato quindi questo risultato clinico immediatamente evidenziabile immediatamente sensibile altri studi sono in corso sono stati fatti sulle insulae pancreatiche
Questo è
Vede che è una norma glicemia nel nel non private con diabete spontaneo da oltre ottocento giorni quindi N con tecniche di micro incapsulamento che aggiunge un altro elemento di tecnologia
Interessante diciamo a quello dello del condizionamento genetico
Questo è l'ultimo studio ha comunque sulle cellule nervose
Anche di solo studio autorizzati dall'FDA negli Stati Uniti per curare malattie importanti il Parkinson vedete oppure la Corea di Huntington
Però anche vedete il l'epilessia focale quindi vi è tutto un settore di malattie che può avvalersi di questi studi l'importanza dello xenotrapianto ed importata poi da questa che positiva vedete che fa vedere come le pubblicazioni scientifiche
Con lo sullo xenotrapianto sono in continua aumento nella negli ultimi anni
E quindi questo a dimostrare che il settore di studio un settore importante in un settore in cui le sedi
Tecnicamente avanzate non possono sottrarsi e anche quelle che hanno delle risorse perché è chiaro che queste sono studi che comporta un utilizzo di risorse importanti
E io credo che spetti indubbiamente alla le regioni le sedi che hanno le competenze scientifiche e le risorse necessarie il compito di mantenere di mettere l'Italia al passo
Con le ricerche che vengono fatte negli altri Paesi avanzati questo anche perché la conoscenza del controllo di quello che può essere ottenuto con l'osceno trapianto ebbene che l'Italia lo regali a se stessa sulle proprie forze ecco le proprie conoscenze piuttosto il dovere per l'ennesima volta essere un Paese che eredità conoscenze eseguite altrove accettate per quello che sono non controllate e quindi essere un po'un paese diciamo compratore piuttosto che un paese
Attivo ricercatore nel settore
Vi ringrazio
Grazie non sarà ancorata al pesto padre interessantissimo sul problema dei xenotrapianti
Su quale penso potremo tornare poi in sede di discussione alla fine delle altre ragazze chiudiamo subito la parola la seconda relatrice la professoressa Aurelia Sargentini dell'Istituto superiore di sanità ci parlerà dell'attività del gruppo di lavoro del Comitato nazionale per la biosicurezza delle vie technology
Veramente vediamo su velenosa io volevo approfittare per dire che alcune delle cose che dirò sono state già dette dal professore Ancona mi scuso di questo
In alcuni casi sedi si dice repetita iuvant in questo caso forse repetita gli ho annoiarlo
Però sono in un certo senso costretta a dirle perché sono le cose
Su quegli argomenti su cui si è basata tutta la discussione di questo gruppo di lavoro cui produzione Ancona partecipa e e quindi e poi hanno portato a a certe proposte di decisione della Commissione
Fatti ha detto bene il professore Ancona della carenza di organi e di tessuti umani da trapiantare
Costituisce veramente un limite molto grande per la terapia di elezione di molte patologie umane che non sono affrontabili con altre terapie
Ed in tutto il mondo il numero di pazienti che ogni anno entrano in lista d'attesa lo avete visto nelle curve presentate prima
è estremamente più alto del numero di pazienti che ogni anno possono essere trapiantati e questo divario il problema è che ogni anno tende ad aumentare e per gli organi salda vita è drammatico
In Italia pur esistendo varie differenze ancora fra le varie nelle regioni del nord e del sud del nostro Paese
Possiamo notare che questo divario è confrontabile con quello che c'è negli altri Paesi della Comunità europea però questo non è che ci consola perché questo
Distintamente preoccupante
Se si pensa che nell'anno due mila i pazienti in lista di attesa per un trapianto nel nostro Paese erano circa novemila
La maggior parte in attesa di reni è vero ma poi ce n'erano anche molti inattesa di trapianto di organi salvavita
I pazienti trapiantati nell'anno due militanti sono stati circa due mila cinquecento
Ed è certo che molti sforzi devono essere fatti ancora ed il centro trapianti Centro nazionale trapianti che è stato istituito recentemente ed opera presso l'Istituto superiore di sanità
è adoperato tra l'altro con risultati molto buoni e sta lavorando ancora
Tanto più che ancora non è entrato proprio a pieno regime col sta lavorando in collaborazione con le organizzazioni interregionali e regionali per il Corrigan mento per il coordinamento dei trapianti
Tende dico a far diminuire questo divario
Questo significa anche studiare un migliore utilizzo degli organi disponibile quindi stabilire criteri di utilizzo degli organi cosiddetti marginali
Per migliorare le attività di coordinamento a livello locale con l'introduzione di figure professionali specifiche dedicate al coordinamento dei trapianti nelle strutture dove i trapianti vengono inseguiti valutare potenziare la donazione spinte sviluppando dei programmi di educazione specifici
In ogni caso però la richiesta di organi in terapia da trapiantare non potrà essere soddisfatta queste sicuro e queste anche dimostrato negli altri paesi come ha detto il professore Ancona dove tutti gli sforzi possibili nelle tre direzioni delle in quelle sono le principali ma ce ne sono anche altre tutte le fonti sono stati fatti
In questa situazione una delle possibili alternative all'anno trapianto anche se non l'unica per lo meno a livello teorico è con grandi aspettative per esempio creare create le abbiamo sentito anche ieri che era presente nel settore delle cellule staminali è rappresentato dallo xenotrapianti
Che però pone dei problemi di natura molto diverso scientifici l'abbiamo già ascoltato etici e psicologici letali oltreché normativi e procedura
In altri Paesi
Tutte le implicazioni che lo xenotrapianto comporta sono state studiate e sono state programma dal promulgate delle linee guida specifiche per l'applicazione di questa Amendola metodica
Organismo internazionale inoltre quali l'OMS
No se il Consiglio d'Europa
La Commissione europea
Stanno discutendo questo argomento cercano di armonizzare quant'è stato promulgato dalle varie nazioni sia sotto l'aspetto di normativa
Che sotto l'aspetto di linee guida perché un'unica regolamentazione sicuramente offre maggiori garanzie di sicurezza
In Italia il Comitato nazionale per la biosicurezza e le Biotecnologia della Presidenza del Consiglio
A dicembre del mille novecentonovantanove istituire un gruppo di lavoro per studiare le linee guida per la sperimentazione clinica dei vip seno trapianti in Italia
Questo gruppo era coordinato dal professor tanti dal professor Ferrara dalla società
E come vedete era costituito da esperti in varie discipline
La prima cosa che il gruppo di lavoro ha dovuto fare per stabilire linee guida una sperimentazione clinica di uno spettro senno trapianto è stato quello di sì definire che cosa s'intende
Sennò trapianto dell'uomo
E ha definito xenotrapianti una qualsiasi procedura che implichi il trapianto l'impianto o la perfusione a scopo terapeutico in un mio precedente umano
Di fluidi Cellule tessuti e da organi provenienti dal corpo umano
Che hanno avuto un contatto ex vivo con cellule e tessuti o a organi di origine animale ed è pertanto inclusa la procedura del fegato artificiale questo per gli addetti ai lavori alla sua importanza
Oppure Cello lieutenant Sciutti xeno genici cioè di origine animale
Anche se stanzi invito o sottoposti a manipolazione minima
Per manipolazione minima si intende una manipolazione che non porta a un'attivazione e o ad una stimolazione della proliferazione cellulare
Il gruppo di lavoro
Che è stato è chiamata ad predisporre lo lo ricordo linee guida per una sperimentazione clinica è stato unanime nel ritenere che è l'inizio di qualunque sperimentazione clinica dello xenotrapianto
Doveva essere sostenute confortata dei risultati ottenuti da modelli tre clinici in particolare prima di affrontare la sperimentazione nello xenotrapianto nell'uomo
Era necessario dimostrare che gli animali Richet venti lo xenotrapianto sopravvivono per un tempo sufficientemente lungo da garantire una applicazione clinica utile
Dimostrare l'assenza di trasmissioni di agenti infettivi dal donatore al precedente
Prima di elaborare le linee guida il gruppo di lavoro ha discusso una serie di problemi scientifici connessi con lo stemma trapianto tra quali la scelta dell'animale il domatore il problema del rigetto e soprattutto la possibilità di introduzione di nuovi agenti infettivi nella popolazione umana
Ha affrontato altri proprio non ha affrontato il gruppo altri problemi connessi con lo xenotrapianto che sollevano considerazioni etiche antropologiche psicologiche veramente molti di varia natura
Si è iniziato con il discutere sui possibili donatori per uno xenotrapianto nell'uomo
L'abbiamo sentito prima è noto che lo xenotrapianto concordante comporta problemi immunologici molto minori rispetto a quello discordante
Cioè è sicuramente meglio se tra donatore e ricevente esistono maggiori somiglianze compatibilità come il caso Babuino uomo
Il gruppo tuttavia ha ritenuto di dover escludere l'utilizzo di primati non umani
Sia nella fase di ricerca sperimentale sia in quella eventuale di una futura applicazione clinica e questo per vari motivi
I primati di taglia maggiore che hanno quindi organi di dimensioni simili a quello dell'uomo sono una specie protetta non sono numerosi raggiungono l'età adulta in tempi relativamente lunghi
Non hanno una fertilità elevata ed inoltre la loro vicinanza evolutiva con la specie umana rende nella percezione della popolazione meno accettabile i loro sacrifici
Il maiale invece anche se appartenente ad una specie lontana da quella umana a organi dal punto di vista nata Omnitel fisiologico simile a quello dell'uomo si riproduce facilmente e in breve tempo
Il fatto poi che venga sacrificato per fornire cibo anche se una parte minore della popolazione contesta anche la liricità dell'uccisione di animali come fonte di cibo
Fa sì che non sorgano problemi etici se viene sacrificato per fornire una terapia che salva una vita umana
Un'altra condizione che va tenuta conto ed eticità sull'utilizzo degli animali per lo xenotrapianto riguarda le condizioni nelle quali gli animali devono essere mantenuti
E sul modo in cui devono essere trattati durante l'esperimento
Ma questo rientra nel problema generale della sperimentazione sugli animali peraltro poi che è necessario come vedremo eliminare il rischio di trasmissione di zoonosi all'uomo
Almeno per quel che è possibile lo standard di trattamento degli animali per lo xenotrapianto è ben più alto di quello degli animali da allevamento
Oltre a tutte le considerazioni fatte il fatto che il maiale possa essere allargati in ambienti pappa già inflitta far sì che il maiale venga considerato come il donatore più idoneo per lo xenotrapianto nel vuoto
Inoltre anche la spetti immunologico che è stato considerato negli anni passati l'unico ostacolo reali al trapianto di organi di maiale nell'uomo
Sembra negli ultimi tempi attutito dei notevoli progressi nella comprensione nel controllo del rigetto intere acuto e del rigetto acuto vascolare che sono tipici dei trapianti fra specie diverse
Il problema più grave però per l'applicazione clinica dello xenotrapianto R. presentato dal possibile non valutabile rischio di trasmissione di agenti infettivi
Anche in pazienti che hanno subito un anno trapianto è stato più volte evidenziata la trasmissione di agenti infettivi attraverso l'organo trapiantato
In ogni caso dello schermo trapianto non esistono ancora conclusioni scientifiche certe in ordine alle patologie infettive trasmissibili o dall'animale all'uomo in particolare per quanto riguarda i retrovirus
Nel passato la dimostrate insiste esistenza di sequenze retro virali nel genoma del maiale
In grado di effetti infettare ma in vitro cellule umane aveva suscitato molte preoccupazioni nei ricercatori del settore
Fortunatamente a fine del novantanove sono stati pubblicati
I risultati di uno studio multicentrico molto incoraggianti per escludere l'infezioni da retrovirus Porcino in centosessanta malati esposti a tessuto di maiale non tratta
Poi che allo stato attuale il rischio di trasmissione non può però essere escluso anche se oggi sembrerebbe solo teorico
Il gruppo di lavoro nell'elaborare le linee guida si è posto il compito di minimizzare lo ed eventualmente
No in centosessanta malati esposti a tessuto di maiale non tratta
Poi che allo stato attuale il rischio di trasmissione non può però essere escluso anche se oggi sembrerebbe solo teorico
Il gruppo di lavoro nell'elaborare le linee guida si è posto il compito di minimizzare lo ed eventualmente gestirlo per il paziente
Per i contatti del paziente ed eventualmente per tutta la popolazione
Se infatti un virus o un trilione infetta su un paziente esisterebbe una possibilità di trasmissione dell'agente infettivo dal paziente ad altre persone
La trasmissione potrebbe essere non va non facile e forse diversa per patogeni differenti tuttavia non escludibile
Le linee guida preparate dal gruppo di lavoro hanno voluto quindi indicare un contesto tecnico-normativo
All'interno del quale individuare le condizioni essenziali per evitare per quanto oggi noto l'insorgenza di zona oggi e pertanto ha ritenuto che le condizioni alle quali deve rispondere la sperimentazione clinica dello xenotrapianto nell'uomo devono riguardare i centri di allevamento degli animali i centri dove avvengono le eventuali manipolazioni delle cellule i centri dove avviene la sperimenta
Per quanto riguarda il primo punto il gruppo di lavoro
Nell'ambito dell'attuale contesto tecnico normativo per la sperimentazione animale e per l'allevamento degli animali in particolare del suino degli animali geneticamente modificati
Ha proposto regole per l'accreditamento della certificazione dei centri di allevamento e del singolo animale
Particolare rilevanza viene affidata ai programmi di sorveglianza dello stato sanitario dell'animale e dal controllo di tutti gli agenti infettivi oggi conosciute
Il gruppo di lavoro la proposta altresì di regole per i laboratori di ricerca biomedica dove vengono manipolate Cellule Xenon geniche Peluso terrà
Tale struttura delle quali devono essere chiaramente indicati responsabile legale il responsabile scientifico quello dell'assicurazione della qualità
Devono possedere determinati requisiti per quanto riguarda i locali e le apparecchiature
E per tale struttura e viene proposto che si è identificato uno specifico sistema di accreditamento ed un ente incaricato l'ispezione
Per mantenere un criterio omogeneo sul territorio nazionale
E per mantenere i rapporti con gli enti analoghi nelle altre nazioni il gruppo ha proposto che la funzione di accreditamento sia svolta dal ministero della Salute
Che potrebbe affittare affidare l'attività ispettiva all'Istituto superiore di sanità
Il gruppo di lavoro altresì individuato alcune condizioni che si devono verificare prima di procedere alla sperimentazione clinica dello sterno trapianti
Deve esser data garanzia per la massima sicurezza possibile per i soggetti trattati i familiari il personale sanitario per la popolazione in generale
Limitazione all'accesso alla sperimentazione ai soli pazienti in lista di attesa di urgenza Lallo trapianto e per i quali non vi sia altra indicazione terapeutica
Escludendo però l'uso compassionevole
Informazioni al paziente tramite un'opportuna una tessera con numero verde operante ventiquattro ore su ventiquattro per informazioni o comunicazioni da parte sia del paziente che dei medici curanti garanzia di o con una comunicazione corretta dei risultati ai mass media e all'opinione pubblica
In modo da non influire negativamente sui programmi di riferimento e trapianto di organi da donatore cadavere
I centri sede della sperimentazione apparire del gruppo di lavoro dovrebbero essere inizialmente in numero limitato esce il tre tra quelli già autorizzati al trapianto allogenico
E si inoltre dovrebbero essere autorizzati a seguito di verifica di opportune caratteristiche delle sale operatorie dei locali e di degenza dei laboratori e degli operatori coinvolti nello sprint essere in grado di effettuare sul paziente sui familiari sui sanitari coinvolti nello xenotrapianto tutte le indagini necessarie per il monitoraggio clinico infettivologi ecco pre e post trapianto
Avendo la responsabilità di un avvio vigilanza
Il gruppo di lavoro altresì suggerito la necessità di individuare il modello di consenso informato per il paziente
Le modalità operative dell'avvio vigilanza le misure preventive della trasmissione di agenti infettivi e il piano operativo nel caso di insorgenza di se erano di Tonolli cerchio soste
Le linee guida che il gruppo di lavoro elaborato hanno voluto anche suggerire una possibile normativa da promulgare in Italia che in base a tutte le considerazioni più il gruppo di lavoro discusso
Dovrebbe stabilire criteri di sicurezza ed efficacia dell'applicazione clinica
Controlli di qualità per gli studi clinici sperimentali criteri di accreditamento delle strutture sede della sperimentazioni criteri di monitoraggio sanitario
Il gruppo ha suggerito che analogamente a quanto avviene in altri Paesi
Ci sia l'istituzione di una commissione centrale
L'istituzione di un registro centrale degli xenotrapianti e dei registri periferici
L'istituzione di un avvio Banca centrale e di Bío banche periferiche
Il monitoraggio sanitario dei cosiddetti contatti e del personale professionalmente esposto
Un programma di qualificazione continua del personale coinvolto nella sperimentazione
L'aggiornamento della normativa in base ai progressi scientifici
La commissione est seno trapianti dovrebbe essere istituita dal ministro della Salute con sede presso il Ministero della Salute
E componenti dovrebbero essere i rappresentanti dei ministeri interessati ed esperti in varie discipline connesse con il problema dello xenotrapianto
I compiti della Commissione accreditamento delle strutture sedia di sperimentazione ivi compresi gli allevamento degli animali
Autorizzazione dei protocolli sperimentali proposti e già approvati dai comitati etici locali
E sperimentazioni potrebbero iniziare solo previa autorizzazione scritta da parte della commissione non deve cioè essere ma ammesso il silenzio assenso
Ricezione di tutti i problemi a inconvenienti che dovesse Ring sorge nel corso della sperimentazione
Valutazione dei risultati ottenuti controllo dei registi che delle di Obama
Il registro centralizzato degli xenotrapianti dovrebbe essere istituito presso l'Istituto superiore di sanità non per altro ma perché presso l'istituto ha sede il Centro nazionale trapianti
Che ha già collegato con tutte le strutture dove si effettuano trapianti in Italia
Dove devono affluire i dati raccolti dei singoli registri periferici mantenuti e gestiti dai centri sede di sperimentazione secondo protocolli prestabiliti
Il registro deve permettere la raccolta dei dati biologici clinici e personali
Di animali pazienti contatti ed operatore professionalmente coinvolti ed esposti a possibili rischi professionali derivanti dall'impiego dello xenotrapianto
Le indagini epidemiologiche le analisi statistiche il monitoraggio e valutazione dei risultati e degli eventuali sviluppi delle sperimentazioni cliniche
Abbiamo banca centralizzata per gli xenotrapianti dovrebbe essere istituita presso l'Istituto superiore di sanità che può avvalersi anche di strutture esterne tramite opportune Konko o convenzioni ma con specifica professionalità nel campo
All'avvio banca centralizzata devono corrispondere banche periferiche regionali o locali in riferimento alle strutture accreditate per gli studi clinici sperimentali
I compiti dell'Abio banca sono la raccolta e conservazione dei campioni biologici campioni di tessuti Cellule liquidi biologici di animali pazienti
Loro conviventi ed operatori coinvolti nelle singole sperimentazioni cliniche
Le analisi microbiologiche dei campioni raccolte le analisi biologiche monitorare dei campioni raccolti l'eventuale analisi istologica e anatomopatologi
Voglio concludere questa mia relazione con una considerazione che ha fatto il gruppo di lavoro e che ritengo sia fondamentale
Le problematiche connesse con lo xenotrapianto hanno risvolti anche di carattere sociale
è fondamentale che relativamente ai potenziali benefici e rischi venga fatta una corretta informazione per la popolazione
Che deve accettare questa nuova prospettiva terapeutica anche con le incertezze scientifiche ancora presenti ma a fronte di una necessità di organi da trapiantare
Gli scienziati dal canto loro non devono trascurare di proseguire le loro ricerche
Da un lato per rendere questo intervento terapeutico sicuro
E dall'altro per esplorare nuove strade che sembrano promettere possibilità terapeutiche sempre però nel rispetto della dignità e della personalità dell'uomo
Soprattutto bisogna fare oggi attenzione che tutti i nuovi approcci terapeutici non portino nocumento all'applicazione dell'allora trapianto oggi l'unica terapia per la sostituzione degli occhi
Sì
Grazie professoressa Sargentini El Dorado il terzo relatore di questa prima parte della mattinata il professor
GP giocando triste per Ferraro
Che appartiene al gruppo di Genova con cui noi abbiamo che rapporti di collaborazione
E parlerà su iniziative di ricerca dell'Unione Europea sugli xenotrapianti
Ha detto quasi tutti professore Ancona
E io prima di tutto devo ringraziare i più organizzatori che mi hanno invitato a portare il mio contributo per quello che sarà il futuro dopo aver cercato di portare il mio contributo nella commissione che la commissione per la biosicurezza di cui ci ha detto
Moltissime cose del nostro documento la professoressa Sargentini
Vorrei dire anch'io che purtroppo sarò costretto a dire alcune cose che sono state dette sia dal professore alcuna sia della professoressa Sargentini ma quello che vorrei dirvi fondamentalmente che io sono un immuno genetista
Io ho sempre creduto e un numerose note ho pianto e ho sempre creduto nella possibilità
Che ci fosse questo assunto
Pone perché pochi di voi sanno che circa tre anni fa
Sutura sponte shore Review è uscito un articolo una dei più veramente in cui si vedeva chiaramente che il sistema immunitario del maiale era molto simile al sistema immunitario dell'uomo questo è un i motivi che mi ha invogliato a interessarmi a livello italiano a livello europeo della xenotrapianto
Dopo essermi interessato per tanti anni come sto facendo che adesso della compatibilità umana nel settore che mi è stato affidato
Voi potete vedere dalla
Documento che mi sto mostrando ci sono poche notizie fondamentali perché basta che voi leggevate si aprisse un microfono potrei mi Chiara quello che c'è scritto e tradurle italiano scusa
Innanzi tutto questo è quello che sappiamo oggi
Tra qualche mese finisce il quinto programma quadro
E il quinto programma quadro dell'Europa
è un grazie è una
Un documento che è stato molto importante perché ci ha fornito molti e molti miliardi
E questo cui tutti guardiamo perché abbiamo bisogno per fare questo lavoro sugli xenotrapianti Sully animali di tanti milioni
Non le bastano pochi incluso l'ancora fatto vedere il suo centro ma voi dovete rendervi conto di quanto possa col possono costare questi centri e quindi come non noi guardiamo a questo futuro e quello che si sa del sesto programma quadro e questo che la Commissione Europea sta valutando e discutendo proprio in questi mesi in questi giorni e in questi mesi illa sesto programma quadro per quanto riguarda gli xenotrapianti io sto parlando specificamente dei questo nicchia
Che c'è in tutto il sesto programma quadro
E la prima vettura serva finita in dicembre questi sono notizie che vengono direttamente dall'Unione Europea tramite il comitato
Di cui presidente Santi comitato di sicurezza io essendo genio lavorando con lui con lui abbiamo avuto proprio queste notizie in questi giorni e si spera che sia finita entro l'anno e che la prima della Lettura ed ha prima pubblicazioni che potremo vedere su come stava sul strutturato questo nuovo sesto programma quadro ci saranno nel mille e novecento nel due mila e due e saranno intorno al al solito
Periodi vacanza
Non li troveremo i miliardi e le divisioni che saranno date per i singoli settori che questo V sesto programma quadro in questo sesto programma quadro non troveremo di xenotrapianti
La seconda cosa che volevo dirvi che
In nell'autunno del due mila due si potrà incominciare a farle proposte voi potreste dirmi
E qui entrano tanti fattori Chicco non possiamo discutere qui ma mi dite ma perché mi devi dovete venire a dirci che noi nell'autunno del due mila due potremmo poco preparare e dire i progetti se voi avete dei progetti degli xenotrapianti ricordati perché dovete incominciare oggi forse dorati
Cominciare ieri perché quando si fanno dei tuoi grossi progetti che saranno per esempio impostati su alle vere reti di collegamento detenuto il seno trapianti in Europa
Ci saranno ci sia ci vorrà del tempo ci vorranno Derek forze vive ci vorranno un sacco di ore uomo sono probabili in cui ci saranno delle connessioni virtuali tra i vari centri per cui poi voi ci verrete miliardi
Migliaia se voi volete dire anche di ECU ma tanti cioè anch'pari di venti trenta milioni Penta miliardi italiani quindi voi capite che se questi progetti non sono non si parte oggi a farli non ci aveva un vai a fare dei progetti che potremmo fare di qualunque specie sia del sesto programma quadro
E
I programmi saranno legati soprattutto a questi argomenti ci saranno dei progetti integrati ci s'vanno cioè progetti integrati in cui ci saranno tanti gruppi insieme di qualunque natura Pino qui non parlo soltanto il signor trapianti ma parlo anche
Di quello che voi volete di medicina marzo
Facile è difficile rispondere allo stesso tempo
Perché perché sotto il generico nome di cuore artificiale
Ricadono diversi tipi di dispositivi e quindi sarebbe facile rispondere che
La prima volta per ciascun tipo di dispositivo in realtà non è nemmeno così io così semplice nel senso che poi le prime volte si sprecano la prima volta in Italia la prima volta in Europa la prima volta nel Nord la prima volta nel Sud eccetera
E forse non è il caso di rientrare in discussione sul come e il perché questi
Annunci sui giornali hanno queste imprecisioni parlando invece cercando di parlare seriamente per il cuore artificiale
Si deve prima di tutto cercare di darne una classificazione non per rispondere a questa domanda un po'provocatoria ma per capire realmente con questi sta evolvendo questo settore
E anche per capire come l'evoluzione di questo settore
Diciamo l'approccio ingegneristico alla sostituzione per la funzionalità di un organo
Si può inquadrare in qualche modo nel Complesso dell'evoluzione dei trattamenti medici per la classe di patologie legata alla Fellow cardiaca fase terminale
Infatti
Oltre agli sviluppi del cuore artificiale abbia sentito stamattina parlare degli sviluppi dei trapianti eterologa nei
Se ci sono tutti gli sviluppi in corso
Nell'ambito della medicina tradizionale nuovi farmaci e nuovi trattamenti anche di tipo fisico e di elettrostimolazione che intervengono in questo settore
Se poi i l'evoluzione della
Le terapie cellulari e quindi
Lo sviluppo e che stanno avendo e le possibilità che possono aprire gli impianti di Cellole sia staminali sia di cellule muscolare per riparare il tessuto cardiaco in fase terminale
Cominciano però parlare dei dispositivi
Cerchiamo di classificarli innanzi tutto in in relazione
Al primo aspetto che quello del
Legato al fatto che
Il dispositivo meccanico artificiale sia finalizzato a sostituire completamente il cuore naturale si parla in questo caso di cuore artificiale totale
Oppure a affiancare il cuore naturale assistendolo fornendo parte del lavoro delle espulsioni di pompa Caro pompa perso il sangue
Nel caso della sostituzione il Coratti diciamo è totale
è quindi un sistema ventricolare deve sostituirsi al ventricolo destro che il ventricolo sinistro
Ovviamente e destinato al museo permanente
E in questo caso è opportuno
Che la trasmissione dell'Energia
Per azionare il dispositivo venga fatta per via trascritta ANIA e questo è uno degli aspetti di altri aspetti che differenziano molto i vari dispositivi dispositivi duramente per funzionare quando sono impiantate richiedono energia l'energia fornita
Può essere normalmente viene fornita tramite un filo un tubo che attraversa la pelle
E in questo caso si parla di alimentazione per via percutanea
Ma può essere anche
Trasmessa per via transculturale altri mediante sostanzialmente un trasformatore
In aria comprimario include all'esterno del corpo il secondario impiantato in questo caso si parla di
Trasmissione tram spontanea ovviamente i vantaggi della trasmissione tra ascoltarne al suono che e più facilmente gestibile e non c'è una via aperta per le infezioni c'è sempre crea sempre qualche problema gestione del paziente
Va sottolineato anche che gli interventi per i consumi di impianto di un cuore artificiale totale sono degli interventi sia chirurgicamente che psicologicamente molto
Aggressivi quasi devastanti
E
Le domande che ancora oggi ci si pone nonostante si sia arrivati al primo impianto clinica questo è vero
Di un cuore artificiale totale totalmente impiantabile e quale sia l'affidabilità e durata e la funzionalità di questi dispositivi che qualcosa essere la qualità di vita dei pazienti portatori dissi negli organi artificiali
Vedremo poi più in dettaglio
Cosa è successo
Nel campo dell'assistenza diede l'assistenza invece i sistemi sono normalmente di tipo ma ventricolare assistono cioè soltanto un ventricolo generalmente sì valutate nell'ottanta per cento
Dei pazienti affetti da con gesti Marcello si è sufficiente assistere il ventricolo sinistro che è quello che ha sottostà al lavoro più impegnativo che solitamente risulta più danneggiato
I dispositivi di assistenza ventricolare
Possono
Essere impiegati sia per un uso temporaneo permanente
Chirurgicamente psicologicamente l'intervento è molto meno devastante perché rimane il cuore naturale in sede quindi in qualche modo
Uno solo pensa sempre che se anche il dispositivo dovesse avere dei problemi c'è sempre il cuore che come funzionava
In modo insufficientemente adeguato ma sufficiente a mantenere la vita il giorno prima dell'impianto e ancora di e potrebbe continuare a funzionare
Peraltro in alcuni casi l'assistenza mano ventricolare non è sufficiente quindi così devono impiantare due
Dispositivi di assistenza due vado oppure
Si deve ricorrere necessariamente al cuore artificiale totale
Gli usi previsti sono tre principalmente uno l'uso come ponte al trapianto
Fornire c'è un'assistenza garantire la circolazione del sangue per il tempo sufficiente reperire un organo di un donatore
Questa è l'applicazione se vogliamo tradizionale quella che già da più tempo ha trovato spazio nella clinica
Esistono già numerosi dispositivi che poi vedremo inseguito in dettaglio
Che hanno dimostrato come questo sia fattibile con risultati buoni tecnicamente anche se ovviamente
è un tipo di applicazione che non ha grosso impatto in termini
Socio sanitario perché non riesce certamente a moltiplicare il numero di conto di organi disponibili per il trapianto
Né sostanzialmente a migliorare
Il loro utilizzo
Quindi si tratta purtroppo di applicare un ponte al trapianto a un paziente il quale sopravvive
Arriva al trapianto ma si sa già che se qualcuno in lista d'attesa che
Rimarrà fuori perché altrimenti avrebbe potuto prendere edulcorato nato
La la seconda applicazione è quella dell'assistenza cronica sono
Una volta impiantato il dispositivo si può pensare di lasciarlo permanentemente ad aiutare il cuore nelle sue funzioni
Ovviamente i pazienti devono avere una funzionalità residui del ventricolo destro
Sufficiente
In questo caso potrebbe essere opportuna la trasmissione delle energie tra Scutari anch'
E
Se è sufficiente un'assistenza come dicevo prima l'intervento ci psicologicamente molti anche chirurgicamente molto meno devastante dell'impianto rincuorato tale
Su questo su questo tipo di applicazione va sottolineato che recentissimamente poche settimane fa sono usciti i risultati di un grosso studio multicentrico organizzato negli Stati Uniti che si chiama Lacrime eccetto
Che ha effettivamente dimostrato come con un particolare dispositivo applicato in modo
Per l'assistenza cronica si sia riusciti quasi a duplicare l'aspettativa di vita dei pazienti con
Con
Insufficienza cardiaca congestizia in fase terminale sostanzialmente vuol dire qualcosa d'
Tipo spostare la l'aspettativa di vita dai listini dagli otto mesi sei otto mesi Irish quattordici mese circa
C'è poi una terza applicazione che sta emergendo e che a mio avviso riveste un estremo interesse che quello dell'uso del cuore giunto in Val-d'per il recupero del cuore naturale
Le applicazioni di cui abbiamo parlato fino adesso sono applicazioni
Diciamo di sostituzione di
Non di tipo terapeutico il cuore naturale si dà per scontato che
è andato eh no
E danneggiato in modo irreparabile
E questa era una convinzione del dei medici molto diffusa anzi condivisa praticamente da tutti il cuore è un organo che ha caratteristiche tali da un punto di vista biologico
Per cui una volta danneggiato non ha la possibilità di recuperare di ricrescere
Recentemente si è dimostrato il contrario almeno in alcuni casi il cuore
Come altri organi altri muscoli alla possibilità di recuperare la sua funzionalità in qualche misura di rigenerarsi
è emerso quindi un un'applicazione per questi dispositivi specifica che è quella di
Del ponte al recupero vuol dire applicare il dispositivo
Togliere il lavoro al cuore naturale lasciare che sia di cose e guarisca fra virgolette conobbe un'opportuna terapia medica
E poi riprende le sue funzioni rimuovendo il dispositivo dal paziente chiaramente in questo caso la qualità della vita che si recupera
Assolutamente ottimale
Il dubbio di sono innanzitutto legati alla scelta dei pazienti i quali pazienti possono recuperare in questo modo e quali no
Come avviene questo non recupero che viene definito inversa per modeling del miocardio
Molti studi sono in corso dove ci stanno dei si sta dimostrando che c'è tutto un assegno una serie di eventi sia a livello morale sia a livello anche di espressione genica sia a livello cellulare che spiegano che cuore
Messo a riposo effettivamente mi riposo induzione del
Dei cambiamenti che portano al recupero e alla rigenerazione del tessuto cardiaco
In questo quadro qual è il mercato potenziale possibile
Per
Questo tipo di queste classi il dispositivo
I pazienti che hanno serio cardiaca congestizio negli Stati Uniti sono quattro milioni virgola sei
Nel mondo sono oltre ventidue milioni di persone ogni anno ci sono due milioni e mezzo di casi
A fronte di questi numeri
Pensiamo che
Il numero di trapianti di cuore che oggi l'unica soluzione diciamo definitiva per queste patologie sono nel mondo circa
Due mila e ottocento oggi dopo aver raggiunto alla fine degli anni Novanta un massimo di quattro mila e cinquecento oggi sono scesi a circa due mila ottocento in Italia
Sono circa duecentottanta mila
I pazienti che pur potrebbero usufruire del trapianto sono sessanta mila negli Stati Uniti e cinquanta mila in Europa
I pazienti che potrebbero beneficiare
Di un re recupero funzionale della circolazione mediante dispositivi sono duecentoventicinque mila negli Stati Uniti e duecento mila in uso negli Stati in Europa
La differenza tra il numero di questi pazienti e quelli eleggibile altro al trapianto è il fatto che già oggi le criteri di ammissione alla lista dei trapianti sono estremamente stringenti
Proprio perché non ci sono organi disponibilità di donatori
Per far fronte a a questa
Diciamo questa esigenza questa domanda
Di cuori artificiali c'è stato una
Enorme
Sforzo sviluppo tecnologico che è iniziato in larga misura è stato condotto negli Stati Uniti a partire dalla metà degli anni Sessanta
Con finanziamenti enormi del National Institute offerto dal sessantaquattro al novantaquattro sono stati stanziati trecentotrenta milioni di dollari
E dopo il novantaquattro gli stanziamenti proseguono a un ritmo di circa dodici quattordici milioni di dollari all'anno nei soli Stati Uniti
Nonostante questo enorme sforzo
Di tutti i progetti avviati negli Stati Uniti ma anche in Europa in Giappone sul cuore artificiale totale soltanto un Progetto
è arrivato a
A a concludersi con una un prodotto che sta iniziando la sua valutazione clinica
Si tratta del dell'abbiocco Delladio mette
Che
Recentemente proprio negli ultimi mesi è stato impiantato su cinque pazienti la settimana scorsa tenerezze
Autorizzato l'effettuazione di altre cinque impianti
Si tratta di un dispositivo che vedete
Questo dispositivo che è costituito da due camere ventricolari
In poliuretano
Azionate mediante un sistema elettro idraulico
Che pompano al posto del ventricolo destro del ventricolo sinistro voglio vorrei sottolineare alcune cose però che questo tipo di dispositivi come dicevo prima se riesco a trovare un punto a favore
Richiede l'impianto non solo della macchina di per se stesse della pompa
Ma anche una serie di componenti accessori che sono una batteria
Un'elettronica di controllo il trasformatore per l'alimentazione e negli altri casi una camera di compensazione volumetrica con relativa porta di accesso
Questo è uno schema in realtà questi oggetti sono notevolmente più grosso
Questo lo volevo sottolineare per indicare come veramente l'impianto di cuore artificiale totale ancora oggi sia una procedura estremamente invasiva
E le soluzioni che ancora oggi abbiamo questo stesso dispositivo che l'unico al mondo arrivato in valutazione clinica è ben lungi dall'essere l'ideale ad esempio per le dimissioni e il volume che risultano ancora
Notevolmente superiori a a quelle di un cuore e una naturale normale e risulta quindi impiantabile solamente impazienti dietro diciamo di grossa taglia di grosse dimensioni non certamente impiantabili nella maggior parte delle persone
La strada quindi del dello sviluppo di un cuore artificiale totale
Interamente impiantabile ha fatto un grossissimo passo avanti sicuramente l'AbioCor costituisce un mai visto nella storia dello sviluppo del cuore artificiale ma c'è ancora molta strada da percorrere direi che in questo caso la competizione con
Altre terapie
Compreso di trapianti da
L'impianto di organi di origine animale è ancora aperta perché i tempi sono lunghi per l'affermazione sia dell'una che dell'altra procedura
Nel settore invece dei dispositivi per assistenza ventricolare
Bisogno ulteriormente classificare i dispositivi in relazione a a una serie di caratteristiche innanzitutto impiantabili età
Dove e quando in che misura essi possono essere impiantati esistono dei dispositivi per l'assistenza ventricolare para corporei cioè che vengono portare utilizzati all'esterno del corpo umano si collegano al cuore all'aorta tramite delle cannule che attraversano il la pelle il torace
Esistono dei dispositivi impiantabili imposizione addominale
Esistono dei dispositivi impiantabili in cavità toracica
Le differenze non su tutt'altro che banali e a mio avviso son differenze che
Li caratterizzano anche in termini di specifiche
Adattabilità ai diversi impieghi di cui parlavamo prima
Anche in termini di azionamento i primi dispositivi erano ad azionamento pneumatico quindi la pompa cardiaca che eran se vogliamo
Una camera ventricolare un sacco ventricolare avveniva compresso ciclicamente per e gettare il sangue da un impulso di pressione Daria
A questi sono quelli nel tempo succeduti sistemi
Ad azionamento elettrico sia esso elettromeccanico delle tre tavolette quindi un motore in qualche modo fa
Agisce sui ventricoli per determinare
L'azione di Pompa
Il terzo aspetto in cui si differenziano e ne abbiamo accennato prima è quello della trasmissione delle energie che può essere percutaneo tra scrutare
Un ultimo aspetto che differenziate per classi dispositivi di assistenza cardiaca e la natura del flusso che essi generano
Inizialmente tutti i dispositivi diciamo cuore artificiale in senso lato che sono stati proposti
Simulavano occorre naturale avevano quindi delle Camere ventricolare che venivano Val volate che venivano ciclicamente compresse rilasciate generando un flusso pulsate ile simile a quello naturale
Più recentemente si è ipotizzato e poi si sono sviluppati come vedremo sono già arrivati valutazione clinica dei dispositivi invece che funzionano come pompe a turbina o centrifuga e generano un flusso sostanzialmente di tipo continuo
E anche questi dispositivi stanno trovando un loro spazio essere si stanno evolvendo in modo estremamente interessante li vedremo più in dettaglio fra un minuto
Come dicevo l'applicazione consolidata è quella del trapianto ma iniziano ad essere effettuati anche al alcuni impianti per assistenza cronica quindi per uso permanente
E da alcuni impianti come ponte recupera recupero in questo senso sono altre variabili che per rispondere al professor Fumero consentono di dire io sono stato il primo impianto darlo per questo tipo di applicazione piuttosto che per quello
Per fare un excursus sui vari modelli disponibili
Vorrei partire da Edward para corporei pneumatici che sono quelli che hanno aperto sostanzialmente la strada alle applicazioni dei cuori artificiali come ponte al trapianto
I più diffusi sono il Tora tette che è questo americano
Può contare oggi su oltre mille cinquecento impianti effettuati
Sotto c'è un poi il sistema del Berlin Arta e della Nedo Sonetti è questo
Tedeschi
Normalmente questi dispositivi pur essendo di tipo più usati le vengono azionato in modo asincrono rispetto al cuore naturale
Impietosi impartite si caratterizza per avere non un dispositivo solo ma una famiglia di dispositivi di dimensioni diverse tra del datarsi alle diverse dimensioni dei pazienti
A delle versioni anche per uso chiamati per uso pediatrico che a mia conoscenza e l'unico da poter fornire
Il boom nel campo invece e questi dispositivi sono tutti per impianto para corporeo
Per l'impianto in posizione addominale
Il sistema il due sistemi più affermati sono il sistema Novacco
Che ha azionamento elettrico
In passato era prodotto dalla Baxter ore è stata ceduta alla Wolde alto una ditta canadese il sistema mette che
Era disponibile in inversione si ad azionamento pneumatico che ad azionamento elettrico dal prodotto dalla Tci e oggi è stato venduto all'attore attacca
Vanta l'uso consolidato come dicevo prima per l'uso
Clinico come ponte al trapianto
Vengono anche loro normalmente azionati senza sincronizzazione al cuore naturale
Il sistema Tci
Nel non può nemmeno essere sincronizzato mentre invece il sistema
Novacco potrebbe lavorare in modo sincrono col cuore naturale
In termini di numeri d'impianto tutti i numeri pubblicati dicevano parlavano di circa tre mila impianti
Con il sistema
Cartney della Tci dei circa
Mille cinquecento impianti effettuati con il sistema
Opaco
Qui potete vedere il sistema Nova con
Il nuovo si può notare Grosso dimensioni intentato posizione addominale preleva il sangue dall'apice del cuore naturale tramite una cannula e lo pompa vita morte
L'alimentazione viene fornita attraverso un tubo
Che esce per via percutanea e viene controllato da un'unità di controllo elettronico da due alimentato da due parti di batteria
Se questo lineare che questa linea oltre a fornire all'alimentazione
Fornisce anche un'altra funzione che è quella di compensazione volumetrica la sacca ventricolare all'interno
Si è ciclicamente Sisa riempie e si svuota ha quindi una variazione di volume che in qualche modo deve essere compensata tramite entrata e uscita diaria dall'esterno
Il sistema Tci
Qui via in versione
Normatica e questa inversione elettrica
Come vedete si tratta sempre di dispositivi notevolmente
Ingombranti
Una risposta in un certo senso a questo problema dell'ingombro e delle dimensioni dei dispositivi è stata trovata
Sviluppando le pompe a flusso continuo
Fra questi
Quattro sono in uno stadio più avanzato il sistema Mazzarri due mila che ha già fatto alcuni le risulta tra impianti clinici e sistema dei becchini della macro mezzo sviluppato con anche con il supporto della NASA per la progettazione della della pompa
La lettura della Torah tette la queste sono in fase di sviluppo
Questi dispositivi so che risultano come li vedremo poi nella fin nelle figure estremamente più piccoli quindi impiantabili direttamente in cavità toracica
Sono i due per ora non sono dotate di trasmissione tra sputano e dell'Energia
E vengono essenzialmente proposti per l'assistenza cronica
Per un uso legato al ponte al trapianto
Non sugli indici sì non non hanno vantaggi particolari a mio avviso non risultano particolarmente idonea invece per l'uso per il recupero perché la mancanza diffusa ostilità
E l'impossibilità di sincronizzare nella loro attività con quella del cuore non permette di gestire in modo ottimale Losco
Lo svuotamento del cuore
Quelle le necessità legate al suo recupero
Ecco questo sistema dei vecchi della ma è come come vedete si tratta di una piccola
Pronto a turbina
All'incolpata all'ingresso al all'apice del cuore
Ai due dotata di influssi metro dell'uscita dottori a collegarsi all'aorta ascendente
Il sistema risulta quindi molto piccolo molto semplice
Alimentato da un filo sottile perché non richiede compensazione volumetrica quindi non ha un tubo
Che può essere guidato in alcuni casi è stato fatto uscire vicino all'orecchio
Per avere
La posizione dell'accesso più facilmente gestibile in termini gestione del
Evitare le infezioni sostanza
Questo invece il sistema zar del due mila
Che è una piccola pompa assiale che viene introdotta direttamente nel ventricolo attraverso un foro nella apice prelievo al Santo rileva il sangue lo pompa direttamente
In aorta discendente
Questi sono sono i due sistemi invece in avanzato stato di sviluppo questo la metto della Torah teca che come vedete assomiglia abbastanza al De Vecchi e questo sistema Arco est
Perché a una pompa di tipo centrifugo
Sì vado le totalmente impiantabili ce ne sono soltanto uno che è arrivato a alle prime valutazioni cliniche sistema Lion Heart prodotto dalla Roma son stati fatti ad oggi ventun pazienti di cui quattordici in Europa e uno di essi in Italia Pavia è una pompa usati le naturalmente ad azionamento elettromeccanico
Che però come vedete richiede l'impianto della pompa
Del sistema di alimentazione impiantabile di controllo della batteria impiantabile del trasformatore della camera di compensazione bolometrica ed è la porta di accesso alla Camera sul prestazione metri
Questo sistema arse vive tu anche questo totalmente impiantabile continuano annunciare canadesi
Sono pronti per il primo impianto clinico ma sono mesi che continuano a lanciare non lo fanno rumors dicono che hanno problemi con la cannula d'ingresso di trombogenicità
Questo però si differenzia da tutti gli altri perché un sistema totalmente impiantabile hanno fatto per essere impiantato in caduta toracica affiancato al cuore naturale
Questa caratteristica chiaramente lo escludo immediatamente dalla possibile applicazione del ponte al trapianto del ponte recupero
Perché sarebbe estremamente complessa la sua rimozione
Due parole sul Progetto italiano stiamo sviluppando dal stiamo lavorando dal novanta al progetto di un cuore artificiale italiano una prima fase che durata dal novanta al novantasei
Si è conclusa con esito positivo si è verificata la funzionalità delle soluzioni scelte
Mediante impianti su annuali di durata tre settimane questo per il Bard di durata sei settimane per il coro artificiale totale in Italia stiamo lavorando su entrambi
è in corso la fase di ingegnerizzazione per raggiungere l'affidabilità e durata richieste
A cui siamo al punto di avere riprogettato comunque regala rivisto la progettazione dei dispositivi li abbiamo sviluppati testati in vitro hanno confermato le caratteristiche funzionali estremamente competitive
Sono pronti per
L'avvio della valutazione su animale che anzi privata è appena cominciata
Per avere un'idea dei dispositivi questo il padre
Costituito da un fondo dello si alloggia nato a Torre elettromeccanico al motore di tipo Brass escono una vite un azionamento motore ad scusate la vita ricircolo di sfere
Che spinge alternativamente un piattello metallico che agisce su una sacca
Abbandonata che ventricolo artificiale vero e proprio che è contenuta all'interno di un pusher
E questi son le fotografie degli ultimi prototipi
Questo invece cuore artificiale totale anch'esso ha un motore elettrico è una vi insistendo a condividere il circolo di sfere
Agisce muovendo alternativamente nelle due direzioni due piattelli di spinta che comprimono rilasciano le due camere ventricolari nuovamente contenute in gusci di Titanic
E quest'anno fotografia del dispositivo
Vorrei fare se
Siamo ancora un minuti tre minuti solo alcune considerazioni sul l'uso della dei Bud
Scusate sulla applicazione dei cuori artificiali in generale
Su diverse applicazioni e sulle esigenze
Io credo che oggi nel definire loro ruolo nell'ambito delle Poste delle opzioni terapeutiche dei pazienti commi patologie cardiache terminale uno debba considerare anche
Aspetti diversi uno intanto la consapevolezza che le mie risorse lì disponibile sono limitate
Il mito degli anni ottanta inizio degli anni Novanta di risorse infinite tutto quello che serviva per la salute doveva essere speso purtroppo
è caduto oggi siamo consapevoli che ci sono delle risorse limitate e quindi si devono fare delle scelte
è un altro aspetto cioè si dà comincia a dare molta attenzione alla qualità della vita più che alla sopravvivenza
Quindi questi son criteri minimi
Da considerare nel valutare la possibilità
Le possibilità terapeutiche offerte dai dispositivi ed alle altre metodologia
Assistenza
Per il recupero sembra che posso trovare indicazioni sia nel caso di cardiomiopatia che di malattia ischemica e che di miocardite che di infarto acuto
Alcune serie fatte indicano due risultati estremamente incoraggianti o sopravvivenza assai anche al settanta per cento insuccesso
Della procedura deve anche del sessanta per cento la differenza fra i due che in questo caso il recupero è stato completo il cuore naturale ha ripreso a funzionare normalmente
In alcuni casi il recupero non è stato possibile e si è passati al trapianto
E va tenuto presente che l'applicazione di Walter recupero può essere visto anche come un moltiplicatore delle possibilità terapeutiche offerte dai cuori
Disponibili se una parte con
Un'azione di recupero del cuore naturale se anche questo avvenisse nel cinquanta per cento dei casi
E nell'altro cinquanta per cento si dovesse ricorrere al tirare il trapianto vuol dire avere curato due pazienti con un solo cuore del donatore e questo è un fattore credo
Abbastanza importante
Ad oggi sembra che per ottenere il recupero sia necessario impiegare vado per due o tre mesi
Io credo da studi che abbiamo fatto e dissimulazioni che gli va debba essere azionato in modo sincrono incontro pulsazione col cuore naturale
E sia estremamente importante gestire la fase che viene definito di svezzamento
Quindi di riallineamento del cuore naturale
In un modo che i dispositivi oggi disponibili ancora non consentono e quindi sarà necessario e non stiamo lavorando a questo sviluppare dispositivi finalizzati allo scopo del recupero che consentano di gestire tutte le varie fasi del processo
Di di guarigione del cuore naturale
Deve essere combinata con altre terapie farmacologiche e si devono vi si sta lavorando per individuare tutta una serie di marker
Che permettano sia di monito narrare il il recupero del cuore naturale in corso sia di valutare quando e come provvedere allo sversamento
Qui mi fermo perché se no andremo troppo avanti vi ringrazio per l'attenzione
Grazie dottor Lunardi per questo quadro completo situazioni sul collo Stiffi sono sentiamo adesso invece come gli artificieri poi amplieremo la discussione principalmente dalle avvenne così fece il dottor Licci inoltre direttore scientifico della
Santa Lucia
Rosso su nero io sono molto onorato di essere qui in realtà l'argomento che gli è stato affidato e certamente molto diverso da quello che ha trattato elegantissimo mentre il dottor Rinaldi
Perché in realtà un esperimento molto ben riuscito perché voi sapete che un rene artificiale oggi connota una tecnica che la dialisi vorremmo dialisi
E che rappresenta un uno dei successi con cui la ricerca e l'interpretazione dei bisogni clinici di una popolazione che inizialmente non si pensava fosse così vasta
E in realtà da questa collaborazione è nato un trattamento più oggi
In realtà risponde alla necessità di molti pazienti voi dite che almeno un milione di pazienti sono in una diagnosi non lilla nel mondo che questa popolazione aumenta fa un cinque o sette per cento annualmente
E che
Al di là di tutto quello che si è detto questa mattina in realtà la popolazione in dialisi una popolazione che oggi arriva in dialisi perché oggi viviamo di più patologie che una volta ci facevano morirà molto prima mi riferisco in particolare Mattia cardiovascolari e al diabete
D'altra parte questa una posizione molto anziana in cui vedo con una certa difficoltà terapie aggressive come può essere il trapianto la lotta al pianto e lo xenotrapianto quindi nato il cardellino Dianese una realtà che rimane e quindi il mio compito oggi è quello di cercare di disegnare visto che non ho voluto anche cercare di essere chiaro per chi non costantemente una affinità culturale e con questo tema un po'la storia di questa di questo sviluppo
Come bisogna ricordarsi che l'emodialisi rappresenta l'unico trattamento ripetuto e che per come diceva molti pazienti si contano almeno novecentocinquanta mila pazienti rappresentare l'unica alternativa
Alla sostituzione dello
Per lo storico ruandesi inizia diversi diversi anni fa in realtà la il passaggio da quello che potrebbe essere una
Esperimento un
Realtà confinata alla ricerca o comunque al salvataggio i quei pochi pazienti che potevano arrivare nel pochi centri che a quell'epoca si interessavano di questo problema eretta nel momento in cui l'emodialisi rappresenta
Il mimo dialisi sperimenta il passaggio da una terapia e per pochi a una terapia per molti intorno al mille novecentosessantasei ribadisce il no
Fu uno di quelli che cosa come voi potete leggere in questa slide il problema l'esperimento era a questo punto non il commento rizzare mal come teorizzare il per molte persone
Qualora io cercherò di fare innanzitutto definire che cosa vuol dire mondiale se non so se tutti voi siete della conoscenza di che cosa ed emodialisi e mi sembra quindi giusto che condividessimo quanto meno
Una conoscenza in comune
Las il secondo punto è quello di disegnare quelle che sono le caratteristiche del e lo sviluppo in in particolare del due ci sono gli aspetti cardine del trattamento e modi olistico uno il monitor che gestisce il trattamento due e il filtro e la membrana che vengono utilizzate
E poi volevo anche fare un un punto su quelle che sono i presenti i tre Enzo presso alto Ali della ricerca manca quelle che sono le terapie
O meglio il cantiere ricettivi delle terapie extracorporea
Vediamo se è un trattamento dicevo discontinuo che sostanzialmente costituito da una monito
Io l'ho sempre qualche problema con la tecnologia tant'è vero che percorsi
Questo una una un tipo di macchina voi ridete con le pompe che azione hanno il sangue queste sono le linee e questo è il filtro il filtro che viene a contatto con un bagno di dialisi
Attraverso una membrana se mi permette
Neve che si fa un trattamento che dura dalle tre alle quattro quattro quattro volte alla settimana con un flusso di trecento millilitri minuto per quello che riguarda il sangue
Con un flusso di chi cinquecento vite minuto per quello che riguarda il gambizzato vi sono diverse tecniche
Che attualmente non abbiamo tempo di esaminare uno di loro
Dei loro vantaggi e anche nei loro svantaggi ma che comunque sono oggi parte della cultura nefrologica
E che sono attuate nei nei diversi centri di emodialisi quali l'emodialisi convenzionale che usa il tipo che utilizza soltanto un meccanismo di tipo diffusivo
Le considerazioni che utilizza invece un meccanismo di tipo esclusivamente convettivo pieno biofiltrazione che è l'ultima nata che viceversa riesce a mixare condizione e diffusione
Parliamo di macchine tutti questi sono aspetti che sono stati oggetti di sviluppo tenete conto che le macchine oggi sono macchine tecnologicamente molto avanzate oggi non si muove più per la dialisi tenete conto che la dialisi una volta era un trattamento ad altissimo rischio tant'è vero che la mortalità interviene il sigaro presenta uno score
A quel tempo non si parlava certo di qualità di qualche scivolata SMA rappresentava uno dei temi che si dibatteva oggi morire in dialisi e un incidente tanto quanto può essere per chi come ciascuno di noi può essere investito da un'autovettura mentre cammina per strada quindi il grado di tecnologie di sicurezza oggi regolarmente molto importante
è evidente che sostanzialmente il verbo punizione è stata sia nell'ambito della preparazione del liquido di dialisi sia nel tipo di tampone che inizialmente aveva accettato ma che dava tutta una serie di problemi di ordine cardiovascolare e che oggi e il bicarbonato
Nella evoluzione nell'introduzione prima della evoluzione della trattamento dell'acqua
Fino ad arrivare a dei sistemi in cui l'elettronica ha ha fatto la parte delle delle donne nonché ai la personalizzazione del trattamento l'introduzione delle nuove tecniche che vi accennavo prima
Per infine alla cerca alla ricerca sulla personalizzazione del trattamento al monitoraggio on line di diversi parametri lì al possibilità di invio Figo biofeedback cioè della possibilità di
Correggere i parametri in macchina sulla base dell'andamento dei parametri paziente
Inizialmente i componenti su cui ci fu un un primo interesse che certamente sono vitali che sono tuttora presenti naturalmente in forma molto
Nell'ingegneria Ytzhak avevano
Però il componente relativi alla pompa di Paolina letalità viene dato per mantenere l'antico colazione alle pompe di San questa una pompa biologico della prima versione
E al costruzione di particolari segmenti di linea quali incrocio l'attore che me lo permettono villa rilevazione della pressione
Questo sono diverse macchine che fanno parte
Di una storia una storia che avuto ignorando la uno del centro di riconosciuti al mondo per la capacità innovative voi sapete che ignorando le riconosciuta come la Silicon Valley delle motivazioni e tale
E ancora
Io ho l'onore e l'onere di per rappresentare l'unica ditta che è rimasta
Sul mercato l'unica ditta italiana che era bello che rimarca s'è rimasta sul mercato della dialisi ma c'è rimasta anche con un grado di in innovazione che la dialisi ancora oggi perché per esempio l'innovazione fatta dal gruppo svedese che si dilunga che si chiama Gambero voi vedete come a partire dalla dal pannello di sinistra che alla prima macchina voi vedete ha un colpo d'occhio molto rapido quale grado di evoluzione sia andata prossima
Di il liquido di dialisi voi tenete conto che i flussi di cinquecento millilitri minuto per la dialisi che dura tre quattro vorrei capito che la quantità di acqua che necessarie norme quindi ed è di poter riutilizzare il liquido di dialisi ha sempre rappresentato una aspetto di evoluzione e questo è stato uno dei primi sta
Una lo scopo è importante è stato fatto dalla bianco negli anni passati in cui la rigenerazione veniva anche qui fatto con un sistema sorde
Incidentalmente questi erano sistemi perché permettevano per la prima volta la possibilità di far dialisi a casa o di fare dialisi qualcuno arriverà anche sulle roulotte
Questo un'evoluzione molto interessante sempre della per cui in cui la macchina in realtà aveva un circuito idraulico disposto questo evitava la possibilità che la macchina potesse contaminarsi che questa contaminazione si potesse in qualche modo ripercuotere sul paziente
Credo proprio che questa è l'unica macchina esistente oggi non è più venduta perché parliamo di una decina di una quindicina di anni fa ma è l'unica macchina in cui stilisti a fare un circuito idraulico rispose
Successive evoluzione sono state poi nel incorporare villa emodialisi con l'utilizzo di di avvisato di a base di bicarbonato
E quindi con l'introduzione lo vedremo tra un attimo delle membrane d'altro per unità macchine che avessero un controllo dell'ultrafiltrazione
Un'altra aspetti importante è stato più l'introduzione degli carbonato di sodio bicarbonato e da un punto di vista di tampone il tampone più fisiologico ma il problema del bicarbonato e che favorisce la crescita batterica non solo ma il bicarbonato che nell'ambito del formulazione del liquido di dialisi della del del del dell'esatto e sempre associato con calcio
Può precipitare quindi per esempio questo è una macchina che attraverso un sistema intelligente di tipo meccanico riusciva a fortemente ridurre questa possibilità
La Fresenius solo al deriva fra le prime caratterizzato un aumento che permette di monitorizzare in maniera più affidabile le la pressione quello che del del circuito dialitico e aveva un single passa un vero single passa con controllo dell'ultrafiltrazione di tipo volumetrie e se vuole dare un'idea che chiaramente possono soltanto per la brevità del tempo
Per un'immagine importante di quella che l'evoluzione che nasce nell'ambito di una compartecipazione fra quello che la necessità da un punto di vista clinico la tecnologia che può essere messa in campo dall'industria e lo sviluppo insieme ai gruppi di ricerca questo per esempio è stata la lo sviluppo da parte di gruppi svedesi che è stata in realtà anticipata anche da noi dei sistemi modulari cioè a seconda delle utilizzazioni la macchina poteva essere implementata con sistemi che da un punto di vista modulare avevano una completa biocompatibilità questa è un'altra macchina che è stata messo a punto in Italia richiedeva la caratteristica importante di permettere trattamenti ad alta efficienza
Queste sono macchine ad alta tecnologia
Del becco questa e una macchina che permette la monitorizzazione on line per l'adeguatezza di politica e questa una macchina che permette il trattamento di rigenerazione dell'ultimo sul tratto di cui parlerò tra
Ma è un aspetto molto importante della sala dialisi oggi è quella di tenere sotto controllo macchine che spesso sono fatte da produttori diversi e che però sostanzialmente devono coincidere convergere su un'esigenza che quella di avere informazioni
On line da nel corso del trattamento questa è una azienda italiana che ha sede a Milano che si chiama sino ad che ha avuto l'intelligenza di Ettore appunto una Cuba Sol da cui i dati acquisiti nomi diversi ma che non possono essere canalizzati Suso sta che può profilare i vari parametri in corso di dialisi
L'altro punto importante di sviluppo è stato quello legato al l'immobilizzato
Questo è storico è stato questo signore che ha messo a punto un sistema che a quell'epoca era costituito da membrane cellulari osé che e la veramente
Oggi sorridiamo ma teniamo conto che questi erano veramente dei pionieri
Questore il dottor scenda che salvo improprio diritto ma quelle che salvo furono in realtà o gli esempi che creavano quell'interesse anche se voi vedete che razza di filtro che veniva completamente riempito di sangue
Prima della dialisi perché se il sangue del paziente fosse passato in un volume del genio di sangue moriva nella fase di Trani
Da questi esperimenti perché così sono siamo arrivati
Ha dei concetti di tipo di fisico e di Radiologia molto importanti oggi noi utilizzando delle membrane a fibre cave su cui nota tutta una serie di aspetti legati sulla parte il sangue alla formazione di
Formazione di interazioni all'interazione fra le proteine e le cellule del sangue e la membrana agli effetti che questa formazione polvere sugli strati cosiddetto stagnante illustrato invece di flusso
Questi aspetti fanno parte di quel concetto di dio compatibilità di cui di potrà solo accennare ma che hanno fortemente condizionato gli aspetti di evoluzione proprio perché oggi siamo come diceva giustamente legata il Stefano Rinaldi oggi noi siamo legati tanto più nella dialisi ad assicurare non solo la sopravvivenza ma la qualità della vita di questi modernizzati e quindi queste interazioni sono rappresentano la base biologica per capire quelli che possono essere del possibili effetti clinici
Questo ritorniamo a qualcosa di più leggero sostanzialmente l'immagine del primo paziente che superò i tre mesi di trattamento questo vedete e un filtro fibre cave
Il filtro subentrato e fu una scelta non soltanto basata sull'industria qui voglio porre proprio il problema voglio ma lanciare un messaggio molto spesso le scelte devono essere dei compromessi
E certamente che nella scelta di una filtro a fibre cave aveva dei vantaggi da un punto di vista industriale ma aveva accettato il tempo dei vantaggi da un punto di vista clinico e quindi compromesso di questi vantaggi per l'uno per l'altro
Gli svantaggi delle alternative
Devono essere sempre attentamente valutati quindi maggiore e minore volume di riempimento una maggiore esso Dapporto superficie volume
Il fatto che fosse una struttura che non avesse bisogno di altre sistemi per essere mantenuta in sede come capitava viceversa per me per i filtri a membrane
Piatte
La possibilità di aumentare l'efficienza per i flussi di tipo contro corrente
Una buona e ottimizzarle distribuzione dei flusso sia del liquido di dialisi chiedo il del del sangue e la possibilità di ridurre la perdita di sangue alla fine del trattamento per la possibilità di ridurre il volume Restivo
Veniamo al discorso delle membrane Vendrame bene in maniera schematica si distinguono in cellulosa e che e sintetiche le prime ad essere utilizzate sono state le Ciclosi questa sostanzialmente un'indicazione dice differenza esiste fra le une alle altre
Certamente oggi noi stiamo andando verso le sintetiche questo per tutta una serie di motivi
Che libero mentre Hélène con la possibilità di utilizzare innanzitutto membrane che hanno una biocompatibilità maggiore il fatto di avere delle membrane che hanno per essere sostanzialmente
A maggior permeabilità e quindi a maggior flusso di tipo convettivo permetterà una migliore depurazione
Veramente delle Ciclosi che c'è stato comunque un progresso uno degli aspetti della prima tubulosi che utilizzata che era alcun profana era questa leucopenia il intra dialitica dei primi minuti della dialisi che è stato nel corso di uno sviluppo migliorativo di questa di di questa di questa un fibromi generale è stato come vedete rito
E di fibre sintetiche ce ne sono tante tutte hanno delle caratteristiche di fargli o fa vedere alcune immagini si potesse mettere un pochettino più fuoco ma non so comunque in ogni caso vi sono diversi polimeri questo la Colli Emidio Della gruppo Gambero questa alcoli metil metacrilato del gruppo giapponese della terra questo il Poli sul phone della di diversi gruppi comunque questo rappresentato quello della Fresenius e questo è la posizione di trivelle sessantanove dell'acqua sporca
Quello che interessa in realtà quando uno guarda queste diverso morfologiche sono due aspetti uno la caratteristica morfologica che hanno attualmente una base sulla chimica del Poli metro dello spin lei all'interno
E naturalmente l'altro aspetto e il lo strato esterno sia in termini di porosità sia in termini di profitti Indro fili città e o Indro finiti idrofobiche città
Riempie il caratteristico aspetto in cui a differenza di quello che avete visto prima alla fitta conto-operazione rappresenta che limitato da uno strato sottile di tipo esterno
Rappresenta può rappresentare un un Plas però determinate tecnici Derrick
E c'è un ultimo recentissima lo sviluppo che è legato allo sviluppo di una membrana
Che abbiamo sviluppato insieme a un gruppo tedesco che si chiama via presto che sostanzialmente
Un'altra fibra quella dell'élite sono del gruppo Fresenius che sostanzialmente mantenendo alcune connotazioni funzionali è riuscito a con nel corso di questi sviluppi si è riusciti a minimizzare lo spessore
Questo che cercheremo di analisi e anche un processo diffusivo e quindi limitare lo spessore vuol dire poter fare convenzione ma mantenere quelli che sono i vantaggi della diffusione la diffusione
Voi sapete che e fortemente limitata dall'aumento dello spessore Montella nel
In collaborazione con il gruppo di ricerca in particolare con salvo l'arco
Abbiamo visto ad esempio l'importanza di a modificazioni strutturali e della geometria e delle caratteristiche della fibra sulla mantenimento della uniformità del flusso intera del flusso del compartimento sangue come qui o potete osservare mediante tecniche di tipo con tecnicalità che utilizzando dell'albumina marcato e così pure ci si è arrivati anche al compare utilizzando quelli che sono i flussi di liquido i dualismi facendo cosa interponendo fra le diverse fibre dei filamenti per spaziare per mantenere per evitare che le fibre possano ammassarsi in questo modo perdere le possibilità di tipo diffusivo e questo in uno studio del dottor Rocco con cui attivamente collaboriamo perché dimostra nelle gli andamenti sempre utilizzando queste tecniche ravvivate insomma che lo sia assiale computerizzata dei flussi del liquido di via ma l'aspetto importante della differenziazione fra diciamo così che le sintetico legato come vi dicevo attesta ultrafiltrazione vedete che ai regimi professori che naturalmente vengono utilizzati nella dialisi
C'è una differenza sostanziale e altamente significativa del tra le due membrane
Una differenza che lo sviluppo delle membrane sintetiche ha permesso in termini di quel Fitch enti dissidi
La possibilità di eliminare molte più sostanze di quanto che vengono accumulate nel corso del dell'uremia di quanto non potesse venire viceversa con il il verbale cellulosa e te come co.co.co.
Un ultimo meccanismo che vivono
Vi voglio semplicemente accennare la possibilità che le membrane in particolare alcuni polimeri
Possono solo lavorare per convezione o diffusione ma possono anche Azzollini questa è una immunofluorescenza per un anticorpo anti beta due unico globuline abito due mi comunica si accumula per effetto della perdita della
Funziona in un torneo del rene voi vedete come in realtà il questo filtro che uno di quelli di cui ho fatto vedere l'aspetto morfologico voi vedete come in realtà possiamo determinare anche il tipo di la la diciamo la la sede in cui questo assorbimento avviene che in questo caso negli strati più interni della fine
Un ultimo aspetto su cui alcune aziende e questa è la meditazione sempre di Mirandola si è attestata nella possibilità di sviluppare prodotti intermedi filtrati nonché macchine per il trattamento dell'insufficienza renale acuta in rianimazione
Bindi accennavo a e
Volevo parlarvi alcuni traendo uno dei problemi su cui noi stiamo lavorando che fa parte di un gruppo di un progetto della Comunità europea la possibilità di
Valutare le nanotecnologie nella messa a punto dei filtri di emodialisi con sostanzialmente la possibilità che in emodialisi questo promossa fornire un vantaggio sia della rimozione di tossine polemiche via nella miglioramento dello biocompatibilità
Non posso entrare nel un discorso delle nanotecnologie sostanzialmente questo è uno dei modelli su cui stiamo lavorando in collaborazione con un gruppo
Svedese voi sapete benissimo che queste strutture sono strutture che si possono a replicare
In maniera estremamente affidabile come ancora una serie di problemi da superare quali ad esempio la sensibilità che molte di queste strutture hanno ai mille trattamenti di sterilizzazione
Che vengono comunemente fatti dicevo che uno degli aspetti importanti che stiamo valutando sono quelli della risposta in termini di integrazione della membrana
Spiritica con i le cellule circolanti con utilizzando naturalmente l'osservazione di quei meccanismi che sono ben noti nell'interazione fra le cuciti chiedendo tempi
Questo per evitare sostanzialmente utilizzando varie
Tipi di nanostrutture cercando di eliminare quello che voi vedete in questa più positiva che l'aderenza delle cellule alle strutture del del dell'esatto
Vorrei infine arrivare Anna un aspetto importante che un aspetto di evoluzione che continua oggi
Che sostanzialmente che parte del concetto di personalizzazione del trattamento dalla necessità di profilare il trattamento e dalla quindi necessità l'opportunità di un biofeedback
Ce ne andiamo a vedere quello che abbiamo potuto migliorare dal sessantanove al novantanove certamente ce l'adeguatezza del trattamento e la tolleranza del trattamento il problema che naturalmente viene fuori e dobbiamo monitorizzare questo e il monitoraggio di questo naturalmente deve saper cogliere il giusto parametro la giusto modo di misurarlo il dove e il come misurarlo il tipo di analisi eventualmente l'intervento manuale o automatizzato
Ci sono molti parametri imbarazzo e nella scelta che possono essere misurati sia a livello paziente sia a livello del trattamento ma nella storia della dialisi ci sono sempre degli come nella storia della del device i dispositivi c'è sempre tutto l'aspetto di mixing fa aspetti di tipo scientifico tecnologica aspetti di tipo pratico che sostanzialmente vanno danno il tipo di invasività
Alla frequenza della misura la correttezza della misura non ultimo ai costi e ancora al significa
Da un punto di vista fisiopatologico del Taranto
Per oggi sostanzialmente questi sono i quattro parametri che vengono che hanno sostanzialmente
Su cui c'è un monito ben e uno e due che viene utilizzato come surrogato del vecchio signore amiche accumulate
E chi è stato sviluppato in particolare anche da noi questi quello viceversa del il parametro del volume plasmatico come indice di ipotensione Inter del mitico la Davison sei ionica basata sulla conduttività e infine il bilancio Terni
Molto rapidamente il monitoraggio dell'urea come vi dicevo è stato sviluppato anche da altri noi ce ne siamo occupati i con un sistema assolutamente innovativo
Chi era la possibilità di una misura in continuo sugli ultrà filtrato plasma
Questo è il sistema che veniva naturalmente gestito da un software che otteneva dei segnali di tipo conducimetro utilizzando una cartuccia di ureasi immobilizzata
E che permettevano una valutazione della concentrazioni di un'ora in
Durante il trattamento dialitico ma la cosa importante e che è stato il frutto di una
Collaborazione molto stazione sul con il Lazoi del CNR di Padova è stata la messa a punto di un modello previsionale che ad un certo punto dopo una fase di apprendimento di questo accumulo di decadimento dell'urea
Permetteva alla previsione delle concentrazioni sia finali sia quello che naturalmente vengono chiamate come concentrazioni di Rambaldi e questo poteva far prevedere l'operatore
La necessità o meno di modificare la dialisi per raggiungere una maggiore efficienza un ultimo aspetto di cui voglio parlare questa innovazione che si sta creando latianese nostri soltanto una terapia di eliminazione anche una terapia di recupero
E quindi ci sono delle tecniche quale questa tecnica che si chiama per Finsoe scenda Garrisi sottigliezze di in cui a quella all'infusione normalmente fatta con delle soluzioni sterile abbiamo oggi sostituito la possibilità di un recupero rigenerando l'ultrà filtrato dopo passaggio in un sistema sonde
Oggi questo sistema assorbente è stato implementato con un sistema che sia giunto a quello che una volta era rappresentato dal carbone biomedicale con una resina sintetica
Questo il carbone che noi utilizziamo in una visione di microscopio a scansione
La cosa importante che possiamo utilizzare dei solventi no ricoperti di quindi possono avere un alto potenziale terza avviamento questa è la regina sempre in scansione cioè non alta capacità di ritenere dettatura globuli sono alla fine
Ci sono delle altre applicazioni della terapia extracorporea una delle cause di mortalità
Più frequenti nella terapia nelle terapie intensive e la sepsi non ci siamo occupati questo argomento anche con i gruppi padovani e in particolare con
Il gruppi di un po'di vicenza
E abbiamo messo a punto questa tecnica in cui all'emodialisi o infiltrazione convenzionale si aggiunge un trattamento di plasma filtrazione questo un plasma filtro con passaggio in un solvente che elimina
Proteina che elimina mediatori associati alla SEC in particolare citochine e mediatori lipidici
Questo è stato il frutto di un progetto dell'Istituto mobiliare italiano che abbiamo completato portando in questa ricerca
Con a frutto con dei prodotti che oggi sono sul mercato sia in termini di plasma filtro sia in termini di macchine sia in termini di cartucce di sorde
Questo e uno dei successi che noi abbiamo un po'tutto raggiunge che di pubblicare questo lavoro sulla dell'organo della Società americana di intensi Weah
Qual è il futuro nella dialisi in futuro nella dialisi e sostanzialmente se noi guardiamo la storia certamente c'è stata un'evoluzione sorprendente
Più sorprendente di quello che forse Umberto Veronesi che è stato
L'iniziatore della miracolo mirandolese poteva prevedere lui stesso lo dice io pensavo di fare il velista dischi derideva il spero
Un numero molto limitato e molto più limitato di pazienti di quanti in realtà oggi
Sono voi in realtà intrattabile
Certamente un continuo interesse nella tecnologia quale quella dell'on line montoni ma bisogna ricordarsi che i pazienti oggi dell'ente che vengono tra dei mondiali si sono pazienti estremamente critici
Se qualcuno di voi ha mai avuto per
Esperienza personale per necessità lavorative visitato una sala dialisi
E più i coloni Cario che una sala dialisi di vent'anni fa in cui pazienti di venti trent'anni erano in realtà la maggioranza
Questo e in parte anche legato all'effetto del trapianto dell'altro pianto in parte legato al fatto che oggi noi tutti investiamo di più invecchiano probabilmente meglio o ad un certo punto per motivi assolutamente non ancora su cui non possiamo ancora incidere la nostra funzione renale decade e abbiamo bisogno della dialisi
C'è un discorso estremamente riguarda il tormento importante sul assoluta
Necessità di aumentare questa alta tecnologia naturalmente tenendo polo tenendo
D'acconto i costi voi capite che questa terapia dialitica ha un costo sociale un costo sociale che va tenuto molto presente
E infine la uno degli aspetti su cui
La ricerca industria si stanno muovendo e la possibilità di nuove applicazioni qual è quello che vi ho brevissimamente accennato come la sepsi e terapie locoregionali nell'ambito delle terapie oncologiche
E terapie di cui non ho accennato ma che sono molto importanti che possono avere un impatto sulla malattia cardiovascolare in particolare sulla Telos Perosi quale lei a sei mesi per le
I due proteine a bassa densità
C'è un aspetto che
è molto importante che va al perché va ricordato che in realtà
L'industria fa un certo tipo di lavoro
Il tecnologo ne fa un altro ma un un aspetto che deve interessare tutti noi anche coloro che non sono non sono nemici e che l'unico modo per capire le esigenze del paziente perché il medico continui a fare il medico
E fare il medico vuol dire capire quelle che sono le problematiche legate alla terapia agli effetti per cui la terapia ignorata e alle conseguenze che questa terapia possano
Vorrei lanciare un messaggio di tipo chiamatelo come volete ma certamente un messaggio forte non so nessuno può o pensare che le innovazioni possano uscire da una scenario che vede sia coloro che lavorano nella scienza cliniche o la scienza basiche sia coloro che lavorano nell'industria per lavoro in maniera
Devono lavorare in maniera sinergica
E questo ce lo dice proprio il miracolo della dialisi perché in realtà nessuno ha mai sviluppato nessun prodotto per la dialisi al di fuori di questa di queste sinergie
è chiaro che oggi non solo le necessità le fattibilità ma anche gli aspetti economici devono essere attentamente valutati più grazie
Grazie ad un certo
Attori artistica nonostante un po'meno rispettosi del relatore naturale però qualche minuto per domande che abbiamo a disposizione prego
Colgo l'occasione per il solo se va be se non addirittura in una sera della post approfitto del fatto che il professor cito tenta vicino al microfono segreto che farle una domanda
Non mi sembra il solito relazioni NATO in modo propositivo
Che ci siano in questo momento sviluppino la possibilità non dialisi domiciliare
Chi come me frequente nei viali stessa quanto terribile sistematicamente per quattro volte settimana presentarsi un centro dialisi
E poi perché come vi sia uno strumento nuovo le persone che oggi sono in viaggio particolarmente anziani con difficoltà anche gli ambulanti in fase quasi terminali sono norme proprio Buratti
Ecco e non mi sembra che ci siano a tutt'oggi nonostante la ricerca tecnologica abbia fatto per la sua grossi passi avanti la possibilità di organizzare il malato in un al domicilio anche se all'inizio accennato a questa possibilità
Pommery cioè una domanda per questo è stato nominato
Dunque certamente il la dialisi domiciliare non ha oggi più molto senso
E questo non non è per un
Una questione di costi perché sostanzialmente le Pierluigi domiciliare
Presente una serie di problemi di accettabilità da parte dei pazienti stessi
Quello che invece oggi sta emergendo mi spiace non averlo detto ma non ho detto diverse tante altre cose molto più importanti per la brevità del tempo
Quel regista emergendo della dialisi quotidiana
Cioè dialisi brevi fatte davanti al televisore
La dialisi così del passato
Ci sono una serie di problemi ma c'è un fortissimo interesse tant'è vero che negli Stati Uniti c'è uno studio della delle navi c'è proprio sugli effetti migliorativi della dialisi quotidiana
Questo come molte cose della dialisi in realtà sarà beneficio ma per un segmento della popolazione di Haiti
Esistono pazienti che però perché non hanno il Parma o perché non hanno casa
O perché non sono in grado di potere in qualche modo raggiungere un minimo di autogestione comunque rappresentano pazienti su cui la scelta rimane la scelta nel centro
Quello che oggi si fa determini di miglioramento dei costi e cercare di alleggerire le strutture ospedaliere
E quindi creare dei gli sfizi di trattamento del cronico dove si possono migliorare il rapporto costo benefici senza obbligare il paziente ad andare in ospedale
Però la sua domanda è in realtà per tutta una serie di di di aspetti che non non abbiamo il tempo di trattare comunque senz'altro una domanda
Importante la dialisi domiciliare oggi come dialisi trisettimanale scomparso
Se non mi ripresento Sabato stravede interessante dal TAR del posto dinanzi l'ultima parte qui purtroppo per motivi di tempo pochissima
Purismo spazi cioè la possibilità con le tecnologie attuali di riconoscere il cuore con un minuscolo
Quale
Meno mitologia un pochino di
In realtà e provare finalmente lavorare su di lui tentando di recuperarlo dal punto di vista strettamente funzionale
Sempre per dire qualcosa in più rispetto a questi passaggi che mi sembrano per per per il problema oggettivo del tempo un po'trascurato
L'aspetto cioè l'utilizzo dei dispositivi più assistenza cardiaca affinché il recupero e da considerare ancora oggi una una possibilità
Che estremamente affascinante interessante ma non interamente consolidata
Peraltro una possibilità che dieci anni fa quali tutti escludevano
Pochi credevano a questa possibilità oggi
Si sta conferma una
Prospettiva possibile
C'è emersa in parte casualmente status dei pazienti nei quali il privato il dispositivo di assistenza è stato rimosso per necessità
Perché c'erano infezioni in corso cose di questo genere si è visto che il cuore tutto sommato funziona meglio di prima
C'è stata una serie di pazienti che erano destinati al trapianto quando si è arrivati al momento del trapianto i chirurghi si chiedeva ma perché mai dobbiamo trapiantare questo qua
Che sembrava aver recuperato mundi Costa ha scatenato una serie di distrutti
Su diversi versanti
Innanzitutto sul versante clinico sono state fatte alcune prove con il teste con risultati alcuni incoraggianti come quelli che più ha mostrato altri meno altri Dupuis
Quindi non c'è in un quadro clinico consolidato la musica opinione che non sia questo quadro clinico consolidato perché le caratteristiche dei dispositivi per fare il recupero e quindi l'utility loro utili per il loro utilizzo terapeutico non sono state ancora definite con esattezza e quindi molto spesso gli strumenti sono stati usati in modo improprio per ottenere il recupero stesso
Chiaramente recupero non sarà possibile su tutti i pazienti
Ma ci sarà da definire da capire su quali classico sottoclasse dei pazienti può funzionare almeno e questo è uno studio che non è ancora stato approfondito se non forse per alcune categorie tipo le patologie a Curzio tutti di origine infettiva sulle quali si è dimostrato che il recupero viene contenere quasi sistematicamente
Quindi l'aspetto metodologico l'aspetto degli strumenti Libardo esistenti non sono stati studiati per fare il Recup
Quindi un quadro ancora molto fluido se vogliamo un parallelo a questo stato di fatto tutta una serie di studi sulla cambiamenti morali ci fisiopatologici
Che del cuore soggetto ad assistenza
Sì ho visto ad esempio due processi di rapporto così regrediscono si è visto che l'assistenza Risoluzione alterazioni dell'espressione genica delle cellule miocardiche se visto che la contrattilità delle fibrocellule
Ritorna ad essere quasi normale
E quindi si stanno approfondendo e acquisendo quelle conoscenze punti base Fisiopatologia
Necessarie per capire come il processo avviene quindi presumibilmente anche come guida all'ottimale
Un altro aspetto che
Non è ancora stato consolidato e legato alla fase che ho definito probabilmente sversamento
Ma in questa fase chiaramente essere nel recupero che viene comunque cose io non sono un medico sono Voronin fisico quindi ragiona in modo forse semplicistico ma se se io ho un minuscolo danneggiato che cerco di farlo recuperare
Semplicemente assunto grande lo svolge un lavoro ma mi metto accantona valorizza che mattoni e continua a cercare di sollevarla
Io non ne faccio perché mattoni non disposto ma dubito che minuscolo potrà guarire
E questo è un aspetto di cui dovrà tenere conto molto spesso i sistemi di assistenza
Ne avete gestito in modo che corte miocardio lavorare proprio proprio così
Perché perché se svuotò completamente il cuore anzi ad esempio come il caso era cannulazione atrio
Aorta non lascia riempire al momento la la pressione morta il cuore non fanno proprio non riesce a pompare però continua a contrarsi pieno
E dopo che in queste condizioni posso recuperare
Se invece riesco a farlo lavorare come in piscina cioè se riesco azionare il dispositivo di assistenza in modo sincrono per quel quando il cuore naturale
Va in circolo e quindi cerca di iniettare trova la Camera ventricolare del dispositivo artificiale libera
E quindi proiettare facendo bassissimo sforzo come arte Rodotà molto ridotto
E poi privata pronta nera Orta nel tempo durante il quale il cuore naturale si riempie allora riuscirò a far lavorare
A far riposare il cuore facendone uno avverrà con piscina cioè fa la sua contrazione ma senza un'attenzione superficiale
E questo mi aspetto l'altro aspetto che però non ancora consolidati macchine che consentono di fare questo non ce ne sono nulla stiamo sviluppando altri alcune macchine tipo sistemava core consente di farlo musicalmente non viene usato in questa modalità
C'è poi la fase di sversamento dicevo
Di nuovo minuscolo messo a riposo ha riposato lo stato ingessato tre mila esibito al consesso ciò muscolo flaccido incapaci di lavorare
Di nuovo sono aggiornamenti mi scusino i medesimi
Molto con i tre punti ma credo Crespano del consente
A quel punto decori allenato
Se per eliminarlo i metodi uno di fianco
Panico di mattoni infine lo faccio provare a lavorare direttamente
Probabilmente il recupero conduttori è scoperto la gestione di questa fase oggi blocca protocollo che ho trovato Unilever completamente ignorato e quindi quando ancora recuperato sotto oppure viene gestito dicendo beh cominciano a fare in modo che l'ha portata sia parte del cuore naturale e in parte del Vasco internet con la frequenza del sistema di assistenza riducendo la frequenza del sistema di assistenza
Il cuore naturale si trova a dovere ed evitare comunque contro un carico elevato
Con un tensione modesta in volume non solo ma lavorando nel sincro a volte avvenuto il favore del dispositivo di assistenza a giocare tre volte addirittura in contrapposizione con questo e questo non è un protocollo che esiste quindi protocolli digestione
Di questa fase
Che consentano
Uno sversamento veramente efficace alloggi non esistono
Ne abbiamo brevettato una dei concetti ed è un ritorno proprio per adattare per specializzare il dispositivo di assistenza che stiamo sviluppando per potere gestire questa fase
Ecco quindi oggi il quadro è sostanzialmente questo florido che è una possibilità da posseduta tutto da verificare che non sarà sicuramente
Applicabile a tutti i pazienti ma sicuramente ogni aspetto a un su sette dei pazienti con patologie Cartier terminali abbastanza significativo e credo che possa aprire una prospettiva siamo d'impiego diverso non sostituiranno alcune che hanno pezzi di ricambio Maiocchi hanno nulla l'organismo guarire indica anche una prospettiva se vogliamo filosofiche un po'diverse ciò non toglie che
Sicuramente ci sarà necessità di dispositivi
Presumibilmente per un impiego permanente quindi assistenza di cuore artificiale totali molto significativo quello che sta l'evoluzione che sta avendo settore con prima in prima loro artificiale totale che va in clinica non sarà perfetto ma il primo che c'è sì sì arriva da otto
Trentacinque anni trenta e trentasette anni discorsi anche economici importantissimi
E poi io credo per l'assistenza invece cronica io guardo con molto attenzione allo sviluppo delle pompe
Assiali
Perché se la mancanza di Opus utilità
Si dimostrerà tollerabile dal parte del coro dell'corpo
Per tempi lunghi
E quindi la mancanza di Pulzetti Ritanna effetti a livello cerebrale renale eccetera
Sicuramente sono dispositivi
Piante
Per un fenomeno che se osservato nella quasi totalità dei casi di pazienti si ischemici sia convegno cardiopatie dilatativa
E che al momento dell'entrata in funzione del dispositivo il cuore naturalmente andava immediatamente a riposo cioè continuava a pulsare sulla sua frequenza ma non dava nessun contributo ovviamente di porta dopo qualche giorno ripeto la quasi totalità dei pazienti
Andare a normalmente a funzionare ad adeguarsi alla frequenza del cuore naturale scusate del cuore artificiale del dispositivo assistenza cioè immaginiamo che il dispositivo di assistenza funzioni a settanta battiti al minuto
Automaticamente al paziente
Si adattava a quella frequenza che danno un contributo di pompaggio cioè ricominciava puntare anche in una certa frazione di sangue
E contro la fase rispetto al cuore cioè andava istintivamente dando quasi unanime ancora istintivamente a funzionare nella fase di minore un lavoro e questo è la dimostra due cose che in quella situazione si torna alla mente e poi cominciava compare dopo che per un giorno appunto ripeto questo fenomeno si è presentato in quasi tutti
In impaziente quindi alla dimostrazione reale che scaricare il lavoro del cuore e per fondere in maniera adeguata alle coronarie ex concluso ovviamente conduce hanno una situazione di miglioramento
Ultima domanda
La voglia del pranzo tratta ancora buon appetito tutte grazie
No
De
Buon pomeriggio a tutti
Detto che il pubblico è molto numeroso l'età media è notevolmente passa che fa molto piacere rispetto ai soliti congressi scientifici
Ho il piacere insieme con il professor Semenzato di dare inizio a questa sessione nel pomeriggio su biotecnologia e nuove diagnostiche cioè l'impatto delle nuove tecnologie a livello della diagnosi di malattie umane e animali
I relatori sono tutti Esperti a livello di ricerche di biotecnologie biologia molecolare
Chiederei al collega Semenzato di voler introdurre Primo oratore
La dottoressa Zambrini si buon pomeriggio a tutti come vedete dal programma che avete probabilmente in mano il professor Giuseppe Saglio del dipartimento di Scienze Cliniche via logica dell'Università di Torino avuto un impegno improvviso per cui è sostituito dalla dottoressa Gamberini il e il gruppo del professor Saglio scie storicamente è sempre interessato della problematica
Di cui va a parlare foresta Cambria in appunto sull'impatto della medicina molecolare nella diagnostica e nella terapia
Anche nella terapia perché idealmente questa sessione doveva essere fatta in una mattinata e e il pomeriggio della stessa giornata doveva esserci la sessione che invece sarà fatta domani pomeriggio per cui qui al mattino si doveva parlare di diagnostica al pomeriggio di terapia per cui non si era neanche diciamo così badato alla differenziare bene le varie relazioni per cui nel pomeriggio di oggi sentirete parlare anche di terapia non solo in questa prima relazione ma anche nelle seguenti in particolare quando si parlerà degli anticorpi monoclonali comunque
Diamo subito spazio alla prima relatrice prego dottoressa Cambria
Ringrazio molto i professori gli ascoltatori il mio punto di vista quello del mio gruppo e quello di clinici che lavorano da anni
La settore anche della biologia molecolare e che la utilizzano anche nella loro pratica clinica quotidiana quindi quello che io cercherò di passare qui è
L'uso che i medici fanno della biologia molecolare
Lo sviluppo della biologia molecolare ha consentito di chiarire che molte malattie umane sono basate su alterazioni molecolari
Ovviamente la biologia molecolare si occupa essenzialmente dello studio degli acidi nucleici cioè DNA e proteine che costituiscono il legame tra la genetica e la biochimica
Le fasi di sviluppo della biologia molecolare sono arrivano da molto tempo fa c'è stata una prima fase di sviluppo teorico nella quale sono stati studiati la composizione dei
Cenni la struttura a doppia elica del DNA è stato identificato attorno a sessanta all'RNA messaggero e poi iniziata praticamente la decodificazione del codice genetico
A questa prima fase diciamo degli anni sessanta dagli anni settanta in poi si è iniziato lo sviluppo dell'ingegneria genetica quella che ha consentito di manipolare gli acidi nucleici per ottenere delle informazioni utili
Il primato per la scoperta che ha consentito di manovrare con una certa città agilità gli acidi nucleici è stata quella degli enzimi di restrizione che tagliano in sequenze specifiche il DNA
E poi tutta una serie di altri enzimi che permettono di manipolarli
Si sono state sviluppate le tecniche del ibridazione degli acidi nucleici e settantacinque un medico scozzese São Bernardo iscritto alla prima e chimica di analisi del DNA che si parlava proprio sul taglio del DNA con infiniti restrizione e poi il progresso è stato molto veloce
Cornaggia sequenziamento scoperta dei polimorfismi capacità di esprimere dei geni estranei intento i paperi nell'ottanta ci è stata diciamo iniziato l'utilizzo di una tecnica che è diventata estremamente utile in tutti i settori della medicina
La proliferazione riesce che ci permette di amplificare il segmento di DNA che ci interessa
Da lì in poi i progressi sono stati molto veloce fino arrivare al coraggio del genoma umano di cui avete già sentito parlare
Il primo
La prima descrizione praticamente di una malattia genetica identificata come difetto di base è stata proprio del mille novecentocinquantasei quindi molto vecchia nelle beh Carlo vive ed è stata la dimostrazione che
La l'emoglobina S. era provocata da una mutazione nella minacci dal sei della catena di mobilità di questo
Di questa stessa catena domenica
Quella che provoca l'anemia falciforme è stato poi identificato nel mille novecentottantasei tanta sette il difetto a livello del DNA che consisteva
è la semplice mutazione di uno creative che provocava l'inserimento di una miccia no acido sbagliato nella catena proteica quindi questa è stata la prima descrizione
Di un difetto singolo una mutazione puntiforme del DNA che causava una malattia genetica
Da lì in poi i progressi sono stati estremamente rapidi
E hanno riguardato tutte le branche della medicina dopo di me il professor Gasparini parlerà più ampiamente la sua parte genetica io mi limito invece parlare di alcuni piccoli settori dell'Oncologia perché altrimenti discorsi sarebbe sterminato
Sappiamo che il cancro è col va considerata una malattia genetica perché nel cancro esistono nella cellula tumorale esistono dei difetti ci
Mettici trasmissibili alle cellule figlie e quindi questi generi difetti genetici sono passibili di studio quelle tecniche della biologia molecolare
Allora quali sono qual è l'importanza dell'utilizzo della biologia molecolare in oncologia
Ci sono in pratica dei grossi obiettivi anche rivolti alla terapia oltre che alla conoscenza che hanno caratterizzato in questi anni lo studio delle malattie in particolare di quelle patologiche che sono diciamo molto avanti nel settore oncologico
E in particolare la caratterizzazione del difetto molecolare che sta alla base di una predominanza patologia ci consente da una parte dell'indicare con precisione un'entità clinica
Quindi di formulare la diagnosi specifica sulla quale si può indirizzare la terapia vedremo al al termine del discorso come molti già sicuramente sanno che sono in corso di sviluppo propria terapie che mirano specificamente a certi prodotti genici
Dall'altra parte invece per quanto riguarda diciamo il singolo paziente
La caratterizzazione molecolare in ci può permettere di identificare anche nell'ambito di una malattia dei fattori prognostici precisi e di valutare la malattia residua dopo terapia e quindi di regolare diciamo l'intensità della chemioterapia che presentano ai sotto su a cui sottoponiamo un paziente sulla base della quantità di malattia che ha o non a quel paziente il discorso di La Mantia minima residua significa che quando noi trattiamo un paziente ad esempio per una leucemia e molto importante conoscere esattamente di quale tipo di leucemia si tratta
E sapere quanta leucemia rimanente nelle varie fasi della sua terapia perché
E possibile che questo ci permette in qualche caso ancora sono tutte cose in fase di studio di diminuire o aumentare la terapia necessaria per cercare di guarire quel determinato paziente
I difetti molecolari classici diciamo che sono stati riscontrati in diverse forme Ducci mi
E anche il Pd linfomi some diverse neoplasie ematologiche sono le cosiddette traslocazione
Cioè
Grosse traslocazione di cromosomi comportano
La molte neoplasie sono caratterizzate da una trattazione specifica nella quale i cui frammenti cromosomici che si scambiano portano con sé due pezzetti di Gene per cui un gene en e ingegneri Bing si fondono e formano un Gene ibrido detto Gene diffusione il quale ovviamente viene conservato se produttivo e se da un vantaggio proliferativa alla cellula
La presenza di prodotti diffusione di questi geni libri di e molto importante perché permette nel singolo dal singolo gruppo di malattie di definire un'entità clinica distinte
Di solito igieniche vengono coinvolti in queste transazioni sono fattori prescrizionali che entrano poi nei meccanismi di replicazione cellulare di un segnale mitologico e anche dei meccanismi di apoptosi
Parlando del settore del delle leucemie ematologiche delle leucemie acute in particolare dobbiamo ricordare che molti pazienti con leucemia acuta
Raggiungono in effetti una remissione completa una molti di questi poi ricadono quindi la prego la lo studio della macchina minima residua cioè di quanta Mattia rimane il paziente può aiutare come già detto ad adattare la terapia
Quali sono i metodi spera analizzare la manteneva lesiva il più classico il primo che abbiamo utilizzato è stata la morfologia cioè tanti anni fa si definiva la remissione di una luce mia sulla base di quanti plasticamente circola voi arrivate Sauber lotti che dava in certe forme di leucemia una Pandaria rapidità mangia mento che poteva scomparire dopo terapia
C'è la città genetica
Cioè il l'osservazione delle cellule dell'alterazione cromosomica specifica queste tecniche però sono a bassa sensibilità la biologia molecolare ha consentito di fare un passaggio verso tecnica sensibilità molto più elevata che comprendono la finisce c'è ibridazioni sito fluorescente nella quale sui cromosomi viene usata una sonda fluorescente per analizzare la presenza di anomalia
In una FIAT Tipo di cui sentiremo parlare presto dopo e poi la più la polimerasi ci riesce anche i praticamente la tecnica di amplificazione genica che può essere effettuata con metodica qualitativa ci dice solo se c'è un certo gene nell'individuo o non c'è oppure con una tecnica quantitativa come la real-time che ci dice quanta malattia quanto di quel gene c'è nell'individuo
Allora nelle invece nulla di acute sono state identificate tutta una serie di questi geni diffusione questa patologia che prendo ad esempio perché ce ne sono ovviamente molte altre perché quella di cui noi ci occupiamo più estensivamente
è caratterizzata in una percentuale attorno diciamo tra il quaranta e il cinquanta per cento dei casi la anomalie cromosomiche che si accompagnano in una parte a difetti molecolari specifici le prime tre che sono descritte quanti
La provocazione quindici diciassette la traslocazione otto ventuno all'inversione sedici sono tra i difetti cromosomici molto specifici ognuno di dei quali si accompagna uno specifico gene diffusione
E che possono essere analizzati con tecniche sia cito genetiche sia molecolari qual è l'importanza di riconoscere questi queste alterazioni molecolari delle cellule prima di tutto dal punto di vista diagnostico queste la presenza della provocazione quindi diciassette assunto un'importanza fondamentale nella terapia
Perché come vediamo in questa diapositiva questa traslocazione unisce due geni un gene che si chiama PNL e un generale che puntati che al recettore dell'acido retinoico
Che formano un gene diffusione
E hanno come indicando c'è s'sono capaci di legare il lascito non noto che poi il la vitamina sostanzialmente allora si è visto che i pazienti che hanno questa provocazione
Possono rispondere a una terapia con alte dosi di acido a oltranza lettino al concetto l'apporto di Dolfi significative di questa sostanza qual è la sostanza diciamo naturale
Riesce a superare il blocco matura attivo che caratterizza il plastico eccentrici a farli maturare a fare andare in apoptosi
Questa è un'osservazione che è stata praticamente che ha aperto una strada così enorme verso una terapia mirata
No alla leucemia in generale ma a quello specifico difetto presenti in una certa situazione
Scoperta che è stata fatta clinicamente in parallelo da gruppi italiani francesi anche dai cinesi che sono stati i primi a sperimentarla
E che ha dato prima diciamo il primo apporto significativo della biologia molecolare insieme alla clinica c'è un cambiamento di prospettiva nella clinica
La le cene a l'Apl la leucemia premiano citi Calcutta rimane praticamente in questo momento la forma di leucemia acuta nella quale l'utilizzo della biologia molecolare è stato più significativo e più indagato la l'uso della PCR carretti significa che viene trascritto dalle avvenne al DNA per l'ha detto per le trovare il PM elevata c'è c'è la diffusione tipico di questa leucemia ci permette sia di identificare con precisione questi canti critica clinica cioè quando ci troviamo di fronte alla paziente che ha una spettatrice mi Accornero ciclica acuta possiamo esserne sicuri se ne troviamo queste
Trascritto e diffusione
Siamo
Questa
Fusione
E Chienti non entro nei protocolli comuni della terapie cito statica no danno una terapia combinata con aceto trasferiti noi ecco e cito tra citostatici
Quindi vengono inseriti trattamento i protocolli DiVersi
In più nel forno atto del sì ho visto che è molto importante in questi pazienti diventa una negativi c'è questo trascritto ripeto non si deve più trovare nel midollo di questi pazienti
Grossi studi gestiti soprattutto dal dal gruppo cinema hanno identificato il fatto che quando si riscontra per almeno due volte i propri motivi di sicurezza la presenza di malattia residua in un paziente con leucemia poi ci tiene a Kuta
Anche se clinicamente asintomatico questo paziente Licata e quindi è importante avere la possibilità di trattare questo paziente in una fase precoce della sua ricaduta
Le stesse metodiche di biologia molecolare che ci consentono di osservare un gene diffusione sono state utilizzate anche in altri tipi diversi di accuse ma i risultati il significato clinico non è sempre lo stesso quindi va analizzato caso per caso
Questa che ho qui
è un esempio di PCR qualitativa
Per la tra la trasmutazione otto ventuno che da questo trascritto si chiama M L uno eletto ed è una trasmutazione tipica dell'orario dice mia Kouta N due
E piuttosto frequente a circa il dieci per cento delle leucemie acute in italiano questa alterazione genetica
E in questi pazienti pallini rossi indicano l'esordio sì visto che anche i pazienti in continua completa remissione che sono praticamente tutti questi cinque
Ci possono essere ancora
Delle positività della PCR qualitativa
Quindi in questo caso a differenza uno solo di questi pazienti ricade
A differenza di quanto osservato per la leucemia però mi ero citi Calcutta
In questo tipo di leucemia non abbiamo ancora un marcatore molecolare predittivo sicuramente della ricaduta quindi questo ci indica il la necessità di studiare ogni tipo di leucemia in modo separato
La possibilità che la Pierre ci la PCR qualitativa fosse associata dei dati invece quantitativi viene fuori proprio da questo discorso che significato
L'estrema sensibilità della PCR qualitativa può darci un dato che non ha significato clinico e per quello sono state sviluppate le tecniche di PCR quantitativa quella che vi presento e una di delle più usata è quella che noi utilizziamo al al momento che sfrutta la tecnologia Pacman in pratica
Il DNA viene prima separato
Si aggiunge una sonda che ha due molecole fluorescenti chiamate rapporteur e quello c'erano queste due molecole fluorescenti quando stanno a distanza artista tra di loro ai due estremi della sonda
No vengono praticamente mascherate danno sono una fluorescenza di fondo si aggiunge poi una ventina
Che rompendo gli acidi nucleici
E poi gli ripara
Quando questo enzima trova la sonda complementare al DNA in studio liberale le due molecole permette che si separi no e quindi non c'è più diciamo questo effetto di scherma
E la molecola reporter
Diventa fluorescente mette la sua fluorescenza che viene rilevata da un'apparecchiatura spetto foto metrica e che per e che naturalmente ci dà una fluorescenza proporzionale alla quantità
Di molle e quelle che sono state spiazzate
Ovviamente bisogna creare a questo punto delle curve standard e queste sono delle curve di di dedizione con un DNA noto interdizioni seriali non vado nei dettagli tecnici e ripresenta invece qualche dato di pazienti di quello che succede nei pazienti
Che noi studiamo con questa metodica qui ho usato un altro
Un altro marcatore molecolare si tratta praticamente del marcatore dell'inversione sedici un altro genere di fusione un paziente che alla diagnosi presenta un trascritto molto alto
Il trascritto in studio deve sempre paragonato a un gene di controllo in questo caso è avversa
Il paziente
Vai all'emissione ma dopo le ed è a questo livello ma dopo la prima consolidamento
Scende ancora il livello e rimane stabilmente basso il paziente rimane in remissione completa
Questo invece l'andamento di un paziente che ricade il trascritto si riduce ma mai a livelli di negatività
Poi rimane riprende a salire al tempo della ricaduta scende di nuovo al tempo della remissione completa ma quando comincia di nuovo a risalire il paziente viene sottoposto a trapianto allogenico di midollo e a questo punto si attiene una vera remissione completa
Questo grafico mostra tutta una serie di pazienti con questo difetto molecolare l'inversione sedici
è un po'complessa ma diciamo semplice se consideriamo che i pazienti con la linea rossa sono quelli che ricadono pazienti con la linea verde sono quelli che rimangono in remissione vedete che esiste un livello di quantità di trascritto Inter medio
Nel quale i pazienti possono o continuano a scendere oppure poi risalire andare verso la ricaduta ma al di sotto
Di questa soglia nessun paziente più ricade quindi questi sono valori di PCR che ci lasciano abbastanza tranquilli sul fatto che la terapia in quel paziente ha funzionato
Un'altra
Il nel tempio che diciamo negli ultimi tempi ha dato più soddisfazione clinici ai biologi molecolari per quanto riguarda il rapporto tra biologia molecolare terapia è quello della leucemia mieloide cronica
La Lecce mi amerà ed è cronica e ma è una malattia rara la la quale sia un disordine mieloproliferative o con incremento essenzialmente dei globuli bianchi ma coinvolgimento anche delle altre serie midollari
Ed è caratterizzata da un'anomalia citogenetica
Dall'anomalia citogenetica specifica riconosciuta fin dal mille novecentosessanta è stato il primo a dispetto cito genetico riconosciuto in una leucemia umana ed è una traslocazione tra il cromosoma nove anni
E cromosoma ventidue
Vedete che questo cromosoma diventa più piccolo e questo è stato chiamato da Peter nove il cromosoma Philadelphia ha sempre mantenuto il nome della città in cui è stato scoperto
Da un punto di vista bio molecolare è stato riconosciuto più tardi che in pratica il cromosoma ventidue si rompe a livello di vincere detto BCR
E il cromosoma nove si rompe a livello di hub Proton quel gene sia verso analogo di un oncogene Morino
L'ha perso viene traslocato sul ventidue e si forma un trascritto adibito diffusione vi sia avverso
Questa anomalia cromosomica
Corrisponde con precisione all'ovvia mangia mento molecolare da un fenotipo le Orcenico che diverso in diverse situazioni la maggior parte dei pazienti con leucemia mieloide cronica più del novantacinque per cento hanno la la riarrangiamento desiano avverso ma anche una parte di leucemie acute dell'adulto linfa plastiche
Attorno al venticinque per cento dei casi a il cromosoma Philadelphia una percentuale molto più bassa dei bambini un piccolo numero di leucemia mieloide acute
Anche alcuni casi di quella che viene definita leucemia granulociti caccia una forma mi del ce ne avete cronica a molto minore aggressività in cui nella quale aumentano essenzialmente neutrofili
Quindi ci sono diversi fenotipi che corrispondono a un vanno stesso difetto molecolare
La ricerca nel campo dell'l Miccichè ha proceduto molto negli anni con grosse soddisfazioni partendo dall'identificazione del cromosoma Philadelphia che poi è stato descritto come provocazione ventidue nell'ottantaquattro
è stato identificato era mangia mento genico
E poi si è visto sempre nell'ottantaquattro che in pratica questa questo genere bisserà Benson
Veniva a cadere un'attività attirò finché in altri campi
Costituzionalmente attivata cioè normalmente il gene avverso e un gene che ha un vediamo quei dopo anche meglio i dettagli un'attività fiorentina dica che ovviamente nella cera normali è sottoposta a regolazione
Mentre attivata nelle cellule che portano dissi alla persona
E stato clonato e sequenziato tutto trascritto Bizet Anabel son ed è poi stato dimostrato mediante l'esperimento sui topi comunque Ettore lettura virali che questo trascritto viziato e sarà in grado di indurre una forma molto simile alla mi avete cronica
Debbo fregarmi
Non andiamo se il dettaglio dei geni è importante ricordare che ha aperto a questo Domain che a questo sito che ha un'attività di fosforilazione della tirosina
Queste il gene BCR ma possiamo andare avanti
Allora il concetto della posso relazione
Del BC arabe sono in pratica questo
E in grado di
Posso arrivare cioè di prendere
Posso dall'ATP e trasferirlo su proteine sostrato che vengono attivate questa attività normalmente regolata
Nel gene normale da altri Domain questi è seccata Sh due non ha importanza comunque sottoposta regolazione invece nella leucemia mieloide cronica in pratica questa attività Filosi inchinati che sempre attivata
Questo l'esperimento che ha dimostrato che un vettore retrovirale dava una malattia molto simile agli amici nel topo
Tutta una serie di esperimenti che sono stati condotti su uccello il su linee cellulari su topi eccetera hanno tutti dimostrato che praticamente questa di avanzamento genico
è un punto essenziale è un evento centrale nella patogenesi delle merci
A questo punto che cosa fa il riarrangiamento bisserà verso nella cellula fa un sacco di cose cioè le azioni sono veramente disparate interviene sicuramente alterando la la trasduzione del segnale
E in questo praticamente sfrutta una via dove implicato un altro importante oncogene che si chiama las determina dei cambiamenti nell'adesione cellulare inibisce l'apoptosi
Altera la localizzazione di abitazione che normalmente
Fa un passaggio uno chauffeur come si dice tra il nucleo citoplasma mentre era leucemia mieloide cronica si limita a rimanere nel citoplasma ma tutte queste azioni sembrerebbero mediate da questa acquisita attività tira sinti Nasica
A questo punto una volta conosciuti abbastanza bene i meccanismi della malattia quali erano i possibili puntine quali inserire una terapia specifica
Per questa malattia sono state trovate strategie cosiddette anti senso cioè del Lecce degli oligonucleotidi che bloccassero il prodotto diffusione in vitro funzionavano in vivo non non ci sono ancora esperienza
Sono stati pensati dei metto di immunologici per esempio di sfruttare la P duecentodieci ce la proteina che viene prodotta come un antigene
Ma un metodo che adesso è già in avanzata niente anche per la sperimentazione perché ormai già in è stato approvato dalla Food and Administration e quella invece di agire sulle attività enzimatiche
Che sono regolate dal dall'oncogene in particolare quindi agire con degli inibitori dell'attività attività chiedo se inchinato Sica e un altro punto che è stato anche utilizzato che in corso di studio e invece quello di agire sulla via di razza che sicuramente una via importante anche in altri tumori
RAS deve essere sottoposto a un processo biochimico che si chiama Farnesi l'azione se viene inibito non è in grado di attivarsi e quindi gli inibitori della Farnesina transferasi hanno anch'essi come gli inibitori della Tea Rose inchinati vocazionale terapeutico in queste malattie
Quello che è stato testato finora sono dei farmaci che sono in grado di inserirsi queste l'ATP la tasca dell'ATP
Infine che vi sia sfrutta per legare la Spirit staccava un fosfato e posso ridare il substrato
Esistono dei farmaci che sono in grado di sostituirsi cioè di occupare questa Pasca e quindi rendere impossibile la fosforilazione
Tra questi S.p.A. ai cestini a sit-in altro avversario inibito cinque sette uno e già entrato in commercio e una molecola che è stata sperimentato ovviamente prima invito esso animali ma anche ha già dimostrato nell'uomo questo è l'articolo di New England col quale è stato pubblicato a questi sono
Le Conte leucocitaria dei pazienti e questi sono l'andamento delle città genetiche in pazienti trattati con questo farmaco non vado nei dettagli clinici ma chi di noi molti di noi ormai clinici l'hanno sperimentato senza aver risolto sicuramente tutti i problemi della terapia di questa malattia e un farmaco che ha sicuramente no potenzialità clicca molto interessante
Qui ci sono per esempio dei pazienti trattati con effetti cinque sette uno si trattava di pazienti resistenti o intolleranti all'interferone che ha terapia tradizionale di questa malattia sono delle PCR quantitative
E si vede qui siamo a un anno e tre mesi
Queste al midollo come sia effettivamente presente un calo del trascritto molto importante mai al ferro finora non abbiamo mai trovato nessun paziente che sia diventato completamente negativa questo è un altro paziente con un buon andamento
Di riduzione del del per trascritto
Un altro paziente con un andamento di buona riduzione non sono tutti così questo per esempio un paziente con una fase accelerata
E qui la riduzione del trascritto c'è ma è estremamente meno sensibile
Per concludere nelle Lecce minerali di croniche i risultati sono finora stati molto soddisfacenti anche se non ancora
Ovviamente necessita ancora di testa nel tempo e di risposte a tutta una serie di domande ma sicuramente nelle forme acute con la leucemia Philadelphia positiva
I risultati non sono altrettanto buoni la maggior parte dei pazienti possono rispondere Marie cadono in breve tempo
Senza andare più nel dettaglio volevo finire
Con le prospettive future
In pratica abbiamo già almeno un farmaco a disposizione che agisce indirettamente su un gemme
Su un su un oncogene
E possiamo sicuramente potenziare la Zotti vita o associandolo con altri farmaci
Oppure anche con un altro
Con gli inibitori della Farnesina transferasi che intervengono su un'altra via metabolica quelle tale sempre scatenato da visionato insomma
Questi meccanismi questi metodi di di terapia potrebbero aviere ovviamente l'interesse anche in altre tumori umani nei quali per esempio l'attivazione di Ras ceduti di questi oncogeni o un meccanismo tiro s'inchina al sito può essere importante
Scusate tempo finito
Bene grazie dottoressa Tambre interessi fatto questo excursus sull'impatto della biologia molecolare partita diciamo così dalle nozioni di molti anni fa per arrivare alle applicazioni diagnostiche l'ha fatto soprattutto nel il campo dell'oncoematologia dove indubbiamente sia la diagnostica che la terapia in questi ultimi anni hanno fatto dei passi da gigante
Il io aprirei subito la discussione qualche breve domanda da parte delle udienze
Se
Domani
Non vedo mani alzate
Posso chiederti io se avete visto una correlazione sempre in rapporto a queste esperienze che hai fatto vedere sulle sentirai se avete visto una correlazione fra espressività dopo trattamento e dosaggio del farmaco in altre parole siete riusciti a vedere una correlazione fra all'entità del trattamento e la risposta
Soprattutto in termini di continuità del trattamento l'abbiam pazienti trattati con quattrocento milligrammi pazienti trattati con seicento milligrammi ovviamente quelli trattati con seicento milligrammi sono state accelerate o plastica e quindi hanno una malattia più aggressiva
Però l'impressione che abbiamo avuto e soprattutto quella che conta moltissimo la almeno nelle fasi iniziali la continuità della terapia
Perché molti pazienti devono effettivamente sospendere o almeno una parte per magari tossicità midollare o altri tipi di tossicità e quelli sono i pazienti che rispondono rispondono meno
Dopo un certo tempo abbiamo però visto anche un altro fenomeno c'è che pazienti trattati a lungo poteva invece già sospendere senza avere immediatamente delle ricadute
Ho capito probabilmente proprio su questi questi andranno monitorati più singolarmente
Non vedo altre mani alzate per cui io passerei alla seconda presentazione
La seconda relazione sarà tenuta dal professor Paolo Gasparini del TG di Napoli e il titolo della sua presentazione la ricerca di mutazioni patologie nella pratica clinica prego
Personale questa eh
Buongiorno a tutti ringrazio gli organizzatori avermi invitato a Dio Nova due mila e uno e io vi racconterò un po'quello che la esperienza di un genetista nel identificare le mutazioni che causano le malattie genetiche
Quello che lo stato dell'arte attuale e vedere un po'quello che sicuramente il futuro in termini di possibilità di analisi di queste mutazione
Innanzitutto
Quali sono gli obiettivi quali sono gli scopi di un'analisi del DNA alla una e fa la diagnosi delle malattie ereditarie Fabiani se molecolare delle malattie ereditarie un altro obiettivo della prevenzione delle malattie ereditarie
La selezione dei pazienti per eventuali terapie identificazione di geni che causano malattie mendeliana è infatti esistono circa cinque mila malati elitarie ma solo di una parte di queste si conosce qual è il gene che causa la malattia e quindi è ancora necessario fare quel processo che dalla localizzazione di un locus malattia apporta alla dentistiche azione del gene malattia e questo lo si fa
Solo esclusivamente attraverso l'identificazione delle mutazioni nei pazienti affetti
E poi identificazione di varianti geniche esistono due sistemi sostanzialmente per la diagnosi delle mutazioni il sistema diretto e il sistema indiretto il sistema diretto e molto semplice comprensibilissimo ovviamente noi possiamo andare a leggere direttamente la sequenza di ingannare i nostri fra mente abbiamo so la l'accisa di vedere le mutazioni del gene della fibrosi cistica
Al a se quel siamo pezzo per pezzo e dalla sequenza ricaviamo le informazioni se sono presenti o assenti nos mutazioni
Il metodo indiretto invece è un metodo per certi aspetti più rapido perché in maniera molto più accelerata premete realizzare un numero consistente di campioni e si basa sulla corsa elettroforetica
Suo anomalie della corsa elettroforetica per cui ne possiamo prendere dei pazienti dei frammenti di DNA amplificati da pazienti li separiamo in maniera elettroforetica e se sono presenti due bande anomale gli andiamo poi a sequenziale
E quello che avviene ovviamente questa la cosa dentro fra etica in questa direzione
Questo è la banda corrispondente a soggetto normale nel mutante si identificano la presa la bandi aggiuntive potevano si identifica la prende una banda giusti aggiuntiva che corrisponderà ad una mutazione del DNA poi si tratterà di vedere la sequenza sequestra una mutazione che causa patologia o è invece un polimorfismo una variante proteica
Il il principio questo principio indiretto di anno separazione mediante le troppo resi alla base di un numero consistente di tecnologie che molti di voi avranno già utilizzato si vada alla e se si CP single strand conforme c'è un polimorfismo al di Gigi è il che indica il Crivelli già sia normale che intimati colla René SCP dietro duplex
Fino ad arrivare a quella che la metodica più utilizzata in questo momento di lavoratori che il di HPLC
Brevemente diciamo alcune cose sul singolo studente conforme Jean Polimadei perché è stata la metodica più utilizzata finora
A una Sensi
Sensibilità che varia a seconda delle dimensioni dei frammenti e questo la cosa importante queste tecniche non identificano il cento per cento delle mutazioni mentre la sequenza diretta se letta bene identifica al cento per cento delle mutazioni
Identifica sia molte azioni mi senso e non senso vero cambia Dinacci dice mutazioni che danno origine a un segnale di stop
Richiede un certo tempo dei trentasei settantadue ore tra tutto il processo
Si può usare il il elettivo e consigliato anche si son dei sistemi che non usano radiativo non nel richiesta un particolare tipo di strumento e si parte da DNA o da N RNA
Come target comete plateau per l'analisi
Quella che invece la metodica che più correntemente da inutilizzata perché ha permesso di in parte anche automatizzare l'intero processo di analisi e quella che si chiama di HPLC
è completamente automatizzata ha una sensibilità molto alta in frammenti che sono anche più ampi rispetto a quelle del sessisti
Identifica la sua tipo di mutazioni è molto rapida in quindici quaranta minuti si hanno i risultati adesso si sono poi delle colonne che sono ancora più permettono ancora un'analisi più rapide è un maggior numero di campioni analizzati nell'unità di tempo
Non si usa radiativo però ovviamente il lato negativo e che richiesta una strumentazione specifica e anche abbastanza costosa che qui riprodotta
Praticamente un HPLC di tipo denaturante
Il principio è che noi abbiamo in qualità e per il laddove sono la sequenza normale il mutante lì Denna troviamo e poi li Renato diamo e ovviamente si formavano di nuovo dello Guaita e per del mutante Mazzi formeranno anche gli etero duplex e proprio sulla base della formazione di questo etero duplex dalla mescolanza
L'uso della colonna permetterà di identificare queste bande anomale e disse avviene sostanzialmente una separazione sia sulla base del peso molecolare sia sulla base di alcune bis dinamiche chimiche che il relativo alla presenza di vetro duplex e ha una particolare colonna e alla temperatura e questo è di fatto il diciamo l'uomo duplex qui presente frammento brevi frammenti diversi con delle bande anomala che vanno poi sequenziato e per vedere cosa corrispondono questa la metodica che la maggior parte di lavoratori che fanno diagnosi e ricerca genetica o oggi utilizzano però ovviamente non fa parte di quelle che sono le metodiche future perché il processo della diagnostica della ricerca di mutazioni in futuro è quello della miniaturizzazione in tutti i processi diagnostici andando verso quella che fa parte con le tecniche che fanno parte del congedo categoria delle nanotecnologie
Ovvero dei mai trovare e dei macro Cipro che cosa sono di che cosa consistono in macrotema Croci sono un mondo costituito da un numero estremamente elevato e variegato di ditte quasi tutte piccole Company private
Che hanno sviluppato tecniche diverse per la mia miniaturizzazione dei processi diagnostici
E quindi sono indicate solamente alcuni ovviamente non è con mini comprensiva con il termine di città a di DNA per noi riferire ci riferiamo a qualcosa di molto piccolo di miniaturizzato
Su cui siamo in grado di appiccicare di legare del degli acidi nucleici e di fatto la maggior parte dei supporti sono i supporti di vetro in realtà sono dei vetrini anche se esistono diverse tipologie di substrato
Abbiamo i gli array di oligonucleotidi
E la prima fase ce ne dobbiamo preparare un array una RAI molto denso con un sacco di con un numero molto consistente di oligonucleotidi che riconoscono delle mutazioni che ne vogliamo andare a investigare
Poi c'è la preparazione del campione liberalizzazione e poi l'analisi del segnale questo non le fasi che ci permettono di analizzare un chip dal punto di vista pratico esistono due tipi diversi di Cipro di Michael Ray che comprendono quelli che hanno degli oli dico pre sintetizzati che vengono depositati quindi devono essere depositati da dei robot che deposita non nano quantità di oligonucleotidi su questi supporti di vetro
Oppure esistono degli strumenti che invece degli array che si basano sulla sintesi in situ di oligonucleotidi questa è una sintesi di tipo foto rito grafico e lo strumento più o utilizzato
Base su questa tecnologia e quello della affine Tex è ovvio che la differenza che esiste tra queste due tecnologie legata al fatto che la prima è una tecnologia aperta perché si può usare in tutti i laboratori ha un costo relativamente accessibile come vi farò vedere
La seconda siccome alla base la sintesi foto litografica e di fatto accessibile solo ed esclusivamente ad alcune grosse Company
Questo l'esempio della sintesi fotografica diretta che porta l'origine poi del del CIPE della FIN metri x
E questo è ad esempio il CIPE della FIM Trix
Invece l'alternativa è quella di utilizzare delle macchine dei robot
Che pescano gli oligonucleotidi che abbiamo fatto smitizzare specifici per le mutazioni che vogliamo andare a vedere questi oligonucleotidi sono modificati chimicamente per facilitare l'attacco sulla superficie di vetro
E anche le superfici di vetro sono modificate chimicamente per favorire questo attacco
Avviene lo Sporting e e questo e poi l'immagine che noi otteniamo si arrivano a scontare migliaia di oligonucleotidi su un singolo vetrino i vetri sono molto simili a quelli che vengono utilizzati
Per fare gli stessi di sangue o la cito genetica fermo restando che sono modifica hanno questa superficie chimica modificata
La preparazione si parte da una reazione di DC era partito dal DNA o dall'Enea o da cloni quindi la base è sempre la stessa
Avviene poi il fenomeno della tipizzazioni in cui ne mettiamo a reagire
Il nostro prodotto di amplificazione con il vetrino cui attaccato l'olivo nucleotide e sapendo che il queste direzioni viene fatta in presenza di sostanze fluorescenti che permettono poi una analisi mediante fluorescenza e il tutto viene poi eletto da scanner a fluorescenza
In grado di identificare i vari colori
La metodologia che noi utilizziamo ad esempio è quella del miniciclo in sintesi chiamo anche a Pécs oppure si chiama anche Senise Ingo nucleo Dalida strisciante
Ed è una reazione a doppio step che comporta come vi dicevo la Meeting al alla una reti oligonucleotidi e poi una estensione inizi Mantica tipo sequenziamento in presenza di da Hideo si fluorescenti
Questo è il protocollo
Allora da una parte abbiamo la preparazione del nostro vetrino dall'altra abbiamo l'amplificazione del nostro target e qui ovviamente viene l'incubazione l'estensione enzimatica e poi i lavaggi
Questa metodica va molto bene per analizzare mutazioni in presenza di malattie ereditarie nelle quali
Frequente non esiste una mutazione molto frequente ma ne esistano diverse faccio l'esempio del della talassemia o anemia mediterranea
Per identificare la stragrande maggioranza dei soggetti affetti da anemia mediterranea bisogna analizzare almeno dieci dodici mutazioni allora in questo caso uno prepara dei vetrini che contengono gli oligonucleotidi corrispondenti all'analisi diretta e neanche il senso di queste dodici mutazioni e poi ovviamente analizza
Il un campione per volta
L'approccio inverso anche abbiamo tra l'altro sviluppato nel nostro laboratorio ma che non è assolutamente originale e quello di analizzare invece di attaccare
L'amplificatore e poi di interrogarlo con l'olivo nucleotide questo ovviamente ha senso quando siamo di fronte a malattie ereditarie
In cui è presente una mutazione molto molto comune o in questo caso uno prepara un CIPE in cui può spostare sul CIPE
Fino a ad alcune migliaia di amplificato corrispondente a soggetti diversi e poi interroga tutti quanti nello stesso tempo per quella unica mutazione questo ad esempio il caso delle sordità genetiche che ci hanno visto coinvolto nel nel passato ci venuto da comode con progetti di ricerca vedovi edificato una mutazione molto comune e la frequenza dei portatori di questa mutazione del è di uno su trenta la stragrande maggioranza dei soggetti affetti a solita genetica presentano questa mutazione quindi è ovvio sono omozigoti per questa mutazione è ovvio che ha senso in questo caso fare questo tipo di metodologia
Questo è il tipo di reazione questi sono gli oligonucleotidi
Amino modificati conte di Spencer questo è il vetrino
Questi sono i tre genotipi possibili come esempio violente Gigi Gia e a e questo è il sistema con cui si vede son diversi Floro cromie ovviamente questo è un mozzicone per a a e quindi avremo un solo colore
Che il rosso questo avremo il il verde e in questo caso avremo invece la sovrapposizione di due colori quindi un colore di fusione questo tipo di tecnologia non l'abbiamo utilizzato ad esempio per studiare le mo'cromato così da evitare anche una grave malattia ad accumulo di ferro questo corso di fatto in collaborazione con Clara cascatella a partire lo stesso Dipartimento della dottoressa Campaign che da parlato prima e
è una malattia in cui soggetti accumulano ferro e il ferro ovviamente tossico per le cellule questo getti hanno una serie di problemi collegati al danno che il fegato produce che il ferro produce a livello del fegato del pancreas dice
Esiste una mutazione abbastanza comune che si chiama C due otto due Y e poi esiste una seconda mutazione
Questo uno di mutazioni e questo è l'analisi questo è un canale che identifica un colore Enza in faida e questo è il canale per l'altro colore ovviamente qui abbiamo dei pazienti questi sono pazienti che sono cc come genotipo e questo è uno dei pazienti che invece sono Gigi
Questo lo vedete meglio nella diapositiva successiva
Vedete qui abbiamo per esempio la il il dato positivo sono in questo canale quindi tutti questi pazienti sono cc quel sono positivi sia da una parte che dall'altra quindi sono degli eterozigoti e invece per esempio questo qua questo gruppo di soggetti è positivo solo per solamente per questo Canale e quindi sono degli omozigoti Gigi ovviamente questo che sembra grande qualcosa che ho ottenuto non si vede perché le distanze tra questi qui sono nanometri e la quantità di oligonucleotidi se non hanno litri
E qui si vede solo così grazie alla lettura dello scanner il futuro e quello di implementare il numero di colori per fare analisi simultanea di un numero maggiore di mutazioni e soprattutto è quello di utilizzare dei software
Disegnati per la diagnosi di queste malattie in modo tale che automaticamente anche il colore diffusione venga identificato da Solter stesse automaticamente risulti segnalata la presenza di un eterozigote
Quello che io gli ho fatto vedere sono delle applicazioni alla diagnosi delle malattie genetiche però mi voglio dare nelle ultime due diapositive un segnale importante su quello che è sicuramente il futuro della diagnostica genetica non applicata espressamente specificamente alla diagnosi delle malattie ereditarie ma bensì alla identificazione di genotipi a che
Hanno relazioni diverse con l'uso dei farmaci logico come voi tutti sapete ognuno di noi ha una reattività individuale all'uso di farmaci esiste una nuova disciplina che si chiama farmaco generico farmaco genomica che dir si voglia che ha come obiettivo quello di identificare il farmaco giusto per ognuno di noi
Questo grazie ad edificazione di genotipi di geni ovviamente per cui noi reagiamo in maniera più o meno differente alla
Rispondiamo che mai indifferente alla ingestione di certi farmaci questo per esempio è un polimorfismo di un gene che si chiama CP due C nove e i diversi genotipi dei pazienti oralmente esistono anche qui gli omozigoti per un per un allele dietro di Gotti composti gli omozigoti per l'altra leve vi è una netta relazione
Con un aumento della rischio di emorragie quando questi soggetti prendono il il il il il genotipo uno dei genotipi di quei soggetti assume lava Farina che uno degli antichi qua curanti un altro esempio
Sempre riferito alla all'uso di test genetici per identificare i soggetti a rischio
La sordità esista una forma di sordità da mutazioni del DNA amico mitocondriale che come vi ricordo e un DNA diverso non nel DNA nucleare si trova i mitocondri e sono di origine materna e quindi ognuno di noi al dinamite con grave che ci viene trasmesso
Dalla propria madre
Esiste una mutazione del DNA mitocondriale che si chiama a mille cinquecentocinquantacinque GP che predispone alla insorgenza di una sordità per il danno quelle sono le cellule ciliate dell'orecchio interno questo è quello che succede
Dopo che soggetti che hanno questa mutazione hanno assunto una categoria di antibiotici non più molto utilizzata oggi ma che viene ancora utilizzata ad esempio nella mia nato logiche soprattutto i prematuri che si chiamano amino glicosidi è ovvio che vi è un nesso diretto tra la presenza di questo perché la sono soggetti che sono meno sono più sensibile ai metaboliti del farmaco per cui avviene questo danno ed è ovvio che in questo caso è molto utile testare questi soggetti quindi il futuro
E qui vado a chiudere e quello di una diagnostica miniaturizzata
Una nano diagnostica se vogliamo in hanno quantità che questo dei grandi vantaggi sia per la quantità di risorse di campioni che si possono analizzare unità di tempo sia per i costi perché i costi sabato né in maniera drastica e poi il futuro
Per quelli che si interessano genetica come noi non è solo quello di studiare le malattie genetiche ma soprattutto quello di identificare i genotipi a rischio delle malattie multifattoriale grazie
Grazie Gasparini per questa presentazione c'hai parlato non soltanto della diagnosi delle malattie ereditarie ma hai anche prospettato diciamo così queste analisi in termini di possibilità terapeutiche
Voglio solo ricordare ai presenti che di farmacocinetica di farmaco genomica si parlerà anche domani mattina ci sarà Marco storie di Milano che affronterà in dettaglio a questo punto il
Siccome il titolo della prossima relazione è molto simile preferirei se è possibile fare la discussione al termine anche della prossima presentazione per cui inviterei sul podio
L'astrologia e per la prossima relazione appunto dal titolo alterazioni genomiche
Il dottor rogge di origine tedesca e lui avrebbe preferito fare la sua relazione in inglese ma preferiamo una relazione in italiano e sarà piuttosto lento nella sua la sua esposizione
Prego
Prima attivo scusami Pedio cattivo italiano sentite bene stretto accento tedesco ma non posso fare nient'altro
Io ma no è meglio che non parli tedesco di sicuro e comprende l'inglese la voce roca finiamo anche ma il tedesco propria o che sarebbe più edifici presente testo non fa niente
Hanno io voglio voglio darvi un esempio dia queste tecnologie che sono appena stati presentato come leggi incerti
A il ruolo di queste tecnologie nella che c'è H farmacologica il nostro corpo il nostro centro si occupa a più che altro della del campo di infiammazione e magari come sapete tutti le celle tirano un modo fondo Montale nelle malattia cronica autoimmune
Le cellule Tina Yale che sono quelli che non sono stati in contatto con l'antigene circolano contributi continuamente dal sangue Alia organi linfatici più periferici e di nuovo al sangue all'apice anche tra loro proprio antigene
Il primo incontro tra linfociti T naïf e l'antigene al luogo negli organi linfatici periferici quali il linfonodo
E per l'attivazione e l'espansione clonale Otello Celletti naïf sono richieste sia un antigene specifico siete voi Signa segnali
Costi mulatto
I
Questo incontro tra io il la cellula naïf sì con l'antigene che viene presentato da una cello e specifica che sentirete dopo ancora di più che rappresenta l'antigene che la maggior parte dei casi una cedo attinto ittica induce un programma Titti Frenzy azione e queste cellule ma i fatti
Si differenziano in cellule effettivi c'è
E voglio paga un pochino delle diversi stati di festa differenziazione
Il come ho già parlato il primo step il riconoscimento del della l'antigene ottanta la ci aggiorna i rischi
Troppo l'incontro con la CGIL letto cellula ci comincia a dividersi può prolifera molto velocemente io comincia il processo di differenziamento a questo punto da cerotti
Fa nient'altro che con il ferale e se c'è ad una ci ci tocchi da che una molecola solubile che si chiama Inter di chi ITO duchi d'altura
Che dopo questa prima fase
Le celle ci allora possono differenziarsi in almeno Turci las e questo è stato scoperto appositamente quindici anni fa e questo due ultras si chiamano C H uno gattina otto a uno o C H due tetti apertura e questo cioè turchi sassi Cellos circa sono molto importante
Per potete o circhi contro diversi classe T parassiti oltre a patto di patogeni
E ci ha comunicato sono importantissime l'attivazione di un tema con facilità e inducono
Nelle cellule pie a future tornanti copie opzioni tanti al contrario di Charlot C H due sì se c'erano non aveva specifica classe di citochine inducono nelle celle Petyr cultura degli anticorpi nota di tanti
Questo è un po'la stessa storia mi sono credo che voglio dire in testa diapositiva e che i fattori che inducono a rischio differenziamento delle Circe Lucia in queste tue girasse classe
Il fatto è che un po'tanto sono in due citochine sono oggi no potrebbe molecole sono utile
E la citochine occhio importante che induce di sviluppo ed eccelle Tinagli fra verso le cellule C H uno illeciti il clima Inter Luchino a dodici
Al contrario temi sviluppo del CO due C H due e molto importante la città uccide ITO Luchino a quattro
Allora conto che c'è una certa uno se c'erano o no ma c'ha fatto una citochina che si chiama interferone gamma richiesto ritorsione gamma e molto importante per l'attivazione del baco tema con affacci induce l'immunità
Cellulo-mediata IC protegge dai patti patogeni intracellulare
Al contrario del cielo C H due
Fanno più che altro i trucchi da quattro otto educhino cinque cento di china tredici mi sono importantissime per le immunità un ovale ICI poteva notare parassiti estrazione dollari
Queste cellule C H uno e C H due sono molto importante per poter esercitare il patto già
Quando fuori controllo possono causare anche del parte del patto tour Lucia per esempio delle risposte in non controllate C H uno sono associate alle malattia otto minor conica come da Twitter crematorio deve dire pizze in soli in sol min. pendente la malattia ti conto o anche verso via sì
Mentre idea esposte C H due S sono troppo foto non controllato sono associate con presente con l'asma allergica e anch'certe a matita troppe Ca'
Allora lei è risposte C H uno e anche la stessa cosa vale anche per le risposte C H due hanno due facce sono importantissima forse è appunto un rito civile contro patrocini
Ma se esso non sono controllati possono anche ecco causate da malattia
E perché lo è molto importante che l'organismo mantiene un per il bilancio tra le due fra le due estremi
Io ho già detto che le citochine che è più importante per indurre i differenziamento delle cellule T negli Fincher C H uno il cito Chimento educhi da dodici
Questo è solo per farvi ridere perché questi citochine non hanno solo in con effetto infatti testone dei setti che io Tropici ben tenuti da dodici
Come ho già detto promotore lo sviluppo tenerci linfociti
C H uno ma anche altri funzione per esempio facilita la risposta cito tossico dei linfociti T o induce l'asse certi secrezione di interferone gamma da parte di delle celle Attilio anche dalla parte dei del cielo Mk
E ora noi abbiamo chiesto il polipo pare voglio parlare di due cose prima
Voglio parlare delle differenze tra le CIR C H uno e C H due a livello molecolare io voglio anche parlare un pochino come quel meccanismo come induce ditte Luchino dodici lo sviluppo della cielo C H uno
E per studiare presto è stato molto importanti di mettere in piedi un sistema che ci consente di ti preparate le cellule C H uno e C H due il pizzo e questo abbiamo abbiamo già notati terre vigne cellulare acciacco uno diretti H due
Taglia e cuci titanico ad uno un bel di Kale di cotone in delicate è stato usato perché per definizione invece l'ho detta del cordone ombelicale sono ormai non sono mai stati e contatti con anticinese
E abbiamo semplicemente stimolati ricuciti
Dal cotone ombelicale con un mito accende pH
Nella presenza di Tele delle citochine che inducono il tifo Renzi al mento perso C H uno in questo caso intorno chi Bathory ci e anticorpi non tra le tanto contento le chi l'ha fatto
O al contrario per ottenuta dell'uccello cerca dura ditte Luchino fattori anticorpi noto Rizzante contro Inter Luchino dodici
E dopo abbiamo guardato così fino tipo di queste ore c'erano due e abbiamo quotate la corruzione tic feste
Ti cito chi pratica queste cellule
E questo mi fa vedere a che siamo stati ingrati TA generale dell'India molto bene polarizzate fede di dieci H uno po'Tucano
Tanta interferone gamma io no solo poco enterico nel fatto mentre c'erano circa due punti producono tanta il fatto e quasi niente di trazione camma questo è solo il quasi lo stesso esperimento solo con un diverso guida otto in questo caso abbiamo guardato la corruzione intrecci annullate le citochine e abbiamo analizzato ed a questa produzione mediante un Filosa estromettere e qui si vede che De Cello C H uno producono quasi soltanto di trazione gamma e quasi nessuna intendo chi l'ha fatto mentre al contrario del caso quale Cerretti H due
Questo Ancona per la tecnologia perché ci permette di guardare alla corruzione chiede cito chi va a livello io ogni singola cellula
O che penso che i cince ci sono già stati introdotto allungo per credo posso andare più veloce sul su questa parte i noi abbiamo usato i jeans circa per Conte
Pago crollare l'espressione genica tele c'è Lucia nelle cellule C H uno e nei decenni C H due per avere dei ampere evidenze cosa causa letti Firenze funzionale tanti questo cielo
Allora penso che possono quanto andava avanti esso Cresti l'unica cosa che voglio ancora dire sui jeans se noi abbiamo usato la tecnologia della FIM cioè ex e che ogni gene e presentato da venti coppie un sedici aventi Cottier Tirolo o dicono che il titolo diretta e Gina allora non c'è solo una una parte ci tiene a che vedere che vince intero locale l'espressione del Cile ma ci sono venti e la cosa che è anche molto importante
C'è sia la si senza perfetto decine che viene analizzato che questo fine Perfect Match oleicolo ma c'è ancora sequenza che a ogni smercio al cento
Io e come potete immaginabile liberazione di equitazione
Dà un segnale potrebbe da un segnale più forte Al Pratt e come al solito paragonato mi spiace ho letto
E questo è un esempio più Fini basso che mi fa ritiro e che tipo di stazione infatti i più forte sul attrasse come accesso miss merci e questo consente proprio di diretti terminale un livello molto preciso l'espressione di ogni cena
Ok presto il ma il processo dell'analisi tramiti cince equipaggi uguale solo tutto in volumi più piccolo e con un un no Franco Stendhal che che che fa si fa nella foto io
L'unica cosa che può più importante che con Io e cince e che sono in commercio oggi si può analizzava le simultaneamente
Le espressioni Tietto undici mila Cheney
Ok noi abbiamo guardato dicendole
C H Uto e C H due idea come ho già detto che abbiamo generate dal cordone un bel decade che abbiamo stimolati condito Cina in condizione che inducono lo sviluppo di C H uno oggi apertura
Abbiamo raccolto deceduto dopo tre giorni presto il molto più precoce perché voleva io sono stato particolarmente interessato degli alterazioni geniche nella prima fase della differenziazione
Dopo abbiamo purificato le cellule dicendoci che molto importante ti guardava solo una popolazione ben definito e con con questa tecnologia
Stazioni Tierra Napo preparazione delle sonde Etò polipo cesso terrà circola male sì
La cosa più difficile in tutto questo può certo il proprio il proprio l'analisi di dati
Perché c'è una quantità massiva TT Tatti io è molto difficile di trovare presto che è importante e si trova se Pavarotti quello che non è importante sotto trattamento non avevo perso Settat
Noi abbiamo o più analizzatori data sette soltanto quando criteri statistici per non introdurre nessun Baires perché magari c'è un gene che ci piace di più uno che ci piace di meno
Noi abbiamo preparato il Livigno e C H uno cerca dura da cinque soggetti allora il abbiamo fatto dieci esperimento in totale e per normalizzare i risultati abbiamo fatto l'assommati a livello ti espressioni tutti si seicento Gini
Allora abbiamo presupposto che il livello assoluto totale nelle gli indici accomuno dove presso lo stesso c'è c'è H due
E dopo per eliminare il differenze tra donatori abbiamo fatto un cestisti udienza e a chi i testi
Per proprio di eliminarli di differenze
E per identificare i geni differenze mente è spesso in cielo C H uno e C H due abbiamo combinato Turchetti ai ultima espositivo con un livello di confidenza tra novantacinque per cento questo che c'era da solo ci dava cinquecentottanta Gini
Io le differenze nel livello di espressione attratti H uno C H due che almeno due volte questo criterio da solo citavo ottocentoventuno geni
Quando abbiamo comminate Castiglia
Turchetti aria alla fine abbiamo avuto duecentoquindici geni
E cosa sono questi questo regista completa
Attualmente fatta un po'fatica di leggerlo ma non fa niente voglio Paul solo di Enrique
Penati hotel informazione ragionevole ora Titti diciamo Pio logicamente ragionevole il primo passo che abbiamo fatto che abbiamo raccontato tutti vicini
Con con la loro funzione o almeno la la funzione presunto per esempio delle citochine fattori di crescita
Fattori di trascrizione delle molecole con Ivo il volto e nella divisione e immigrazione o anche Moni coinvolto ma segnalazione mi faccio un esempio va Fitto è spesso in tilt citochine fattore di crescita dei recettori queste Cervetti H uno C H due
Voglio anche far ridere come ne sono stati presentati i dati per esempio questo igiene interferone gamma che sappiamo già o sapevamo già prima che punto otto dalle cellule C H uno
Se questo numero i positivo con regia del che Egl indotto c'è C H uno e se negativo vuol dire che ha indotto a c'è c'è apertura
I collocare rappresento il livello assoluto l'espressione io posso vuol dire che rigide spesso il livello molto alto mentre il il giallo il Virello abbastanza basso
Allora per esempio abbiamo trovato impressione gamma che sapevamo già che io non importantissimo barca Torpedo cedo C H uno ma anche delle altre che altri geni
E un'altra cosa che che abbiamo fatto per poi Conte a mare o per validare
I tosti dacci che abbia usato una tecnologia indipendente che abilita anche già sentito IVA che il cane etiche poi ci ci sia Pea monitorare il livello detto ascrittigli Bellini dieci H uno C H due rivolgi perché abbiamo confermato il quasi tutti i geni differenziamento L'Espresso tramite i CDC
Una classe Thirty geni che abbiamo trovato
Solo geni coinvolto nell'apoptosi o in sistemi Potì o l'ITC
E questo non era noto ai tempi fatica quando abbiamo fatto questo esperimento io si vede subito che ci sono tantissimi genitivo coinvolto in questi processi che solo indotti invece C H uno e a questo punto ci siamo chi se chiesti ma questo ha una un ruolo anche funzionale per gli gli eccentrici H uno
E abbiano fatto un esperimento che abbiamo stimolato egli Migliacci H uno C H due e abbiamo guardato la suscettibilità all'apoptosi ti teste di creste giuro popolazione
E come vita o per la
Per l'apoptosi abbiamo usato da molecole che se che coloro che colloca le cellule appunto ottiche che si chiama Messina Chick mi si vede subito che le cellule cerca uno morirono molto più facile da o vanno molto più facile apoptosi che diceva sia C H due per esempio chi sono trentaquattro per cento dicendo che vanno in otto otto così nelle C H uno e ci sono sette
E l'altra cosa che abbiamo noto in questo esperimento che se abbiamo pretrattati le cellule con Inter Lucchi da dodici che il fatto che induce di sviluppo cielo eccetto uno
Abbiamo un Comotto più ceduto Chievo che vanno l'apoptosi
E a questo punto ci sono due possibilità
Ho Inter Luchino dodici ore induce un livello più alto TG lì che sono coinvolti nel processo dell'apoptosi o interlocking dodici
Induce un altro Sassetti Cini che hanno qualcosa da Falcone dell'Ukip
Con l'apoptosi in
Perché Stingo queste due possibilità abbiamo fatto un altro Gin CIPE Experiment che abbiamo usato il dieci H uno già differenziate il abbiamo coltivato per diversi tempi condito Luchino dodici
E abbiamo quotato il livello di espressione in queste cellule
Adesso penso
Abbiamo un problema abbastanza serio
Va bene ma
Non lo vede ma punto lavori no
Ma proprio con l'atto Pisoni Pisone riaccendono
Quello che che
Penso che non so come con il tempo non non voglio dire a che fa molto più lungo perché volevo solo soltanto Davy altri esempi utili ti Castro che abbiamo trovato
Credo che proprio per per tuttavia un po'un riassunto di tutti cresta atti Cresto studio abbiamo trovato una diciamo
Vicino al TG di
Che sono chiaramente differenza mente espressi da c'è Lucia ecco uno C H due che sono anche importante dal punto di vista è farmacologica farmacologico infatti abbiamo trovato una molecola che volevo presentare i ma
Penso che non
Pronto da troppo tempo fin quando lui ha fatto dei pistacchi
Che Cresto Bolek proprio abbiamo in titoli identificati tramite leggi incetta
Il nove stanno in questo momento anche quando ti ti creati inibitori farmacologico contro presto il test in Silva i questo tasso anche in il falso
Preclinica ma guardando i tempi penso che meglio che finì in quanto quanto tempo ti serve per riavviare
Questo penso che prendeva più tre minuti no perché nel frattempo potremmo
Eventualmente fare un po'di discussione con otto metri sì con anche sulla relazione di di Paolo Gasparini prima che non l'abbiamo fatta conosce vuoi venire qui sul tavolo dalla presidenza nel frattempo se qualcuno ha delle domande sulla relazione di Gasparini o anche sulla prima parte della relazione di rose
Allora forse possiamo chiedere dottor Gasparini il per quanto riguarda c'è al Senato anche a volte la parte preparatoria e la parte della navigazione dei dati puoi fare un commento sulla rilevanza delle due fasi e non so per chi si accinge ad affrontare questa problematica quale sia più importante affrontare oppure no
Ma se parliamo di chip per l'identificazione delle mutazioni come posso quelle che gli ho fatto vedere io sicuramente più importante la messa a punto delle condizioni di preparazione del CIPE
Per le patologie di proprio interesse e le condizioni di mediazione perché poi la rivelazione è molto semplice identificazione dei portatori o degli omozigoti doti prospetto all'altro e quindi il tempo per più lungo si perde nel trovare le condizioni ottimali
Più che per l'attacco con Opel ibridazione saputo se uno sul chip mette più mutazioni diverse che hanno condizioni di ibridazione non del tutto uguali tra loro una tra l'altro invece nel caso di Ciprì espressione come sono quelle che l'ha fatta vedere Lo Toro che sapesse e invece lì è sicuramente più la parte di analisi che è molto più complessa
Posso chiedere io prego Alberto Rocca ecco in questi profili di espressione
Quanto riproducibili sono esperimento esperimento a livello quantitativo
Dato c'è una differenza tra esperimento esperimento tra espressione profilo l'espressione
Questo questo proprio un punto importantissimo bisogna proprio ti stringo tra due cose una e la variabilità biologica che vuole Girella poche la variabilità Tau pazienta lato vota unito nato a lato e l'altra la variabilità dato dalla tecnologia
Dal punto di vista di tecnologia tipologia che siamo stati abbastanza foto Bazzi perché ha io ora Reality Rizzato gli stessi campioni con un'altra Genova azioni ITC
Etimologia che la vado proprio calcolato pena ma ho trovato poche le stesse Gemiti il nuovo l'unica cosa che h che è cambiato ti porto in molti i la il livello di espressione
Allora se uno vada i dati dal punto di vista fa dice attivo Padova ti trova oggi no
Comitato of diminuito Testori benissimo la riproducibilità siano guado proprio il foto fan dacci il a questo punto c'è una paio che diciamo che dato dall'accettare detta la tecnologia
Come piuttosto Ambra voi adoperate due volte quelli che sono i valori del espressione normale nostri mollata
Sì questo è per noi è stato il il cut-off questo proprio e anche un valore che no non poco a valle tutti esperimento il contesto cut-off secondo me molto importante che uno si guarda il sistema che uno analizza i i fa la statistica Green Cresto moto
Infatti dipenda anche quanto esperimenti uno uno fa
Ci sono delle altre domande
Io
Riparte il palazzo serietà ah mi dispiace
Vediamo le ultimissime
Se bisogna chiedere di avere anche una lavagna con un pennarello
E quindi
Tra le biotecnologie forza
La bagna pennarello gessetto che la prossima volta potevate più appositi va bene
Allora io palato che abbiamo anche guardato l'estrema pressione TG niente
Dopo il trattamento con con interloquita dodici
E questo questo sono i dati e vietati sono stati presentato in un in un modo che si chiama contrastata quarant'e per farlo più facile i più grosso voi volentieri più indotto il gene e per esempio ha poi ritrovato igiene interferone gamma in via anche altri cibi che vengono foto mentendo otto tra i tenuti da dolci abbiamo anche trovato e decide che vengono fortemente da un Rigoletto tanto regolata intendo qui da dodici come per esempio presto recettore
CRE ci ex Cr tre
E siccome questo che ha tonda sapevamo prima un esempio che Uncino veneta un unico dato ettari interloquita dodici abbiamo anche guardato in saggi filologici infatti da Putin Marina anche tavoli colate a livello
Te la superficie della cellula
Un gruppo tira enzimi otiti girini coinvolto
Del processo di adesione indicazione di lecco citi abbiamo anche trovato per esempio in teak Linda il declinare fra sei und altro eccettuate le chiedo chi deve cioè turpe
CCR cinque la e il selettiva Union Siva che si chiama AIAF quanti fu così transferasi sette uno fu C sette di questo genere e molto importante per il
Per i primi fasi tela reclutamento deceduti nell'altra spiegazione
Questo è un poi viene da un tondi boutique gesto tassativa positiva mi fa vedere cosa sono i fasi tipica azione dell'orco citava via voi sapete quando fece allora entrano nel ciste ci suture entrare il Fiamma a tutti non ovviamente avverte passa passare tra una
Dal vaso
La prima fase e una al addizione Scanzi Tullio che si chiama anche Eurolink e cresta immediata tra tentazione Telese il rettile che sono espressi sull'endotelio condire percettori Peri selettive che sono soli di più Citti dopo l'interazione delle chimo Kid con i recettori e le Kim Uchida
Io cellule i linfociti proprio si attaccano alla stanza strettamente assolvendo Celio e cresta interazione immediato tenti crine i finalmente decedute migrano nel
Metti istruttore infiammatorio
Allora questo in Zimbabwe
Furti sette il importante la perché catalizza l'attivo sentirsi te presto sia di l'unisex che uno componente essenziale dei di tanti sia chi e iscrisse l'ex tende
E questi ritardi sono espressi su linfociti T
E stato anche mostrato un po'di anni fa
Che troppi la caotica furti settore mostra non difficile nella divisione selettive dipendente
E abbiamo di nuovo confermato i dati che abbiamo molto in pochi minuti codici che infatti Inter Lucchi patologici a prego dall'espressione ti Cresto Gene
La cosa importante ovviamente di rilievo ritirasse festa anche un effetto funzionale qui abbiamo fatto un saggio biologico che abbiamo guardato il legame tra le cellule C H uno e C H due
Su piastre
Che abbiamo trattati compisse effettiva vedete che che c'erano circa uno si attacco alla chi selettiva in vitro mentre dieci adulti accaduta mondo farlo ovviamente questo potrebbe essere mediato tra tantissimi altri recettori ma proprio per farmi dire che questo è solo un processo immediato da cresta furti sette
Abbiamo introdotto vicine da furti sette tramite mediante un retrovirus nelle cellule C H due
E abbia avuto più visto che a questo punto invece Lucia Catullo si attacco di nuovo al PPI selettiva
Questo esperimento non funziona se usa un Enzo quando abbiamo usato un retrovirus che esprima un un controllo
In questo sperma un topo che ci fa vedere che questo enzima e l'unico
L'unico l'enzima che importantissimo quella dizione deceduti alla selettiva tenendo tiglio
E abbiamo anche quotato l'espressione di questo genere in celle CDA con pazienti con una malattia otto in una come altri tre probatorio abbiamo anche trovato che testuggini applico dato dunque meglio linfociti CD tutti questi pazienti questi sono deceduti tal più dalla periferia e queste sono le ore ce l'utilità il il liquido sinoviale le espressioni di questo genere e sempre aumentato negli Pitozzo industriale e Castro volitiva che fu C sette punto sicuramente ha un ruolo importante anche in vivo nel reclutamento i deceduti non sin d'occhio
O che abbiamo fatto anche un modello in in via Roma voglio che ha compiuto con CTO e cioè il mondo tiraggio dell'espressione genica sulla destra scada fornisce indicazione sull'interazione funzionale TV molecole coinvolte entri nomini Complessi perché siccome questo è un proprio un suo un processo molto complesso che costume sono coinvolto un Ticino anche centinaia di geni e e proprio con la tecnologia tre G in città questi ci può dare dei diretti sconnesso nelle molecole
Coinvolto in questo processo e voglio figlio da ringraziare il corpo d'attore di questo studio grazie con la trazione
Grazie Roger per questa presentazione per aver superato non solo i problemi della lingua ma anche quelli tecnici e prego gli operatori di accendere le luci in sala io aprirei adesso la discussione sulle due
Presentazioni
Se ci sono domande
Potete al centro le luci in sala per cortesia
Però oggi io ti voglio chiedere innanzitutto e c'hai fatto vedere l'espressione dei geni nelle Celletti H uno T h due generate dal sangue del cordone ombelicale
Probabilmente avete già forse dei risultati anche sull'espressione di questi citochine da cellule ottenute da diverse patologie
E fino adesso noi non abbiamo guardato dei con tramite cince non abbiamo guardato quali cince cellule tale da di criterio sinoviale per esempio
La nostra strategia proprio stato Titti quadra Lennon sistemo invitto e dopo guardare
Diciamo le dieci mila o venti Gini che abbiamo trovato interstizi stime Indirizzo
Sul intesti campioni biologici
Ma per esempio su quelle cellule su cui avete trovato l'espressione del rock ti serve non avete guardato l'espressione di diverse citochine Pavia biasimevole gamma sia abbiamo guardato interferone gamma che abbiamo anche trovato a peculato
Abbiamo guardato da espresso e dall'altro festeggia che abbiamo trovato a peculato
Le tutti proprio marcatori infiammatori solo solo a cui colate con Mondo doveva aspettarsi su queste cellule
Bene
Ci sono altre domande dice una domanda prego se può portare al microfono sì
Pronto
Sì sono prodotti rappresenta una società che operano in campo ognuno diagnostico a livello di sistema strumentale di prodotti diagnostici
Non è una domanda strettamente pertinenti all'oggetto del del convegno però penso che sia nel secondo Ines
Vorrei sapere se tecnologico del misura Redhead Inches
Possono in qualche modo rivoluzionario che l'attuale tradizionali mondo diagnostico sviluppate su tecnologie ora di immunologico Enzo immunologico e quant'altro
Siccome e perché
Grazie sicuramente l'anno adori grande effetto sul sulla diagnostica infatti ci sono tante case fama ciò Cicchetti che usano queste tecnologie più che altro per attivare relativa no stecca
E la cosa che io che io ho parlato soltanto di expansion profiling ma sicuramente un'applicazione quasi più importante può essere situata in via
Se le psicologhe del tal polimorfismi so come tradurlo e anche dire per esempio la fermezza extra più investimenti della analisi tic estive Snakes che la la dall'amnesia Amato insigniti ti costa ci può far bene queste sicuramente combinato con i sfasci può farli
è una strada molto importante per il mondo il relativo stia nostri che nel futuro
Forse Paolo Gasparini vuole aggiungere qualcosa
Sì brevemente è chiaro che sono metodologie completamente differenti se io sto se un conto è che già sono la base alimentata la diagnostica molecolare e di Modena ostica un contezza Telese c'è l'anticorpo per per esempio un un un virus o un conto è sapere la presenza del vi lo stesso dal punto di vista molecolare quello che sicuramente i mai Carrey permetteranno di fare e i macrociclo in futuro è quello di avere
Per esempio un pattern molto preciso dei ceppi virali per cui sull'unico ci Puno potrà sapere se quel paziente affetto per la presenza o meno del virus e acché ceppo appartiene probabilmente questo potrà far by passare altri tipi di voi agnostiche passa direttamente sapendo che la resistenza o meno certi ceppi batterici voglio o a Virgo far passare direttamente alla terapia
Bene non vedo altre domande quindi a questo punto c'è un intervallo che limiterei però visto che siamo in ritardo a un quarto d'ora rientriamo alle sedici e trenta
Prender posto grazie
Magari se possiamo anche togliere la musichetta che è molto piacevole però
Ok grazie
Nella seconda parte di questa sessione abbiamo come
Prima relatrice la professoressa Paola Ricciardi Castagnoli del Dipartimento di biotecnologie bioscienze di Milano Bicocca
Il Biopolo
La forse essa e c'ha dei che segnò le è una delle maggiori esperte internazionali di immunologia cellulare in particolare di cellule denutriti crede e quindi presentazione dell'antigene eccetera eccetera
La
Il titolo della relazione
Metodica dei che in Chicks
La visitazione su larga scala per la diagnostica non è quello che non rappresenta quello che sarà trattato dalla professoressa Ricciardi Castagnoli che invece parlerà della ricerca di come si sviluppa un progetto di ricerca che ovviamente ha con me
Topic principale la imbroglio cellulare
Paola prego grazie gridi
Sì sì mi scuso per due cose perché il titolo non era esattamente non rispecchia esattamente il contenuto della mia presentazione poi perché Emilio così e sono tutte in inglese mi dispiace non ho avuto tempo modificarla comunque cercherò di essere molto semplice perché vedo che questa udienza e comunque piena di giovani e mi auguro che i pochi messaggi che cercherò di dare saranno raccolti
Noi abbiamo abbiamo capito che la biologia nei prossimi nei prossimi dieci venti anni sarà completamente diversa da Radiologia che abbiamo studiato e sperimentato nel senso che
Ormai è chiarissimo che dovrà
Interagire e integrarsi alla Computer Science quindi la scienza dell'informazione e questo perché la biologia ha fatto un grande salto di qualità ultimamente perché adesso è capace di generare milioni e di milioni di dati e questa cosa nuova nel senso che fino ad ora
Il lavoro biologico e di ricerca era sempre limitato all'osservazione a un'ipotesi che veniva formulata ma il dato o i dati quantitativi erano sempre un aspetto non così essenziale più che altro si cercava di capire
E di descrivere i meccanismi adesso con queste tecnologie del della genomica funzionale e fra qualche anno della proteomica è chiarissimo che la biologia non potrà più fare a meno della scienza dell'informazione e e e che i confini che separano queste due discipline devono essere abbattuti dovrà essere battuti anche perché allo è facile capire che entrambe le discipline utilizzano codici digitale quindi hanno delle cose in comune
Entrambe richiedono tecnologie computazionali quindi ci sono dei punti almeno di integrazione
Ma è chiarissimo che quando un biologo deve esaminare questo tipo di immagine
A per lo meno un sussulto di di panico e proprio perché la generazione di questi numeri è qualche cosa a cui non siamo ancora del tutto abituati e nel nel nostro laboratorio abbiamo fatto uno sforzo per cercare di abbattere queste barriere fra le discipline e adesso abbiamo dei gruppi che lavorano insieme che sono costituiti da da informatici da Dio informatici da matematici e da statistici e devo dire che quando queste cose fu queste cose vengono effettivamente a trovarsi insieme e si può generare veramente qualcosa di nuovo il sistema che usiamo e la tecnologia di Affi metri x che come è già stato abbondantemente spiegato è costituita da dei Gin città dove è stato miniaturizzato
Sono stati sintetizzati
In in sede degli oligonucleotidi e questi particolari Città di a firma Ethics permettono di esaminare di avere dei citati hanno de dieci mila venti mila geni anche trenta mila su uno stesso città quindi si può in un solo esperimento analizzare il profilo trascrizionale globale
Di una cellula un certo stadio e di conseguenza se ne può diciamo trarre un'informazione assolutamente globale
Quello che si fa di estrarre l'RNA messaggero dalle cellule che si vogliono esaminare quando sottoposte a un certo stimolo si produce il CDMA da questi RNA messaggeri
E poi dopo si deve fare da questo ci tiene a un ci RNA Biolchini lato perché e questo che poi verrà ibridi Zattoni al città che ha gli oligonucleotidi rappresentativi dei geni e essendo le Bettina avendo una grande affinità per la vidi in A con un un metodo poi di abitino a fiori scenata si può lì velare un'immagine di questo tipo che appunto un'immagine di fluorescenza che viene viste misurata mediante una macchina che fa la scansione di queste immagini e che è in grado di quantificare come vedete qua di ingrandito di quantificare l'intensità di fluorescenza che noi chiamiamo ebrei difference e questa in testa riconoscenza voi vedete che per ogni genere vengono fatti vengono messi oligonucleotidi rappresentativi almeno venti oligonucleotidi rappresentativi di un singolo gene e i circa abbiamo usato sono cd topo che portano undici mila geni
Ma prima di farvi vedere e di discutere alcune delle nostre analisi volevo comunque introdurre in introdurre ancora l'argomento del del della metodica nel senso che
Sempre hanno io è sempre più chiaro che perché questa tecnologia abbia successo ci devono essere due cose importanti uno ci deve essere dietro a l'utilizzo di una tecnologia una domanda biologica
Possibilmente rilevante
E ci deve essere un buon sistema cellulare buon sistema cellulare vuol dire un sistema che ha una che che possibilmente deve essere standardizzato questo per assicurare la riproducibilità del risultato
E devo dire che
Forse questo è il primo caso in cui una piattaforma tecnologica ha dato come risultato quello di unificare in maniera chiarissima la ricerca di base con la ricerca applicata perché in realtà
Si utilizza ormai lo stesso diciamo si cerca la stessa cosa che molto spesso è la scoperta di nuovi geni o di nuovi profili trascrizionale i nel nostro laboratorio ne siamo immunologia e lavoriamo all'onestà di Bicocca la domanda che ci siamo posti eh se si può manipolare la risposta immunitaria e questo ovviamente il sogno di tutti gli enologi
Questo però lo si può affrontare in diversi modi
Ma noi abbiamo cercato di di ricordarci di alcune cose importanti che sono state dette nella storia e in particolare siamo assolutamente d'accordo con Pastor quando diceva
Che l'immunità è il risultato dell'acconto evoluzione dei microrganismi e del sistema immunitario ci sono voluti milioni di anni perché questi questa coesistenza è questa come evoluzione portassero a risultato che il che siamo noi e i nostri microrganismi e e quindi abbiamo deciso di utilizzare i microrganismi come come sonde quindi come organismi modello per lo studio dell'interazione con le cellule del sistema immunitario e li abbiamo usati per perturbare il sistema immunitario e pensiamo speriamo di poter
Estrarre l'informazione da queste analisi
Un'informazione talmente basta che ci dirà come hanno fatto i microrganismi a sviluppare i due processi molto rilevanti che sono chiamati Ignone skatepark cioè come molti parassiti sfuggono alla risposta immunitaria e questo potrebbe insegnarci a come regolare in la risposta immunitaria in senso negativo ovvero sopprimerla che è molto rilevante per l'auto immunità
Oppure ci potrebbe insegnare come indurre la risposta immunitaria ovvero come per esempio migliorare i vaccini che come voi sapete ultimamente sotto il danno un po'di problemi
Quindi abbiamo deciso di applicare la genomica funzionale e di studiare l'espressione genica globale che avviene in alcune celle il sistema immunitario quando questi interagiscono con il mondo dei microrganismi
E la risposta immunitaria è fatta di due fasi due fasi temporali distinte
Una fase precoce che immediata senza la quale nessun organismo sopravvivrebbe che dura che viene innescata dall'ingresso del patogeno e che noi chiamiamo lì ovviamente
Precoce perché dura dal tempo zero a diciamo a alle prime ore ma questa risposta di solito che si chiama risposte innata
A questa risposta partecipano c'è lo stemma immunitario che non sono specifiche per l'antigene e di conseguenza non si crea con questo tipo di cellule nessuna capacità di sviluppo di quella che viene definita la memoria immunologica
Per avere memoria immunologica ovvero perché il sistema immunitario Possa in una seconda Muniz azione
Sviluppare una risposta più efficace e più rapida ci volle ci vuole la mobilità mobilizzazione di cellule
Che sono invece quelle de la risposta adattativa che intervengono più tardi perché il processo richiede tempo almeno tre giorni
E non si è mai capito in realtà che cosa occorre cellula collegasse queste risposte precoci alle risposte tardive e recentemente sono stati fatti molti studi sulle cellule dendritiche
Che rappresentano effettivamente la cellula sentinella distribuita in tutti i tessuti dell'organismo la cute polmone intestino ovvero in tutte le in tutti quegli organi che interfacciano l'esterno
E le Cereda in critiche
Si sta scoprendo sempre di più rappresentano i direttori d'orchestra della sì della risposta immunitaria nel senso che regolano la risposta ma partecipano ossia alla risposta innata che ha la risposta adattativa e sono probabilmente molto coinvolte in molte patologie come infiammazione malattie infettive cancro otto immunità e tolleranza
Le prime cellule dendritiche descritte nel mille ottocento sono quelle descritte da Paul Langerhans sta nella cute infatti si chiamano cellule di Langerhans sta che no non si sapeva quell'epoca se fossero cellule del sistema nervoso uccello le invece
Destano immunitario
Non si sapeva la loro origine
Per il la loro morfologia che qui vedete rappresentata sono stati chiamati dendritiche
Però è solo un nome queste cellule appartengo al sistema immunitario e sono come le ho detto e direttori d'orchestra sono i direttori d'orchestra perché sono capaci di di
Fare una funzioni di sentinella cioè
Prendere gli antigeni dalle un cose da dove questi possono passare e possono elaborare quindi possono presentare questi antigeni alle cellule della risposta immunitaria
Che nella nella risposta innata sono le cellule le cellule NK vedremo con quale meccanismo
E possono presentare gli antigeni alle cellule della risposta adattativa ovvero i linfociti che poi daranno ovviamente anche eventualmente una risposta anticorpale
Quindi sembrano al centro della della regolazione la risposta
Ma proprio perché sono così rilevanti sono cellule che in realtà hanno bisogno di una continua
Di un continuo differenziamento e il loro differenziamento che noi chiamiamo maturazione è un processo che da un punto di vista della della profilo trascrizionale coinvolgente
Migliaia di geni e abbiamo ormai mi capito che si può dividere questi stadi funzionali in due in due principali Stati uno stadio immaturo dove la cerva dendriti Ca'e a contatto e esamina
I il mondo dei patogeni o dei microbi e il loro attraverso l'internalizzazione e questa cellula immatura poi se questo questo stimolo microbico è di una certa natura
Andrà incontro a maturazione la maturazione delle cellule dendritiche è un processo di riprogrammazione genica è una vera una vero differenziamento e porta a uno stadio maturo dove la cellule dendritiche a adesso è capace di fare attivazione delle cellule ti questo succede tutto in uno schema temporale ben preciso oggi sappiamo che si può perseguirlo
E di ora in ora e quello che non abbiamo fatto è stato proprio quello di guardare alla cinetica di maturazione mega
Io vi ho detto che non solo ci vuole una domanda biologica ci vuole anche perché questa tipologia se informativa ci volle anche una delle cellule che non siano
Terribilmente eterogenea
Perché questi esperimenti vanno ripetuti e cinque e per la riproducibilità l'esperimento
Essenziale avere del materiale abbastanza un genio e e che così che si ottengono i migliori risultati
Noi abbiamo sviluppato un un metodo di cultura di queste cellule in vitro che ci permette di mantenere le in uno stadio immaturo in vitro e possiamo farle crescere in maniera illimitata
Sono ancora indù Cibele quindi se ne mettiamo dei batteri maturano
E sono quindi capaci di rispondere agli stimoli esterni
Con questo altro senza questo medium condizionato riceve dendritiche in vitro per essere espanse andrebbero immediatamente incontro a maturazione e nel giro di poco pochissimo tempo
E seguita poi da morta porta ottica e quindi ogni volta ovviamente questo crea un problema di ricominciare da materiale biologico e con tutti i problemi che questo crea quindi l'analisi che abbiamo fatto è stata quella di guardare a l'interazione fra batteri abbiamo usato Gram-negativi
In particolare Colin questo esperimento ma ormai abbiamo anche moltissimi dati riguardo a parassiti
Tipo Lash magnati può cisto somma che sono forse quelli più interessanti e abbiamo utilizzato io il G incide a fine Tex che hanno undici mila geni di troppo
E abbiamo visto che di questi undici mila geni trenta per cento dei geni vengono vengono espresse cioè vengono compresa sono sono presenti in maniera sono differenza il mento espressi sul città quindi avendo fatto una cinetica abbiamo abbiamo avuto un totale di nove mila novecento geni che venivano differential mente espressi durante questa interazione fra batterio e cellula sentinella
Tuttavia se si fa se si prende si prendono delle soglie rigide ovvero del del del Defence cioè una soglia di terreni che è abbastanza abbastanza un cut-off abbastanza alto allora si riduce il numero a mille cinquecento geni e questi mille cinquecento geni che abbiamo esaminato
Uno per uno sono qui rappresentati con un algoritmo che si chiama senza organizer metta che è un algoritmo cinetico che fa vedere il profilo trascrizionale nel tempo potete vedere subito questi sono i tempi che noi abbiamo analizzato zero quattro sei
Otto dodici ventiquattro quarantotto ore in questa cinetica voi vedete che c'è un cluster di geni che ha questo tipo di andamento ora in questo pannello qua e più facile capire quello che voglio dire che al tempo zero cioè le cellule resti Inga non trascrivevano nessuno dei geni di questo particolare cluster numero trentadue in cui ci sono centoventotto geni
Ma che in questo cluster a quattro ore tutti i geni che appartengono a quel cluster venivano indotti trascrizione a mente
E così si può dire per questi altri cluster qui
Ora questo dice anche se guardate gli andamenti che è l'espressione genica è modificata a nude quindi che non c'è un'accensione come non ci macinava spesso o nostra cioè che un gene
Durante il differenziamento molti geni vengono accese molti spenti no c'è una regolazione nel tempo che può seguire del una diciamo un andamento a onde però questo titoli cluster Ing ovviamente
No non dice più di tanto se non che suggerisce l'andamento della trascrizione
E raggruppa i geni per andamento cinetico molto più informativa è invece la clusterizzazione funzionale per fare questo si bisogna passare attraverso una un un grosso lavoro di annotazione genica perché come voi forse sapete le i geni sono stati tutti quelli annotati nelle banche date
Dati sono geni che a cui corrisponde un numero ma per il quale corrispondono da due a dieci funzioni diverse e la notazione funzionale significa che per discipline diverse cioè ne ho coscienza rispetto di morfologia
Sicuramente il la clusterizzazione funzionale sarà diversa e quindi noi abbiamo intrapreso di fare la nostra già clusterizzazione secondo le categorie che ci interessa non annui come immunologico
E facendo questo per esempio abbiamo raggruppato i geni che vengono coinvolti in funzioni
Per noi rilevanti per esempio la la signora tra slacciati ovvero il la trasduzione del segnale e vedete che per esempio molti di questi geni che tutti noi conosciamo benissimo
No vengono regolati trascrizionale mente con andamenti che sono molto diversi pur trattandosi di proteine tipo la famiglia è stata che regola trascrizione di recettori delle chemochine e che quindi
Ho finito
Non ho l'orologio scusata già scaduto il mio tempo
No
Un'altra cosa molto interessante per noi è stato guardare alle molecole
Che costituiscono lei queste morti le integrine la famiglia delle integrine e quelle del citoscheletro perché io le cellule dendritiche io sono anche cellule che appena incontrano i batteri vanno incontro a un riarrangiamento del citoscheletro perché in realtà sì muovono e devono lasciare i tessuti periferici la cute il polmone
L'intestino per andare eventualmente nei linfonodi dove incontrano le cellule T e quindi dove possono esercitare nel in questo stato funzionale maturo l'attivazione della risposta adattativa ma è stato abbastanza sorprendente vedere che molte di queste molti di questi geni sono da un regolati vedete che al tempo zero non sono vengono da un regolati e scusate questi sono indotti mentre altri geni per esempio le le i candeline vengono vengono da un regolate ora per ognuno di questi bisognerebbe ovviamente soffermarsi
Sapendo la biologia discutere del significato funzionale di questi andamenti cinetici e è un lavoro che ovviamente è un è un grossissimo lavoro ma che può dare grandi soddisfazioni per esempio quando abbiamo raggruppato funzionalmente i geni delle citochine che sono i mediatori che amplificano le risposte immunitarie abbiamo fatto una scoperta
Che un gene che non si sapeva essere espresso nelle cellule dendritiche ovvero il gene dell'interleuchina due che è sempre stato considerato il fattore di crescita dei linfociti T
Veniva indotto nelle cellule dendritiche a quattro ore
Trascrizione a mente questo e poi veniva di nuovo spento quindi c'era una finestra temporale molto particolare dove si poteva osservare
L'induzione di un gene la cui il cui prodotto è estremamente rilevante per l'attivazione dei linfociti T
E dato che in realtà non si è mai capito come mai le cellule dendritiche fossero così attiva Tory così professioniste nella loro funzione di presentazione degli antigeni e i tempi di attivazione dei linfociti
Questo è stato un risultato chioccia molto incoraggiato a e ad andare avanti siamo ovviamente tornati in laboratorio e poi abbiamo lavorato per un annetto per dimostrare che questa cosa aveva una rilevanza funzionale naturalmente quello che uno deve fare se lavora con Gigi D'deve immediatamente validare con altri metodi per esempio tacca Manna
Dimostrare che quindi questo RNA viene effettivamente trascritto anche con metodi un di osservazioni diversa vedete qui una una PCR e c'è questa finestra di quattro sei ore che abbiamo sempre riscontrato
E naturalmente la proteina siamo andati a misurarla nel super natante e vedete che in una finestra temporale un pochino diversa verso le otto ore vediamo un grande accumulo di proteina
Nel milioni cultura delle cellule attivate da l'incontro con battelli quindi lo stimolo microbico è sufficiente per indurre per indurre produzione di interleuchina due da parte di cellule e dendritiche invece non è capace di indurre trascrizione e produzione di questa importante citochine anni macrofagi i macrofagi sono assolutamente incapaci di produrle interleuchina due e questo anche spiega
Una diatriba che andata avanti per anni immunologia fra il quanto simile quanto diverso fossero i macrofagi la cioè don dritti che e perché le dendritiche avessero questa questa capacità di presentazione degli antigeni cosiddetta professionale mentre i macrofagi no forse la spiegazione sta in questo in questo dato
Naturalmente non basta dimostrare che c'è una produzione di una città in Cina per dire che è una cosa importante bisogna dimostrare in vivo nei modelli animali che tutto questo a rilevanza e quindi naturalmente bisogna avere a disposizione un animale che sia in cui sia stata fatta una delezione nel gene quindi ai la dedizione è stata fatta nei geni dell'interleuchina due
E abbiamo potuto dimostrare che in questi topi in cui c'era la delezione del gene dell'interleuchina due quindi uno cautamente Lepida due le cellule dendritiche di questi topi non erano in grado più di attivare le cellule T ovvero non faceva non eravamo in grado i dimostrare dal topo knockout tenuto inviti che potessero indurre una cosiddetta e nell'arco
Mentre nei guai il tie tra nel topo i normale c'era invece questa attivazione quindi naturalmente questo ha suscitato molto interesse anche perché interleuchina due
è una citochina chiave anche per l'attivazione non solo dei linfociti T ma anche delle cellule NK linea cioè Killers che sono un altro un'altra cellula molto importante nella risposta immediata innata e che sempre coinvolta all'inizio dell'infezione di virali quindi veramente si pensa che non inviti che immatura nell'incontrare i patogeni e a secondo dei patogeni perché noi adesso abbiamo una lunga lista
Dei patogeni e degli stimoli che inducono questo ente Luchino due e quelli che non la inducono e soltanto gli stimoli microbici sembrano essere capaci di avere questa funzione se ne pigliamo per esempio stimoli infiammatori come citochine queste non inducono trascrizioni di Inter Lucchina due
Quindi io volevo portarvi questo esempio per dirvi che questa è una tecnologia che permette di fare di fare Jing Discovery per anche se si tratta solo di una funzione perché genera ovviamente noto tuttavia trovare nuove funzioni è possibile con questa tecnologia ed è possibile anche fare si sia un buon sistema cellulare quella che noi chiamiamo
Identificazione di nuovi target perché è chiaro che sospendiamo l'interazione di di battelli con la cellula dendritiche a chi è la cellula sentinella
E ci aspettiamo di vedere un certo pezzo incerto profilo trascrizionale quando avremo accumulato tantissimi di questi dati potremo veramente
Paragonare queste cosiddette Simina cioè perché ogni patogeno dovrebbe in teoria indurre una certa sì di merce
E potremmo trovare delle delle firme comuni e delle firme diverse e questo dovrebbe per metterci in un futuro non troppo lontano di capire anche quali sono i migliori
Bersagli per sviluppare nuovi vaccini
Questo è sicuramente un argomento importante soprattutto alla luce del fatto che
Si stanno già generando città con il genoma
Di molti patogeni
E quindi si potrà dividere l'RNA in due parti ed esamina esaminare non solo l'Effetto di questa interazione ospite parassita sulla cellula ospite ma anche l'effetto sul parassita che ovviamente
Deve essere vivo e dall'interagire e deve fare questo costo Rocco con il suo ospite si potranno esaminare le modificazioni trascrizionale nei due genomi in quello microbico e in quello della cellula e un Carlotta
E questo si potrà mettere in un grande decadenza e e l'analisi di questi dati
Con l'aiuto della statistica dovrebbe portarci a sviluppare sicuramente nuovi target
Molto rilevanti per non solo per le malattie infettive ma anche per cercare di fare quella cosa che avevo detto all'inizio ovvero gli irregolari la risposta immunitaria infatti oggi ne sappiamo che per esempio nello scisto somma quando infetta le cellule
Induce una completa soppressione dell'attivazione della cellula dendriti Ca'studiando questa interazione noi immaginiamo di poter vedere il tetto dei che portano a questa a questa manca a questa paralisi dalla cellula tende etica e ci immaginiamo di poter imparare quali sono i meccanismi e quindi target molecolari
Naturalmente questo è un grosso lavoro perché poi questi Italia devono essere validati questo comporta che dobbiamo essere in grado di mettere il gene in una situazione di di senso è anche il senso oppure comunque in una situazione di espressione o di mancanza di espressione e poi la cosa forse più difficile la valutazione funzionale ovvero di avere poi degli S che misurano funzioni quindi diciamo che questo approccio anche se a me personalmente spaventa per perché nuovo spero che non spaventi i giovani e che i più giovani capiscano che c'è un'enorme potenzialità e che quindi è solo in mano loro che questo si potrà sviluppare in futuro grazie
Grazie Paola estremamente interessante e pieno di stimoli questa tua presentazione
Subito per rompere il ghiaccio vorrei chiedere
Questa parte di profilo di espressione genica nelle cedente critiche e finire così tu le hai detto ma non non molto chiaramente è simile per ogni stimolo
Microbico cioè ivi Kimi i battiti sono uguali ai virus i virus tra loro sono uguali oppure cella una qualche differenziazione appunto tra si inquadra c'è c'è un'enorme complessità
Al punto tale che addirittura batteri Gram-negativi paragonati fra di loro danno tutti trascritto mi diversi quello che noi stiamo facendo ora
Non è tanto di paragonare le categorie fra di loro perché non ha nessun senso di paragonare il virus colibatteri alcuni parassiti
Anche se il lavoro un lavoro delle menti appena uscito su Science
Tuttavia questo non è quello che sarà più informativo
Quello che è più informativo e di utilizzare un batterio a cui si è tolto un gene della patogenicità
Per esempio dell'invasività e ci sono moltissimi microrganismi adesso che sono knockout per per alcuni geni perché diciamo questo queste competenze ci sono
E in effetti non abbiamo una Lash Magnano Cau per un gene molto rilevante all'ingresso quindi coinvolto
Nell'aderenza recettore per l'internalizzazione della DC Magna e abbiamo paragonato il knock-out diversi Magna Collège Magna
E questo è estremamente formativo perché questo ti permette di visualizzare immediatamente
Quella cosa che noi chiamiamo
Per esempio nel relativamente alle ci Magna l'ingresso nella dentistica quindi bisogna lavorare secondo me sul generale dei mutanti che rischi a che permettano di formulare una domanda precisa
E impossibile pensare di avere delle informazioni se non con migliaia di analisi relative alla
Uguaglianza diversità fra virus e batteri cioè questo non ha
Non ha non ha significato secondo Nigro l'immunità suscitata da un virus ben diversa da quella suscitata un bar sì sì infatti per esempio i virus che abbiamo esaminato finora non inducono interleuchina due quelli immuno soppressori perlomeno quindi sicuramente si può imparare ma bisogna ben formulare la domanda e soprattutto bisogna cominciare a lavorare con i patogeni veri vivi non inattivati al calore
Eventualmente modificati geneticamente
Domande
Io credo che anche i giovani possono recepire l'importanza di questi dati e l'impatto futuro
Quindi se avete anche delle domande da fare le più strane fatele pure altro Noemi vero
La signora siamo siamo abbastanza
Abituati altri domande un po'strane sono quelle più interessante
Io dico sempre se non ci sono domande signor brutto
Niente
Ahi ahi adesso rimandiamo alla alla prossima presentazione Grazie Paola
Ora abbiamo ancora un ospite d'eccezione la dottoressa si dimenava t'dell'Istituto nazionale dei tumori
La se qualcuno è stato qui ieri in nella sessione di apertura
Avrà seguito forse della redazione molto brillante della professoressa Alberghina
E a un certo momento
Un misto di
Scienza mensilmente eccetera eccetera però e a un certo momento è venuta fuori una Bella fotografia di una copertina di Newsweek
Dove c'era una boccettina con una sigla ed è in sostanza un nuovo farmaco contro il cancro e questo ne occupava come è noto che non t'corpo monoclonale
E la professoressa Alberghina diceva ma guardate questo salta fuori ora gli Stati Uniti ed è diffuso da una grossa accompagni farmaceutica
In realtà un farmaco del genere al tatto
Prodotto e anche patentato da un gruppo di ricercatori dell'Istituto Tumori Milano ancora negli anni Ottanta
Credo che qui la dottoressa menate insieme protesta Colnaghi appunto una delle protagoniste di questa monoclonale che un anticorpo che neutralizza e che blocca cellule che esprimono un recettore per le Piperno ancora un patto attrezzature di crescita dell'epidermide è vero
Sì sì Enea ma non completamente ad essa viola o vedere perché
è difficile dopo tutte le tentazioni che ci sono state fatte prima sulle nanotecnologia si parla di DNA si parla di espressione genica cento mila geni cioè dieci mila agenti
Tornare indietro di vent'anni e dare e ritornare ai vecchi anticorpi monoclonali d'altronde abbastanza importante ogni tanto fa il punto cosa le nuove tecnologie hanno dato effettivamente poi anch'nella pratica diagnostiche terapeutiche di tutti i giorni
Si può dire che io vent'anni fa quando è stata messa a punto la mitologia avente gli anticorpi monoclonali da parte di mi stagni collera
Era una tale scoperta che ha diritto a loro è stato dato il premio Nobel per averne messa a punto questa tecnologia e loro sono stati così grandiosi che questa tecnologia danno l'anno regalato all'umanità
Cosa vuol dire che non l'ambo è vietato e hanno permesso quindi al mille lavoratori di utilizzare questa tecnologia per fare avanzare la scienza sono state chiamate
Siamo non riguarda i giornali di vent'anni fa vedi che con questo si pensava di avere risolto addirittura il problema del cancro pasta la fa un anticorpo monoclonale diretto contro e cioè tumorale
E con questo il gioco era fatto diventava un farmaco completamente specifico in grado di eliminarli eccetera
In vent'anni cosa è successa in vent'anni sono stati infatti un numero di lavori mostruosi io dico dieci mila probabilmente siccome non li ho contati tutti sicuramente sanno anche di più
E che cosa ci ritroviamo vent'anni dopo con questa con questi reagenti
In antitesi tutto facciamo diciamo due piccoli appunti innanzitutto cosa sono perché sono così importante rispetto a quello che avevamo vent'anni fa vent'anni fa avevamo anticorpi Poli locali invece in monoclonale è per definizione un agente puro cioè e un anticorpo singolo chiama una sua specificità che in grado di riconoscere una un editto poi solo quello
Secondo fatto si è sempre detto si possono produrre in quantità illimitata
Io ve lo dico questo non è affatto vero e difficilissimo produrre grosse quantità di anticorpi monoclonali a costi anche diciamo contenuti parti pensare quella famosa sia leptina oggi chi è un farmaco antitumore
Costa dai sessanta agli ottanta milione a paziente come trattamento quindi canti tie limitata mai dei colossi che sono spaventosi
E voi agenti è riproducibile perché rispetto al policromi Ale quando noi avevamo i conigli io a anche gli altri animali anche il Cavallo
Morto l'animale morto il suo anti Siervo perché ogni antisì e o aveva delle caratteristiche leggermente diverso col monoclonale non quando ne abbiamo uno è questo
E per sempre sana questo quindi da dei dati che sono completamente riproducibile
Infatti lo si vede tutti i kit immuno diagnostici sono stati passati oggi
A livello di anticorpi monoclonali a che cosa servono innanzitutto proprio per la loro capacità riconoscere una molecola che poi si è una proteina uno zucchero o non tutti di antico riconoscono poteri né
Si possono fare mille te strana teste tipo
In un visto chimica quindi siano Baccolo pare direttamente la potterina sulla cella
Immunofluorescenza penso che tutti ormai siamo familiare a vedere il fax vediamo fax tutta la giornata dice piccole e avete visto le presentazioni presidenze ma una cosa banale queste banale
Perché c'è dall'altra parte nel testa un reagente denti assolutamente specifico e chi incappati capace quando si lega possiamo conclude al cento per cento e perché questa potterina questa molecola cioè e poi abbiamo tutti testa di di biochimica che sono grandiose così impressioni che voi potete avere dalle presentazione precedente che i geni fanno tutto igiene vediamo che fanno tutto però lo fanno attraverso poteri né se noi non aggiorniamo le metodologie per poter studiare meglio che poté in arriva anche all'inganno tecnologie per le proteine
Comunque ci mancherà sempre il protagonista poi di tutta la storia che la potterina e quella chi anomala in certe malattie ed è quella che contro il quale vogliamo dei bersagli
E grandiosi reagente monoclonale anche per pubblici chiare potterina basti pensare la come atto Cafiero affinità che Sam anche lì una metodologia banale
Chi oggi solo grazie agli anticorpi monoclonali può essere fatto un sistema molto ultimativa
Ma quello che ci interessa comunque di più
E il fatto che un anticorpo monoclonale come tutti gli anticorpi in grado di mediare il Chilin quindi non solo i conosce una cellula Macchi Vando o il complemento o attivando delle cellule che sono state selezionate ad hoc dall'organismo
è in grado di ammazzarla ed è proprio su questa sua capacità da da ammazzare che si è basata tutta questa grande speranza di poterle utilizzare come strumento terapeutico
Esempio di misto chimica questi anche questo sembrano delle cose banale oggi non esiste un laboratorio di patologia che non fa un teen ampiamente tutta una serie di indagine tramite in visto chimica chi dice reattività
E in Finmatica come lo vediamo qua dice perché lì la proteina c'era chiaro che chi studia i geni dice se la proteina c'era e per chi genera Espresso quindi ritorniamo a diciamo l'espressione genica però e altrettanto banale vedere già direttamente la proteina
A livello dei test biochimici è molto facile andava a vedere in modulazione di espressione di poteri né semplicemente se si hanno dei buoni reagenti reagenti monoclonale sono proprio queste quelli che ci consentono tramite un semplice
Questa in flotta di analizzare se la proteina e spesso se la proteina è stata modificata se la proteina è stata pop modulato da un modulato con in queste spese esempio ti faccio vedere qua con me
Due proteine che interagiscono tra di loro possono essere a Panda modulati da da determinati trattamenti e questo è possibile farlo di tetto contest che sono relativamente semplice
Gli anticorpi monoclonali sono abbastanza importante anche perché non solo possono vediamo una patina un po'possono vedere addirittura Lippi troppo che è determinato dalla loro attivazione voi sapete che moltissime proteine che poteva funzionare nell'organismo
Vanno incontro a delle modificazioni tipo la la fosforilazione intimo cosina per esempio è una delle dei metodi più diciamo utilizzato per l'attivazione allora se uno ha un anticorpo monoclonale come lo faccio vedere su questa diapositiva anticipo spot io così non sarà in grado di vedere se a una data mole Conan
E Fossoli lato o no e quindi si è attivato no e questo è la grande rivincita della del biologo delle proteine perché nessuna livello genico produceva mai a farlo perché queste porte una modifica che livello igienico non si vede una modifica apposta
Trascrizionale e che quindi possiamo vedere soltanto se la vuoi all'ignaro dei poteri questo è un esempio di una di un un esperimento di mentre si fa in uno precipitazione quindi a Cortina viene portata giù da un anticorpo chi riconosce questa potterina Jenin uno plottato su un supporto
E poi decorato questo questo genere la questa questo questo supporto con l'antico quanti costo tirosina come potete vedere qua c'è attivazioni in questo con questo trattamento non c'era attivazioni prima quindi possiamo vedere anche lo stato in cui la proteina in questo momento in questo momento è
Ovviamente chi lavora con le proteine molto geloso di questi grandi tecnologie delle nanotecnologia e quindi ora dice all'Europa vogliamo falle anche noi a livello delle proteine ceppo Teo mix importi Omizzolo ci si fanno in cella due dimensione si va poi con la spettrometria di massa vedere glieli porti linee tutto ma c'è un'alternativa che si sta studiando ed è già a buon punto di sviluppo che quello di fare esattamente la stessa cosa di quello che si è fatto con i geni
Con gli anticorpi monoclonali cioè se io in una piastra Semino
Per ogni Pozzetto un anticorpo specifico e vado poi ha semplicemente a fare reagire questa piastra con un estratto può teco della cellula il sa ma scatto con una melma che attualmente a Mollica Pato andava vedere dove o un segnale positivo e quindi espressione della proteina specie questa e completamente folle perché i geni ne vanno a vedere dieci mila una volta quante proteine si possono come dire dette chitarre con anticorpi monoclonali
Per sicuramente molto di più di quello che potete pensare questo è un esempio di una pagina qualsiasi di un catalogo di una ditta chiedendo anticorpi monoclonali
In una pagina ce ne sono circa duecento e di pagine così ce ne sono almeno cinquanta quindi trovare dieci mila anticorpi mo'qua e diverse
E oggi una una banalità è abbastanza facile pensai che sia possibile
Il Chievo vede dire seminare questi dieci mila anticorpi in una piastra e andare andare semplicemente assaggiare dove le potenti una cellula a rispetto alla cedola di sì sono legate vedere direttamente l'espressione proteica senza ricorrere all'espressione genica
Che ovviamente mo'indiretti dopo e dopo corrispondere
Non necessariamente perché ci sono delle regolazione a livello adduzione Ale che non vengono presi in considerazione da chi studia le renne ha e ci sono degli RNA prodotti che poi non vengono trascritti in proteine
Tradotti in proteine perché magari c'è un'anomalia quindi studiare le potenti studiare l'RNA messaggi alle non è necessariamente qualche cosa che ridondante
E con gli anticorpi monoclonali e si sta studiando adesso un'alternativa
Al proteomica si visto come doppia dimensione semplicemente andare a fare un testa banalissimo di bagni che se dovesse funzionare dare di risultato abbastanza sensibile potrebbe chiaramente da un grossissimo
Supporto
Come si può dunque non sembrerà strano sono stati inventati mila e tecnologie però ancora adesso quella che funziona meglio e quella banale descritta da accesa
Mi stagna ecco cioè quella dell'ipogeo i due di trazione sommati che attua una cellula di e una cena di mieloma
Mi Motta di Dacia e plasma c'era è stata eliminata perché nonne diciamo tanto facile
Sì sono studiate tantissimi metodologie il tipo le librerie fa AG che di anticorpi bellissimo tutto quello che volete però io non conosco ancora un anticorpo prodotti in questo modo qua Chieti sia stato utilizzato in clinica
Possono poi dopo essere stato prodotto quindi se se noi le le fondiamo la cena di troppo con un mieloma di topo abbiamo un anticorpo di topo per definizione questa Anticorpo non sarà mai Lino curabile in un uomo quindi e chiamo chi gli subentra la la la biologia molecolare in modo molto potente
Per potere umanizzare quello che viene chiamato umanizzazione cent'molti cambiare le che attende pesante dell'antico per lasciare all'antico umanizzato solo la la Regione chiari conosce l'antigene dell'anticorpo in Cina
Poi è stato fatto dei grandissimi discorsi di produzione nelle piante negli animali transgenici alcuni sono stati positivi come come esperienza e altri sono invece falliti miseramente
Vediamo innanzitutto un esempio di come gli anticorpi monoclonali possono servire ovviamente io vi dà un esempio di Oncologia perché il campo dove mi occupo ma gli stessi tipo di tecnologia si possono adoperare per tantissimi altri in tantissimi altri campi faccio vedere oggi che cosa si può fare quando sia una diagnosi sto patologica di un tumore
Il patologo quadri tumore vedesse più cosa il nucleo più grande più piccolo
E se il più anomalo o meno e quindi farà una diagnosi che morfologica alla al cento per cento a questa diagnosi morfologica noi possiamo con anticorpi monoclonale aggiungere tutto una serie di caratteristiche chiamiamoli vivo
Dio molecolare cioè tutto quello che il tumore esprime in modo anomalo e chi fa sì che poi si era in modo anomalo che fa sì che invade il tessuto circostanze in modo anomalo il fatto che sarà meno differenziato del tessuto no ma il fatto che induce la formazione di vasi e quindi siamo anche capaci di auto nutrirsi e di evadere
A distanza e in fatto che capace di annullare tutto quello che avrebbe dovuto porta una c'era così
Diciamo diversa in apoptosi quindi non siamo capaci non più soltanto di sapere che un tumore in per esempio un carcinoma tutta l'infiltrato in della mammella a sapere che questo tumore dovuto per a una serie di proteine che l'hanno fatto crescere l'hanno fatto metastatizzati e a secondo dell'espressione di queste di di queste proteine non sa quello sì il tumore stava più o meno aggressivo o più o meno in chiave espulsivo a determinate tematiche
Ma in realtà il grande diciamo la grande speranza che abbiamo detto ha cominciato già dagli anni ottanta è comunque sempre gli anticorpi monoclonali nella terapia perché diagnosticare meglio un tumore molto bello ma se non si hanno gli strumenti terapeutici per poterle occupare di acqua altamente non si apre poi più a tanto
E una realtà nipote utilizzai anticorpi monoclonale oppure è solo un mito chi rimane onco lanciamo ancorato ma tutto vent'anni che cosa è stato fatto
Sono stati generati tantissimi antico una quantità che assolutamente sarà impossibile studiare in clinica perché sono enormemente top anticorpi contro un recettore che fanno crescere anticorpi contro molecole che fanno inducono le angiogenesi quindi per inibire l'angiogenesi anticorpi diretti contro vuole colleghi in i diretti contro il fenotipo metastatico
Questi anticorpi dicevo prima
Sono difficile da poco due direttamente umano per qui sono stati studiati tantissimi metodologie per rendere l'antico fumano
Quello che conta comunque e idea un punto in cui ci si ferma abbastanza rapidamente quando si vuole andare in clinica e la produzione fa un antico poi laboratorio stesse stava a livello di Nico testa non è un problema e quando si vuole si pensa di andare nel paziente disegno aderente tramite il reagente Pisa opportuno ovviamente incidenti perché se no impazzite eccellente le legge ovviamente richiedono
Una produzioni controllato e questa il disponibilità del reagente diventa il fattore estremamente come dire bianchi e riduce la possibilità di testata e poi la loro capacità terapeutica
Sono state prodotto e come dicevo prima nelle piante
E molto deludente l'approccio in quanto la maggioranza degli anticorpi almeno la nostra esperienza
L'anticorpo viene prodotto ma non funziona bene come l'antico ha poi prodotto
Nelle nelle Cellole invito e questo perché perché le piante hanno una glicosilazione completamente diverse e sicuramente terrà funzionante all'antico colleghi così azione molto importante
Un un aspetto che volevo
Diciamo così sottolineare la produzioni anticorpo nelle negli animali transgenici secondo me questo è un esempio assolutamente stupendo
Dell'utilizzo delle biotecnologie che è quello di fare delle mucche transgeniche sono state fatte delle mucche in cui è stato inserito il gene per immunoglobuline contro diciamo agenti infettivi dell'apparato gastrointestinale
Dei bambini del Terzo Mondo il che vuol dire che queste mucche transgeniche producono latte che contiene già anticorpi monoclonali diretti contro questi agenti infettivi il che vuol dire che in un è un bambino con questo latte l'idea già spontaneamente una protezione contro questa infezione
In questo dimostra diciamo la potenza di questi strumenti perché a questo punto non c'è più bisogno di produrlo da un'altra parte di Puy Cicalò incipit basta alimentare semplicemente i bambini con questo con il latte di queste multe
Questo ripeto una delle dei grossi problemi che si sono creati comunque sia degli agenti ma penso che qualsiasi reagenti biotecnologico oggi
Ah va esattamente lo stesso tipo di problemi si è quello di produrre in grande quantità e a costi che siano accessibile per una sperimentazione questo sassi che chiaramente gli anticorpi monoclonali che i qui abbiamo risultati clinici attendibile perché i fatti su un numero sufficiente di di casi di paziente sono quelli che vengono sviluppate da ritardi compagnie è chiaro che a questo punto la questione del costo diventa prevalente bisogna crederci bisogna investire tantissimi soldi per arrivare poi abbiamo un po'd'otto che venga diciamo che si si sia e stabile non nonché funzione ma che sia almeno tre stabile
In uno tossine si pensava siccome gli anticorpi da soli non saranno molto potenti fosse meglio legali qualche cosa di tossico e lì è stato fatto
Per almeno quindici anni tutto questo tentativo di legava questi anticorpi delle tossine per Fendi alle spaventosamente tossici infatti sono talmente tossici
Che nella maggioranza dei casi esprime sperimentazione nell'uomo hanno dato delle forti e tosti citata qui un approccio che è quasi completamente abbandonato se non per alcuni casi molto specifici
Dei quali non entro i quindi antico e che hanno dato dei buoni risultati sono gli anticorpi anti linfoma questo perché perché sono molto più accessibile
Rispetta i tumori solidi la massa tumorale non è una massa compatta e quindi anche una grossa molecola come un antico perché un anticorpo una grossa mole anzi cosa Papin appesa quasi duecento mila Ande Dalton quindi non Tisci cimenti va a penetrare bene in tutte interstizi di un tumore solido quindi i primi risultati sono stati ottenuti con le rocce mie con dei dati in Coppa già ante non certo come dire definitivi
Adesso vi parlerò brevemente invece di quello è una fialetta che di di cui accenna il presa che Cobianchi che questo nuovo opere agente opera gente che è diretto contro nuove accettò e tra un fattore di crescita anche le ardue in nero
Che opere spesso nei nelle celle di carcinoma della mammella
è un vecchio target esclamò l'aveva identificato quindici anni fa i primi antico abbiamo qua e sono quindi stati prodotti quindici anni fa e ci sono voluti quindici anni che aveva una prima sperimentazioni in vivo nei pazienti
Questo per dirvi che cos'è il percorso che deve fa un prodotto biotecnologico per arrivare alla sperimentazione clinica
Quindi non non non sarei stupito che tantissimi altri prodotto altrettanti validi
Avrei potuto dai risultati non le hanno ancora dati perché è troppo presto per vedere il risultato l'antico è stato ovviamente umanizzato avanti dopo di topo che stato umanizzata questa specie di chiavi viale
Nera con il greggio è la parte umana e l'unica parte murina che è rimasto dell'antico per questa parte giallo
Il vantaggio è che questo poi sino curato nei pazienti a tonnellata non induce risposta immunologica quindi completamente inerte per il sistema immunologico e quindi non viene rinnovi e ne ha ridotto gli interesso di queste con questo e non è un target che tumori specifico questi recettori sono espressi un pochettino da tutte le accetti e Peter viale
Anche se in bassa cioè quello che noi chiamiamo bassa quantità interesse che nel tumore ovvero espresse alcuni tumori possono abbia anche cento volte la quantità di recettori e più importante è notare che l'inibizione dopo l'infiammazione la si vede soltanto nelle cellule chi ovvero esprimono
Come è possibile questo sì recettore fa crescere il sì alle Cenomani che certo morale perché inibisce la qualità il senso di quelle tumorale
Semplicemente per il fatto che c'è normale hanno mi chiamo dieci meccanismi diversi chiede proposta politica vale se io ne spengo uno
Gli altri nodi rimangono attivi
Nella chat umorali e chi invece a quest'opera espressione le altri meccanismi sono stati quasi completamente
Da un modulato perché questo meccanismo sembra talmente vantaggioso talmente facile da sfruttare che la cella ha considerato Dinoia più bisogno del resto
E infatti a questo punto se spengo questo
Io la cella va in apoptosi quindi questo è molto chiaro che questi anticorpi monoclonali una caratteristica non soltanto di spegnere la polizia azioni ma di portava l'apoptosi che Cellole che hanno loro espressione del recettore
Mentre le cellule normale non vengono toccate anche se l'antico o si lega
E questo è dovuto al fatto che l'antico il dire c'è questo percettore nella sua di via di trasmissione del segnale in realtà ardue Pasco e diverse uno che porta la cella le alla divisione cellulare ma un altro che porta e segnali di sopravvivenza la cioè non deve morire perché deve moltiplicarsi
Se noi spegniamo il d'un colpo questo segnale cioè non sono non si divide ma muove
Questo sembra quindi i reagenti ideale visto chi invito ammazza li Cellole che hanno nove espressione della certo
E diamo negli animali come funziona e direi che nell'animali funziona benissimo uno e dieci come vedete qua nel nelle mani di controlli tumori cresce benissimo nell'animale trattato non cresce
Attenzione perché qua il trattamento è stato cominciati insieme agli no quello del salto morale quindi è vero che l'antico protegge dalla crescita condizioni di comincia il trattamento molto precocemente
E questo sarà la limitazione che vedremo che a tutti gli anticorpi monoclonali
Piccolo particolare però invitò abbiamo detto l'anticorpo amata eccetera apoptosi perché immobilità eccetto ove la facciamo indico invece non funziona affatto così nel topo è chiarissimo
Funziona come dire Fava un anticorpo che si rispetta cioè mediando la tossicità tramite ha desistito cioè attiva letti ed attiva de de dei linfociti che ha nove città e per le feci e obbliga questi linfociti ad ammazzare il tumore
Quindi abbiamo due metodi due due attività completamente diversa quando guardiamo le attività invito voi l'attività nei topi invitiamo dopo perché questo può essere rilevante
La cosa più importante che è stato trovato e che l'anticorpo
Comunque Sinni Agizza con farmaci antitumorale è chiaro che per cominciava una terapia con un antico a Como prime nessuno aveva mai disponibilità di pazienti chi non chi non devono fare comunque la terapia convenzionale che che è stato già stabilito per questi casi l'interesse che aggiungendo l'antico si vede anche un effetto terapeutico maggior come vedete qua per esempio quando è l'anticorpo più un farmaco che si chiama per il tax solo vediamo Kjetil due reagenti da soli danno una piccolissima in
Inca prima ovviamente altro immensa se ne viene fatta una fase uno per una fase duetti di salto per passare direttamente alla fase tra enti al signore della mammella
Circa quattrocento casi trattati con un farmaco più antico poco il farmaco da solo quindi uno studio randomizzato in cui metà dei pazienti ricevono antico pelata lamentano
I risultati sono questi
Questo
Tanto potrei succeda quanto quando la malattia riprende a a a proliferare dopo la fine del trattamento
Come vedete quali che hanno fatto soltanto un farmaco hanno una una media un cinquanta per cento di ripresa a quattro mesi
Quelli che hanno ricevuto l'anticorpo a sette mesi allora lì gli ottimisti dicono ha fatto piatto
Pasqua possiamo passati quasi a otto i pessimisti dicono in fondo ha dato solo quattro mesi in più
Penso che la verità sia un pochettino in mezzo cioè e comunque un ottimo risultato il fatto di avere spostato questa Cuba di di circa il cinquanta per cento
è chiaro che non abbiamo come vedete qua il numero di pazienti che sono stati stipulati da queste tematiche a e disse decisamente e risolve lo vediamo nella diapositiva successiva chi è
La sopravvivenza queste malattia metastatica malattia avanzata ovviamente che è una studio di colpa siccome si comincia sempre così vedete che la sopravvivenza è passata dal sessantasette al settantadue si è guadagnato dieci per cento
Dieci per cento a prezzo di una certa che abbia tossicità
E anche al prezzo di ottanta milioni appartamento
E molto incoraggiante e quindi oggi nel mondo credo chiese sono stati iniziati
Circa quaranta azionaria alla Diversi con malattia molto meno avanzata di questo
Con tutte le combinazioni possibili farmaci anticorpo monoclonale più Tazio antico pomo qua più agli amici anticorpo monoclonale più Cms anticoppia prima anticorpo durante anticorpo dopo
Del del del farmaco
Il risultato sia vanno
Fa almeno cinque sei anni perché con la malattia
Diciamo precoce e chiamo che disegnano aspettava un tempo molto maggiore per vedere che cosa succede comunque la fine questo è agente è stato registrato come farmaco antitumorali per la malattia metastatica
è stato registrato da lei vive ed è a un piede in in vendita in Italia sempre per questo tipo di
Di inviti tematica
E si può dire che questo è un po'il primo anticorpo monoclonale
Diretto contro un bersaglio di una malattia ai incidenza notevole come incassiamo alla mammella chi ha dato di risultato tale da arrivare alla registrazione del farmaco
Tantissimi altri studi su cinquanta pazienti venti pazienti trenta pazienti hanno dato dei risultati che sono interessante ma non sufficientemente anziché al potere diciamo ai vari conclusione io ancora ma
Finito
No allora io chiudo gli quindi la conclusione
Gli anticorpi monoclonali è sicuramente negli ultimi venti hanno fatto fare un Passavanti alla biologia enorme perché ci permette ristudiare con dei metodi estremamente precisi e specifici
Le proteine espressi in determinate situazioni
Sono sicuramente degli agenti terapeutici
Potenti che dobbiamo però imparare a manipolare e a studiare
Vorrei concludere su questa su su questa diciamo annotazione
Se gli anticorpi monoclonali funzionano provocando e dissi sì
Il fatto di andava mescolato insieme affamarci chi ammazza non li uccello né che possono fare di Sissi trova ovunque azionarie molto molto debole
Sono stati inaugurati adesso circa trenta mila pazienti con le assetti ENA e dopo trenta mila paziente non sappiamo ancora in vivo esattamente come funziona che se si sapesse come funziona fosse potremmo fare delle combinazioni i trattamenti chiamiamoli più intelligenti fisso che queste nove agenti intelligente dobbiamo anche imparare a utilizzarlo fossi in un modo più intelligente con questa denunciati
Grazie scrivi quest'ultima notazione richiama
L'attenzione di tutti sul fatto che ancora alla ricerca di base la ricerca di trasferimento
A livello di prodotti commercializzati ancora una grossa
Quota di di di di di interesse
E cioè evidente che capire il meccanismo d'azione di questi anticorpi potrebbe facilitare grandemente il loro uso in una
Determinate situazioni opposto che dell'altra
E quindi questo è sicuramente un così una nota di attenzione per me tutti e ovviamente per coloro i quali sono nelle Company farmaceutica
Domande
Il presso la storia
Sì in questi dati molto interessanti sull'uso clinico diverse e Sting
E diciamo sui tentativi di miglioramento mi domandavo se è stato fatto un tentativo di selezionare la popolazione di pazienti andando a vedere il livello di espressione
Del recettore che sangue no l'ho detta Massolo pazienti che annovera espressione no non è fatta che oltretutto tenendo conto del costo della terapia nominano i soli pazienti che ha ironicamente la veste se n'era certo insiste
Zero un'altra domanda visto ma e lì in fondo si signore
Volevo chiedere se è possibile pensare a uno rozzo
Con altre anticorpi monoclonali perso targhetta molecolari specifici
Diciamo così anche considerando il nuovo impulso della proteomica proteomica che potrebbe aiutarci a
Individuare degli antigeni tumorali specifici per diverse forme di
Il cancro insomma se disagi tenga presente una cosa innanzitutto l'anticorpo può funzionare solo ed esclusivamente se la molecola espressi me Moana brillanti Coppoli conosce quindi la cella
Viva
Se no come fa ma mai ad ammazzare quindi tutti gli anticorpi prodotti conto quelle molecole nella cascata gli enzimi alligna dei recettore sono potentissimi reagenti per studi di base non hanno nessuna prospettiva terapeutica quindi cominciamo a selezionare un numero di reagenti che non è poi così così ampio però ci sono ripeto tantissimi studi trial con anticorpi anti recito anticorpi anti vasi anticorpi anti
Fatto di proliferazione di vasi
Chi sicuramente daranno nel giro si spera di cinque dieci anni risultati per vedere se se possono essere utilizzate
E probabilmente il futuro osava di utilizzare più di un anticorpo monoclonale in modo di targhe tale più steppe della del della progressione tumorale insieme comunque a farmaci che sono in grado anche di tipo in sinergia di di ti ammazza il primo
C'erano domanda della Paolo appello in difesa anche della fascia volte nome scontro formazione nodo difesa sono una quello no mi ha mi ha molto interessato quest'idea di metti di fare dei mai terrei con monoclonali
La la domanda è e perché non gli hanno ancora fatti e comprare tutto quel catalogo fosse coste diversi miliardi
Dipende testi magari il il Macro Aree con gli anticorpi lo fa la ditta chi ha fatto il catalogo
è un rivenditore
No petto anche ex e ai venditori torce le agli anticorpi sono tutti lì i geni non credo che nessuno aveva la collezione di Tennant paese a destra sinistra
Con gli anticorpi si può fare esattamente la stessa cosa non c'è un motivo che sia più facile con i geni che con gli anticorpi
Le difficoltà è che non si può Micco mitizzare il tutto come si fa col DNA perché gli anticorpi come tutti gli agenti proteici
Hanno la conformazione che gioca abbastanza da qui non non puoi solubilizzato e non può e cioè un po'di problemini tecnici ci sono vari concettualmente dopo è è fattibile infatti lo stanno già facendo non è un cova diciamo un prodotto non è un prodotto però lo stanno già facendo
Bene grazie dottoressa mena abbiamo l'ultima presentazione della serata il professor Franco De Simone descritto zooprofilattico sperimentale di Brescia
Paola all'impiego di biotecnologie per la diagnosi delle malattie infettive degli animali
Lavoro ringrazio innanzitutto gli organizzatori che mi permettono di fare questa Inter per
Lavoro in questo istituto Brescia che appare un bell'edificio una campagna in realtà questo è l'unico campo che è rimasto libero
E questo aspetto così bucolico rappresenta un po'anche quello che avviene nel campo delle malattie infettive degli animali in genere tutti hanno degli animali un'idea
Di fare rossa nota problemi difficoltà in realtà le specie animali hanno una quantità d'ogni specie animale a una quantità di agenti infettivi così elevata che moltiplicando questo numero per il numero delle specie che bene o male o per perché sono animali d'affezione o d'allevamento o perché sono interessanti perché causano malattie zoonosi che quindi anche all'uomo il numero di queste di questi gli agenti azionario dieci di malattie infettive impressionante
E poi che oramai la l'uso tipi e tecnologie
Per la diagnosi di queste malattie generalizzato generalizzati le non vi do un elenco Lunghi nessuno tipo indice Pmi Cyclopaedia dei casi in cui si applicano biotecnologiche ma cerco di tardi
Degli esempi di Biotecnologia applicati a un determina a due diciamo malattie molto correlate tra loro di origine virale e che verso cui diciamo quasi tutte le diete una logica applicabili sono state applicate quindi uso un modello pratico
Devo anche dire che rispetto a quanto si dibatte in genere in queste occasioni mentre qui
Tutti gli oratori che mi hanno preceduto parlano oggetti curare alcune al alcuni pazienti
Nel campo dalla veterinaria i malati in genere sì ammassando no quinti e quindi il problema
Dovete capire che le le le cose che muovono la diagnosi delle malattie infettive degli animali sono fortemente diverso che ottiche da quelle che invece interne sono l'uomo ad esempio una delle cose veramente importanti e che hanno dei fattori di rischio normi è il movimento degli animali
Voi capite che gli animali sono circolanti oggi in una
Do spaventoso e se non possono arrivare direttamente da Dini vanno darci ed Acilia io ci arrivano lo stesso questo pone dei problemi sanitari enormi e la diagnosi di queste malattie
è una diagnosi che pone per le effettive difficoltà
Io prendo come esempio il virus
Di malattie detto due circolari perché causano come sintomo evidente nell'animale delle vescicole e questi quattro agenti eziologici
Tratto solamente di due dei primi due che sono il virus dell'afta che un picco arma virus e il secondo elencato il virus alla malattia vescicolare dei suini che pure un piccolo ma virus ma il primo del genere a studi russi sul condono entro virus la difficoltà ad esempio di quello che sapete che l'afta una malattia che ha una penso quella che in assoluto tra uomini e animali ha una capacità di diffusione enorme cioè non conosce confini
è presente in sette siano tipi ogni siero tipo
Ad esempio vaccinale bile però una volta generati gli anticorpi protettivi l'animale resta spero petto verso gli altri sei per cui anche la vaccinazione non è che poi che porta grandi benefici o per lo meno esige una una uno studio forsennato per stare dietro alla un po'quanto avviene come l'influenza nell'uomo
Colpisce delle principali specie allevate che sono quelle che costituiscono poi reddito zootecnico dalla di qualsiasi Paese del mondo occidentale
Ad esempio nei Paesi dell'Asia in alcuni non abbiamo i suini perché ovviamente un ospizio che non viene considerata come interessante
Il vero se la malattia vescicolare dei suini è un unico signor Lotito a quattro sottotipi dicendo
è una malattia meno grave dell'asta però siccome ho dato i sintomi di assolutamente identici
Non sapendo quale di quale delle due si tratta quando c'è una e Fidenza di malattia vescicolare clinicamente si applicano gli stessi criteri che sono il blocco sanitario eccetera
Quello che occorre in questi casi è fare molto in fretta una diagnosi e per questo si ricorre a
Si ricorre alle metodologie che ora di Brusca tentano di descrivere sempre ecco ricordando qualcosa di questi due agenti eziologici
Ricordiamo che il virus dalla Nautilus circolare i suini è un virus che è stato detto all'inizio ha dato dei problemi sembra legato alla avere qualche pot capacità zona logica d'infezione ed è molto correlato al virus umano corsa che di cinque comunque attualmente queste trovino Russo è presente in Italia è l'unico Paese della Comunità europea in cui il virus presente
Bisogna anche che io vi dica qualcosa su cosa voleva dire nel passato da fare una diagnosi e che cosa vuol dire oggi fare una diagnosi naturalmente con l'aiuto
Di biotecnologiche
E nel nella nel passato esistevano vaccinazione obbligatoria per l'asta
E e questo vuol dire che di anticorpi erano un segnale di protezione ma siccome dal novantuno alla vaccinazione non è più utilizzata gli anticorpi oggi vogliono indire contatto
Anticamente c'erano tre tipi sierologici detti europee il cui badare oggi praticamente tutti e sette i sierotipi sono in un'attenzione
Nel passato i flussi migratori umani animali erano pochi controllabili oggi i flussi migratori sono incontrollabili specie dalle zone endemiche che sono le zone mediorientali
Orientali
E le reazioni reagenti erano molto semplici isolamenti o virtuali all'assunto moto Lucia evidente cioè esisteva ma pochi mezzi ma la malattia era abbastanza controllabile oggi esistono reagente operazioni complessi
Ma la situazione e diminuita quella che l'attenzione diciamo sanitaria
Per la clinica dell'animale eccetera e qualsiasi cosa viene mandata al laboratorio per cui la diagnosi e più impegnativa per questa genericità di campioni in genere negativi
Alla malattia vescicolare prima erano infezione diffuso in Europa nel mondo delle attualmente l'Italia è l'unico Paese infetto ecco in quest'ambito si muove ad esempio la la diagnosi assistito dal biotecnologiche che sono Boy gli anticorpi monoclonali le loro azioni
Di amplificazione la sequenza dazione di antigelo e compì in avanti impettiti i vaccini innovativi
Gli anticorpi monoclonali sono per l'esperienza che io ho fatto dell'uso di questi i reagenti che produciamo un istituto fin dal mille novecentottantadue
Sono diciamo una rappresentano una tecnologia matura ma che ancora inesausta per me ha dato e continua a dare dei risultati straordinari e ha permesso di risolvere un'enormità dei problemi
Sono molto usati per la diagnostica virologica per l'identificazione di anticorpi
Differenziazione qui intendo il due virus After malattia vescicolare dei suini per fare i profili anti igienici e anche per determinare la cronologia dell'infezione perché nel caso di epidemie
Il momenti poter determinare il momento a cui risalire l'infezione molto importante
Ecco vi faccio un esempio che dopo riprenderò per una situazione che ad esempio si è presentata
Nel mille novecentonovantuno in cui in Italia c'è ora una variante del virus della malattia vescicolare dei suini che
è partito dalla zona dall'isola di Ischia ecco dando alle lamentino familiare nell'isola d'Ischia sia diffuso torna l'altra Italia causando un'epidemia
Questo esempio serve per dimostrarvi la capacità discriminante che noi otteniamo con questi anticorpi
Nel nel mese di luglio e di agosto del novantadue una la malattia ha continuato ma la tv circolare i suini ha continuato a espandersi in Italia ma noi abbiamo immediatamente ho rilevato che il virus da un certo momento in poi e era differente da quello diciamo nostrano domestico e abbiamo saputo nello stesso tempo che un'epidemia si stava verificando in Olanda
E e questa è una fotografia Donadio positiva veramente una riuscita però è come una semplicissima relazione non enzimatica in cui noi vediamo tue campioni
Vediamo due campioni esaminati
A definizione non diluito con altre erette i controlli sentire nell'asta food maltesi Sly Rusca dei tipi o ai CD il controllo dalla Mattel sovente si guardi rischi che questa malattia vescicolare
In realtà vedete che i i questo campione esaminato con tre pannelli differente di anticorpi monoclonali che sono il dieci l'undici e il dodici
A una reattività con tutti e tre il tipo che diceva
Diciamo derivato dalla dall'isola di Ischia chiamato Italia novantuno
Mentre invece che abbiamo avvertito l'immediata variazione rispetto al campione intervenuto da un certo punto in poi perché manca una relazione completa con questi anticorpi
Successivamente questa epidemia si è sparsa in tutta l'Italia in Hispania nel Portogallo in Belgio aveva anche nell'Olanda
Pur rimanendo contemporaneamente anche l'altro virus
Finché queste caso veramente disgraziato che può succedere
Oltre alla malattia vescicolare dei suini è intervenuta l'ultima epidemia di afta in Italia
Che ha colpito la Bassa Italia e per uno sciagurato trasporto di animali malati anche dei grossi allevamenti in provincia di Verona
Ecco vi voglio voglio dimostrare che in questa situazione
Estremamente confuso da questo punto di vista però con sempre con una semplicissima rotazione non enzimatica nuovi questo è è la verità di quello che è successo in quel periodo non credete che siano in grado di dirimere se una
Filorusso
Questi sono diciamo reazioni che si ottengono
Da estrazioni dal di organi infetti quindi sono la prima immediata risposta occorrono circa tre ore da quando ci arriva il campione patologico emettere un giudizio innanzitutto differenziare ad esempio questo primo campione casta da questo secondo campione che malattia vescicolare dei suini
Però i differenziali subito ecco qui una relativa una bassa o nulla reattività
Con il primo pannello di monoclonali che ci dice che questo virus è un virus mutante rispetto diciamo a quello di referenza
Finora osservato come quello strano che cui oramai vedete ha perso la reattività
Sul primo però Sulta membro numero dieci di anticorpi caratterizzanti il burbero martiri circolare dei suini
Per ecco applicazioni con is here sono talmente oramai non per le città una cioè vi cito solamente che vengono abitualmente impiegate per questi virus o circolari una variante che ne abbiam trovato molto buono a una reazione in cui
Il campione patologico lotta alla malattia vescicolare dei suini che in genere sono le feci di questi animali vengono messe in piastrine a cui e allegato un anticorpo monoclonale si attua quindi una immuno purificazione
Dall'eventuale tiro da queste feci e sul virus così isolato si applica la relazione di amplificazione insidiare eccetera ecco questa è un'applicazione molto
Noi abbiamo appunto fatto un lavoro uno studio sulla malattia vescicolare dei suini che come vi dicevo è correlato a un patagio normanno causa questa malattia indistinguibile dall'asta
Ed è conosciuto un solo siluro tipo anche se esistono
Dalle notizie su
Albino quattro giorno Titti
Questo piccola nativo russo formato da dodici tentando veri ognuno dei quali costituito da cinque protone ricomposti dalle quattro proteine virali che il PPI uno dei più antichi Trevi P quattro
Abbiam fatto un primo studio in cui per identificare i siti anti igienici
E per fare questo abbiamo usato un metodo indurre dei montanti
Degli schemi induttanza utilizzando a undici un pannello di undici anticorpi monoclonali
E
Infine abbiamo questa è stata una prima parte dal lavoro la seconda parte è stata quella della valutazione dell'evoluzione del profilo antigenico dei isolati proprio ottenuti dal campo
E per quanto riguarda appunto il la mappatura dei siti neutralizzare anti abbiamo utilizzato questi undici monoclonali che vedete qui elencati
E di ognuno di questi abbiamo generato degli schermi in Tanzi che sono vedete hanno lo stesso siglata l'anticorpo dal su cui sono stati indotti e che sono elencati in questa riga
E naturalmente vedete che abbiamo
Identificato cinque sui tiranti antisismici
Che essendo indipendenti indicano la presenza di cinque distinte regioni
Attingono teorizzazione ricordiamo che ognuno di questi è Scremin Tanzi che è sensibile all'anticorpo ad esempio prendiamo ecco il tre
Lo so ecco l'uno per Israele questo uno vi sarà chiaramente viene neutralizzato dall'anticorpo uno P tre
Perché sono perché questi sono anticorpi
Capaci di neutro anticorpi monoclonali capace di neutralizzare diretti tutti verso siti
Conferma nazionali però quando io coltivando questo virus
Collanti corpo vitree ottengo un mutante capace di non essere più neutralizzato e chiaro che questo virus e che ho sviluppato questo rischio militanza non sarà più neutra Rizzato davanti il corpo e quindi vedete la casella bianca che vuol dire assenza di
Assenza di reazione perché queste reazioni dopo aver fatto relazioni Tissi era un'autorizzazione per ottenere gli Escape militanza ed infezione queste invece sono reazioni
Immuno enzimatiche normali vedete che allora riusciamo a RAI a identificare cinque zone di cui una però questa comune vedete a il sito che è stato definito uno ora questo il sito uno complessivamente che abbiamo però differenziate in una in un hobby perché c'è questa parte di il virus che non solo vengono spie sono diventati resistenti a questi anticorpi ma anche a questi
E ecco
Se poi con un'operazione di sequenze d'azione diranno a mappare
Per diciamo noi figli dieci spieghi un trans che si sono ottenuti
Troviamo che il rispetto se questa è la proteina virale intercetto originario da cui siamo partiti
Troviamo che la che nel proprio nel alla vino acido centosessanta frecce una la mutazione che interessa il sito secondo che vedevano prima e così via al settantatré settantasei quella che era elencata nel sito terzo
Al duecentocinquantotto quella che erano in casa nel sito quarto e in questi due punti le altre
Ecco questo è un lavoro che ad esempio oltre questi sono siti già descritti questi sono siti nuovi che sono appunto emersi con questa tecnologia e se e questo lavoro è stato fatto dal nostro collega spagnolo che era con una
Un programma utilizzato in questi casi da costituito presta probabile
Questa probabile
Topografia no tesi
Tele proteina spirali e vediamo che quelle che riguardano nel sito uno a sito quarto che sono quelli che ci interessano disposti in in se in questa seduta superiore e in questa veduta laterale hanno queste collocazioni
Che poi particolarmente ad esempio il sito non nuova mostra ecco una collocazione in cui si vedono che la proteina quella marcata con il colore delle rotte e disposta a vicino all'asse centrale in una posizione detta dal vertice che una posizione immuno dominante è strategica per la
Sia per l'inflazione ma anche per la produzione di anticorpi la protezione eccetera
Poi abbiamo caratterizzato i ceppi dal campo più di centottanta raccolti da Italia Spagna Olanda età Ivan
E abbiamo vedete utilizzato in questo caso un pannello di anticorpi monoclonali più vasto
Questi sono i ceppi raccolti dal mille novecento novantadue in poi quelli raccolti in precedenza dal sessantasei a oggi
Fanno parte già del gruppo primo secondo e terzo che sono quei famosi quattro gruppi distinti
Distinguibili
Sia antisemita mentre che c'è un genomica mente
E quelli dal novantadue in poi vedete che qui abbiamo coglie abbiamo i primi dire russo raccolti in impara in pratica cinque Ceretti raccolti
Nel novantadue fanno parte della stessa
Quando vi ricordate vi ho detto U apparivano variati ecco questi sono ancora quelli osservati
I tempi ci al vecchio diciamo genotipo e qui appaiono ad esempio quelli nuovi vedete che
Se noi andiamo a a a osservare essa nel dettaglio il significato di questi
Di questi siti vediamo che ad esempio quello riferito
Al sito uno a era rimasto immutato
Tranne qualche variazione che però non ha avuto seguito rimasto immutato nel tempo quindi sono quelli siti molto conservati vedete che è presente anche nel
Nel coxa chi umano e anche ad esempio il sito secondo che è praticamente molto conservato
Mentre invece ecco io anche il sito quarto è un sito che era rimasto e cioè in pratica da quando è stato prodotto l'anticorpo monoclonale reattivo con il nuovo tipo comparso nel novantadue quello comparso in Olanda vedete che praticamente non ha subito quasi variazioni tranne alcuni cambi in questa posizione duecentosessantasei che vi ricordo è una di quelle che avevamo ti ho scritto prima nei seggi e schemi riluttanza il sito terzo anche lui si dimostra abbastanza stabile
Con qualche variazione
A questo livello sempre
Nel nella nella posizione determinata quel due schermi intanto mentre invece presto dimostrare una variabilità
Piuttosto notevole che specialmente da quest'anno in poi si estende
E qui anche i primi sono stati notati questi cambiamenti se consigliando questi ceppi in queste posizioni queste posizioni sono quelle che
Abbiamo visto determinate con la sospensione degli schemi riluttanza e quindi questo lavoro è un lavoro che serve appunto a chi arriverà a determinare caratterizzare
Il virus gli anticorpi monoclonali sia poter
Tirar fuori quei pannelli usare quei pannelli di cui parlavamo all'inizio e che servono con quelle reazioni così semplici a dare quelle notizie immediate ma così importanti perché noi abbiamo sempre una fretta spaventosa di sapere se asta se non è alta S. asta che ridusse
E e quindi quindi abbiamo appena è corso un dei conventi che passo velocemente per quanto riguarda i risultati che abbiamo ottenuto con quello studio e un uno studio ci ha permesso ecco di determinare che questo sito quarto presto monoclonale corrispondono da questo sito un marker del quarto gruppo
Il più recente quarto gruppo più recente per dire quello comparso nel novantadue e che tutt'oggi infetta
Due
Ecco come finiscono con quello studio antigenico con lo studio genomica è possibile ottenere praticamente gli stessi
Risultati in questa Predator la suddivisione nei quattro gruppi ottenuto studiando dalle zone dalla proteina virale ognuno elaborate con quei programmi
Infine
Ecco una delle applicazioni molto così gli eleganti quella che
Qua quanto tempo mi resta
Quella che abbiamo con una la possibilità ad esempio di fare una distinzione anticorpale degli animali ad esempio che sono sani oppure che sono stati vaccinati solamente con inclusa l'asta oppure che si sono infettati con il virus all'asta sono tre che distinzione in tre categorie fondamentali che con i sistemi attuali che sono sistemi di anticorpi
Diretti verso la proteina virale del virus non ci possono autisti citando così la positività verso il virus all'asta ma non ci dicono se l'animale deve questa positività alla vaccinazione uno anche all'infezione
E questo principio molto semplice si basa sul fatto che quando un virus infetta una cellula e si hanno tutte le varie formazioni
Dalla Caccini dove dall'acido nucleico tramite le varie proteasi e polimerasi rimangono alcune alcune di queste mentre nell'animale vaccinato vedete abbiamo solo le proteine esterne che poi in e impressione non ha un sistema immune danno quell'origine a queste a questi anticorpi
Nell'animale invece insetto avremo anche le delle proteine ormai strutturali che sono quelle che hanno contribuito a costruire il virus perché infettante ma che poi ma che non sono però parte del virus infondate il testo
Che essendo però proteine inducono la produzione di anticorpi e e quindi se non riusciamo a riconoscere questi anticorpi rispetto a questi avverte potremmo decidere se l'animale era infettato no
Ecco quindi con questi metodologia è stata isolata e e trovata come tra le migliori per questo uso una proteina non strutturale che chi a Milano tra vicini
La quale è stata di cui è stato fatto un antigene ricombinante e da cui poi è stata fatta una il preparato una relazione immune enzimatica che per in per per semplice torna per semplicità viene attuata in una catturando una preparazione allegrezza piccoli
Che esprime questo
Questo antigene e quindi arrivando a poter avere una relazione completamente priva di elementi detti e derivati da un'infezione attiva di virus che una per ritiro dall'asta è una cosa molto molto impegnativa perché il virus all'asta deve essere usato in ambienti assoluta mentre
Di conti elevato contenimento tra il terzo e il quarto livello
Ecco salto tutto quello che riguarda corpi ricordo solo che questo modo terrestre capace così di di di identificare l'avvenuta infezione di un bovino richiede un solo reagente per tutti e sette i sierotipi perché l
Per fare le proteine non strutturali sono uguali in tutti mentre invece si ad arrivare a dovessimo fare questo studio quegli anticorpi ognuno dei sette virus ci richiede una lesione al corno un anticorpo quindi immaginato lui
Che complicazione la loro comparsa
Qui sono esempi scusate salto rapidamente perché sono sono fuori tempo
Sono esempi impiego Tippett titoli per poter determinare tra anticorpi monoclonali e signori convalescenti le zone di reattività al fine di poter ad esempio usare questi
Questi piccoli pezzi
Al fine non so di far reazioni di competizione eccetera in cui occorre sapere dove si reca l'anticorpo competitore eccetera l'anticorpo naturale determinati al punto con questi sistemi
Ecco questo è un lo studio di un'altra Perrotta Ivano strutturale fatto col sistema dei pentiti ma che vi risparmio
Corporali solamente dire due parole
Ecco sull'ultimo punto che quello della profilassi cioè oggi e possibile indurre impianto transgeniche
La la legge geniche esprime un altro termine che hanno un'azione vaccinale naturalmente c'è il problema dalla realizzabilità tecnica dell'approvazione dall'accettabilità del consumatore questi vaccini chi chiama prevedibili hanno vantaggi di perché la produzione Galluzzo perché sono commestibili conservando l'attività basso costo eccetera hanno anche un notevole numero di svantaggi
Diffidenza verso gli OGM indebolimento per il passaggio dalla barriera digestiva eccetera ecc
Sì mi sono giudice Tardini ettari
I riflettori utilizzati sono Scauri fino all'area della atto polacco Busek varius impatto io vorrei quali batterici sono Lagerbäck torna lento euro tossine sono potenti o di un'antica la risposta dunque usata perché qui passiamo
Partiamo da un attimo utilizzazione orale sono già stati usati con alcuni
Verso alcuni agenti eziologici specialmente ecco quello che voglio ricordarvi all'asta
Ecco nell'asta è stata fatta una prendendo questo virus astruso di questo tipo devo che l'Alfa Alfa che è una specie foraggera ecco tramite cose che sorvolo perché non c'è più tempo
Si è comunque arrivati
Questo il lavoro fatto dai colleghi sudamericani si è arrivati ad a vere UNESCO un livello di espressione
Di questa proteina virale che quella tv non cinica quindi occorre per la vaccinazione di zero un milligrammi per grammo di
Total solubile proteine tramite il metodo Western Blot per il risultato qual è stato finora è stato utilizzato da Vittorio Pini
Immunizzare Handley per via parenterale oppure alimentando lui ecco
Facendo un Charlène cioè con dieci mila dosi letali TT dal virus da cui siamo partiti
E considerando la protezione come assenza di guerra mia trentasei ore dopo siamo arrivati a una protezione per via intraperitoneale pare all'ottanta per cento e per via orale alza pari al settanta per cento
Con i controlli regolarmente negativi
E lo sviluppo attuale di queste cose che mentre non si è riusciti a indurre un'espressione superiore c'era una quantità di proteina lancinante superiore però si è riusciti a proteggere i vitelli quindi siamo passati da un animale di laboratorio a un animale veramente bersaglio
Dalla malattia
Ringrazio i gli storici che sono arrestati il filmato è stato
Grazie a questo testimone sì molto interessante questo cursus epidemiologico
Con bio tecnologie diagnostiche
Ci sono domande
Siete un po'stanchi però credo che sia importante
Una domanda la professoressa D'Andrea
Scusi come che non riusciamo a debellare l'infezione che ci sono in Italia tra tutti i Paesi della Comunità europea
Curiosità legittima sì quella dei suini silente ha vissuto
La malattia vescicolare i suini
Presente in Italia oramai in via endemica
Però in modo regionalizzato cioè mentre praticamente tutta l'Italia del nord e tutta l'Italia centrale sono
Hanno programmi regionali in cui sono arrivati all'accreditamento di tutta la il comparto diciamo suinicolo nell'Italia meridionale
Anche perché
Riconoscere che nell'Italia minore
Moltissimi all'lamenti hanno Carat
Operazioni ma
Spostati commerciati senza tanti problemi e questa Man
Quella che genera
Lì l'attecchimento
Aver visto da una
Che è vietata
Signor vieta
S'sapete che c'è stata un'
Volle ad esempio in Inghilterra che il Paese che sta
Ma praticamente degli ovvi
Ivo che la vaccinazione
Che gli
Attimi e che ben
Via esprimano dei sintomi Clini
Coerente che
Costituito dall'atto
Di virus infettante
In questo c'erano
E a un certo numero
Sì e questo Nyman
Lei si considera che la vaccinarsi
Ed è la situazione in
Ed è per questo che si è
Parla perché se gli animali
Sono vaccinati
Ieri Peter
Allora si può fare
Ridente questa azione difficile quindi
Sì Malika esistono
Paese che alla ma
Veloce
E la riabilitazione
Necessità di due anni in più Perrotta riottenne
Entro questi sono i
E per cui si tende ah non vaccinare poi
Hanno deciso
Non vaccina
Steva specialmente
Grandissimo mi
Andò deciso di non vaccinare di sostituire la politica dello
Cioè ogni fuoco siccome non si può impedire che avvengono in
Io ne sterminato
O che si fa in questi casi
Quello che è successo in Inghilterra
Sì sono
Però è chiaro che Paesi ci si è chiesti
Politica di stenti grow
Pure se convive stava ci nazione
Intini e poi eventualmente nel tempo soprattutto dico vaccinazione
In are Ray ecco ricordi a
L'amore si chiama
Le nomine azione
Una relazione che per me
Immediatamente
Le è stato
La malattia quindi
Ciò che si può fare su vasta scala
è possibile avere
Re queste situazioni in cui ci possono essere portatori
Chi eccetera eccetera
Grazie bene
Credo
Quelle che sono le applicazioni di biotecnologie
Sironi sulle terapie
Possiamo essere soddisfatti e quindi
Ci sarà il seguito grazie
Questo Semenzato
Buona sera a tutti gran